生物工程活性角膜基质的研制及相容性研究

研究生物工程活性角膜的生物相容性，为进一步临床应用提供理论基础。猪角膜基质脱细胞并去除免疫源性物质形成网状半透明生物材料，将培养的角膜基质细胞与生物材料复合构建生物工程活性角膜基质。对复合物进行倒置显微镜和扫描电镜检测细胞附着情况及材料的细胞相容性；将活性角膜基质移植入新西兰兔角膜囊袋内．细胞用BrdU标记检测在体内移植过程中的存活及转归，不同时间观察角膜的生物相容性及改建情况。结果显示脱细胞基质材料的细胞相容性较好，细胞种植后可存活、黏附并增殖；移植区细胞可有BrdU阳性着色，4周后角膜开始透明，8周后角膜改建基本完成。     

腰椎棘突间区的解剖学参数及临床意义

目的：为腰椎棘突间内固定器械的设计和临床应用提供解剖学依据。方法：测量52具成人完整福尔马林固定标本T12-S1。段脊柱的棘突间距、棘突顶距、棘突长度、相邻棘突上下缘及中央厚度。测量数据用SPm115。软件行方差和相关性分析。结果：各组数据满足正态性、方差齐性。棘突间距从上到下逐渐减小，L1～2为7．61mm（女，7．75），L5～S1为4．03mm（女，6．49）。棘突顶距、棘突长度中段较大，上段和下段较小。棘突顶距，T12～L1为54．63mm（女，54．63），至L2-3，增大为60．18mm（女，53．64）又逐渐变小，至L4～5，减小为45．07mm（女，49．40）。棘突长度，L3最大，25．45mm（女性L4最大18．71mm），L1和L5分别为21．63mm（女，17．08）和21．41mm（女，17．44）。相邻上-棘突下缘厚度普遍大于下一棘突上缘厚度。差值呈偏态分布，中位数为3．28，75％位数为5．13。棘突顶距与身长呈中低度正相关。相邻椎间隙指标呈中高度正相关。女性较男性棘突较短、薄、矮。结论：该研究为腰椎棘突间内固定器械的设计提供了解剖学依据。     

葡萄糖和胆固醇对人肝细胞ANGPTL3基因和蛋白质表达的影响

目的 观察葡萄糖和胆固醇对人肝细胞株(L02)血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like pro-tein3,ANGPTL3)表达的影响,探讨其与糖尿病和高胆固醇血症的关系.方法 以L02细胞为研究对象,将其分为葡萄糖组(G)和胆固醇组(CH).分别在葡萄糖浓度为5.6 mmol/L(G1)、7.0 mmol/L(G2)、11.1 mmol/L(G3)、28.0 mmol/L(G4)、33.0 mmol/L(G5)的培养液和含胆固醇10 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L的培养液中培养.采用RT-PCR方法检测各组细胞ANGPTL3 mRNA表达量,用Western印迹方法检测其蛋白质表达水平.结果 G3～G5组葡萄糖可剂量依赖性地增加ANGPTL3的mRNA表达(P<0.05);在蛋白质表达水平,G2～G5组与G1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);G1～G5组各组间两两比较,除G4组与G5组呈现表达量虽升高,但差异无统计学意义(P>0.05)外,其它各组间差异均有统计学意义(P<0.05).4种胆固醇浓度均可促进L02细胞ANGPTL3的mRNA和蛋白质表达(P<0.05).结论 在一定浓度范围内葡萄糖可剂量依赖性地促进ANGPTL3 mRNA和蛋白质表达;AN-GPTL3的mRNA和蛋白质表达量还受环境胆固醇浓度影响.ANGPTL3的表达可能与糖尿病、高胆固醇血症密切相关.     

丙型肝炎病毒阳性血清体外感染人肝细胞的研究

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)抗体(Ab)阴性,HCV-RNA阳性血清建立体外感染肝细胞模型.方法 HCV Ab阴性,HCV-RNA阳性的窗口期血清与人肝细胞共同培养,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、Western blot、共聚焦显微镜和透射电镜等方法检测细胞内HCV核酸复制、蛋白质表达及超微结构改变.结果 细胞与病毒共同培养7～45 d,细胞内和/或培养上清中可间断检出HCV正、负链RNA;细胞浆内有HCV 核心和NS3抗原的表达;细胞超微结构有改变,并于感染后第24天时观察到类似病毒样颗粒.结论 窗口期血清中的HCV能在人肝细胞7701中复制一段时间.     

