噬菌体基因组PaP1的鸟枪法测序及其生物信息学分析

目的对分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP1进行全基因组测序，并进行初步的生物信息学分析，为噬菌体的改造及其治疗奠定基础。方法采用鸟枪法随机测序和重叠群组装的策略对PaP1进行基因组测序，并通过EditSeq、开放读码框架（ORF）finder、GeneMark^TM、BPROM、FindTerm、Palindromes、Equicktandem及FAStRNA等软件对所获得的基因组序列的一般特征、蛋白质同源性序列及tRNA基因等进行分析和预测。结果PaP1基因组约为90000bp，其中最大重叠群为28249bp。在已获得序列中预测出120个ORFs、41个推定基因及9个簇集在5’末端的tRNA基因。在41个推定基因中，预测出编码DNA末端酶大亚单位、DNA解旋酶B亚单位、肽聚糖结合蛋白及3个尾丝蛋白等6个基因的功能。结论鸟枪法只能测出噬菌体基因组PaP1的部分序列，重复序列的存在是该基因组测序困难的原因。     

用Lyman NTCP模型分析原发性肝癌三维适形放疗引起的放射性肝病

目的建立原发性肝癌三维大分割适形放疗Lyman NTCP模型的参数和探讨放射性肝病的影响因素。方法109例患者进行大分割三维适形放疗,其中93例患者肝硬化Child-Pugh分级A级,16例为B级。患者每星期治疗3次,每次间隔48h,(4．8±0．5)Gy/次,平均剂量(53．5±5．5)Gy。用最大拟然比方法分别得到Child-A和Child-B患者Lyman模型中的NTCP参数。结果共有17例发生放射性肝病,发生在Child-A组8例,Child-B组9例。多因数分析表明,肝硬化分级程度是与放射性肝病相关的独立因素(P=0．000)。所有患者的NTCP参数为n=1．1,m=0．35,TD_(50) (1)=38．5Gy；Child-A级为n=1．1,m=0．28,TD_(50)(1)=40．5Gy；Child-B级为n=0．7,m=0．43,TD_(50)(1)=23Gy。结论肝硬化分级是预测放射性肝病发生的危险因子。Child-B患者进行适形放疗易引起放射性肝病。     

创伤性休克的液体超负荷分析

目的 探讨创伤性休克患者发生液体超负荷的原因和治疗方法。方法 总结存活时间超过24h的286例创伤性休克患者，对休克纠正后出现全身性水肿患者进行分析，比较存活与死亡患者在伤后第1～8天的液体出入量。结果 286例创伤性休克患者中，出现水肿者262例（91．6％），存活232例（88．5％），死亡30例（11．5％）。死亡组的液体入量明显多于存活组（P〈0．05），液体出量则显著少于存活组（P〈0．05或P〈0．01）。存活组在伤后第4、5天出现液体负平衡即液体出量大于液体入量600～700mL（P〈0．05），而死亡组未出现液体负平衡现象。结论 创伤性休克的抢救过程中容易造成液体超负荷，液体出量增加甚至出现液体负平衡现象，预示着病情好转，此时只要生命体征稳定即可，不宜过分强调出入量平衡而大量补充液体。     

高转换型肾性骨病中骨保护素及其配体的表达和形态计量学观察

目的 观察高转换型肾性骨病中骨保护素及其配体 (OPG，RANKL)的表达，并与骨形态计量学指标进行相关分析。 方法 选择10例慢性肾衰尿毒症患者和3例正常人进行髂骨活检术，获得骨组织标本。采用免疫组化方法检测OPG和RANKL蛋白质的表达。采用全自动图像分析系统进行骨组织形态计量学测定。结果 10例慢性肾衰尿毒症患者经骨病理学检查证实均为高转换型骨病，以破骨细胞活化形成骨吸收陷窝伴或不伴骨矿化不全为特点。免疫组化显示尿毒症患者骨组织中以RANKL阳性表达为主。与正常对照相比，RANKL阳性表达细胞数目显著增加，OPG阳性表达细胞数目显著减少。尿毒症患者RANKL的阳性表达细胞数目与骨吸收面积和破骨细胞数目呈显著正相关。结论 高转换型肾性骨病中，PTH的溶骨作用可能是通过OPG/RANKL/RANK系统介导的。     

GM6001的玻璃体代谢及视网膜毒性作用的研究

目的：评价人工合成的金属蛋白酶抑制剂GM6001在玻璃体中的代谢及其眼内安全性。方法：选择健康成年的青紫蓝兔16只，随机分成4组，右眼分别玻璃体房注射GM6001各0．05mL（A组100μmol、B组75μmol、C组50μmol和D组25μmol）。左眼分别注射PBS0．05mL作为对照。各组术后不同时间取玻璃体样本，应用高效液相色谱分析仪检测其中GM6001的浓度。术前术后进行裂隙灯、间接检眼镜和视网膜电图（ERG）检查，最后处死动物对视网膜进行光镜及透射电镜的检查。结果：术后前3d，玻璃体房GM6001浓度下降迅速，而后保持缓慢降低至术后28d完全清除。术后裂隙灯、间接检眼镜、ERG检查、视网膜光镜及透射电镜观察，各组均未发现异常改变。结论：GM6001在玻璃体房注射对视网膜是安全的。GM6001在单次玻璃体房注射后2wk可维持有效浓度。     

精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的初步研究

目的探讨精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的可行性。方法正常精液标本上游处理后,进行常规冷冻和冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻,复苏后分别从活力参数及电镜下超微结构等指标比较两种冷冻方法的效果。结果两种方法冷冻后精子存活率、活动率之间差异无显著性(48%∶48%;44.5%∶43.5%,P>0.05),但均较未冷冻的89%和88.5%明显下降(P<0.001)。超微结构亦较未冷冻时发生了一定的改变,但核结构基本保持完整。结论精子冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻是一种简单、方便而行之有效的冷冻方法。     

经皮椎间盘摘出联合医用臭氧治疗腰椎间盘突出症

目的探讨经皮髓核摘除术(PLD)联合医用臭氧注射治疗腰椎间盘突出症的临床效果及可行性。方法临床与影像检查确诊为腰椎间盘突出25例,先行PLD,后行椎间盘内及椎旁注射臭氧。结果25例病人治疗后经一年随访,治愈21例,有效24例,无效1例,无一例并发症。结论PLD联合医用臭氧治疗腰椎间盘突出症,安全可靠,可改善治疗效果,减少不良反应,值得推广应用。     

撬拨复位外固定架治疗Pilon骨折

[目的]采用关节镜监视下撬拨复位外固定架治疗Pilon骨折。[方法]2002年2月－2004年4月采用关节镜监视下撬拨复位超踝关节可动外固定架结合克氏针、空心螺钉治疗Pilon骨折9例。[结果]本组病例随访时间平均12．6个月。采用Teeny＆Wiss踝关节症状和功能评分法，术后评分80—96分，平均88分。优秀3例，良好5例，一般1例。[结论]采用关节镜监视下撬拨复位超踝关节