面神经颞支的应用解剖学研究

目的:为预防额颞区手术和翼点入路的颅内手术损伤面神经颞支提供解剖学资料。方法:60侧成人头部标本,解剖观测面神经颞支的分支、行程及层次。结果:(1)面神经颞支多为2~4支,占95.00％(57侧)。(2)面神经颞支离开腮腺上缘后向前上走行,从颧弓浅面跨过进入额颞区,后走行于浅筋膜和颞筋膜浅层之间;在腮腺上缘及颧弓上缘处面神经颞支的最后1支距耳屏尖的距离分别为(23.79±0.27)mm和(30.67±0.37)mm。结论:面神经颞支入肌前在颧弓以下一段位置较深、以上表浅。从耳屏尖向前23mm范围内无该神经通过,为手术安全区。     

血小板膜糖蛋白Ⅰa基因多态性与心肌梗塞的关系

目的　探讨汉族人群心肌梗塞发生与血小板糖蛋白 (glycoprotein,GP) a基因 80 7C/ T多态性的关系。方法　采用病例对照研究 ,应用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (polymerase chain reaction-se-quence specific primers,PCR-SSP)方法检测 12 7例心肌梗塞患者 (急性或陈旧性 )和 175名正常对照血小板 GP a基因 80 7C/ T多态性。结果　心肌梗塞组和对照组 T和 C等位基因的分布差异有高度显著性(T:42 .70 %比 3 2 .0 0 % ,C:57.3 0 %比 68.0 0 % ,P<0 .0 1) ;无论在所有受试者还是在年龄≤ 60岁的受试者中 ,心肌梗塞组 (TT+ TC)基因型的频率均显著高于对照组 ,所有年龄受试者中 ,69.3 4 %比 51.43 % ,P<0 .0 0 5,比数比 =2 .14 ,95%可信区间为 1.3 4～ 3 .41;年龄≤ 60岁的受试者中 ;75.90 %比 51.52 % ,P<0 .0 0 5,比数比 =2 .96,95%可信区间为 1.58～ 5.55;L ogistic多因素回归分析显示血小板膜 GP a T等位基因为心肌梗塞的发生独立危险因素 (比数比 =4.96,95%可信区间为 2 .55～ 10 .90 )。结论　血小板膜 GP a T等位基因与心肌梗塞的发生相关联 ,可能为心肌梗塞发生的一种遗传易感性标志     

新疆南疆地区嗜人T淋巴细胞病毒I型血清流行病学调查

通过血清流行病学调查，了解人嗜Ｔ淋巴细胞病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－１）在新疆南部（南疆）少数民族地区的流行情况，自南疆喀什，和田，阿图什地区采集正常人群中不同年龄组，不同民族的血清标本２６４２份，其中维吾尔族（维族）１０８２份，汉族１０８９份，柯尔克孜族（柯族）４７１份。用免疫荧光法（ＩＦＡ）检测上述血清中ＨＴＬＶ－１ＩｇＧ抗体，结果维族抗体阳性者为０．７４％（８／１０８２）汉族为０（０／１０８９）柯族     

表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D的重组痘苗病毒活疫苗株的建立

我们以前曾报道，表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）的重组痘苗病毒（实验疫苗株）能保护被免疫小鼠抵抗致死量ＨＳＶ－２病毒的攻击。在此工作基础上，严格按人用疫苗研究要求的实验条件，成功地建立了表达ＨＳＶ－２ｇＤ的重组痘苗病毒活疫苗株。首先将经聚合酶链反应（ＰＣＲ）修饰的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入痘苗表达质粒ｐＪＳＢ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７５Ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ＋痘苗病毒天坛７６１株感染的人胚肺二倍体细胞。经同位素探针（３２Ｐ－ＨＳＶ－２ｇＤ）原位杂交法和３轮蚀斑纯化，筛选出基因组内整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组痘苗病毒。斑点和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实，ＨＳＶ－２ｇＤ基因已插入痘苗病毒基因组内预期的ＴＫ区段，间接免疫荧光检测显示，重组病毒感染细胞后能有效地表达ＨＳＶ－２ｇＤ蛋白。     

复方中药注射液对小白鼠艾氏腹水癌细胞膜表面的(Na~+-K~+)-ATP酶和微绒毛影响的电镜观察

本实验应用电镜细胞化学和扫描电镜技术,观察到小白鼠艾氏腹水癌细胞在复方中药注射液的连续作用下,膜表面(Na~+-K~+)-ATP酶活性减弱,微绒毛减退等变化,同时观察到该复方中药注射液对癌细胞增殖的抑制作用,抑瘤率可达87%,癌细胞增殖和(Na~+-K~+)-ATP酶活性及微绒毛的多少有平行关系。讨论了该复方中药抑制癌细胞增殖与膜表面(Na~+-K~+)-ATP酶活性和微绒毛变化的关系。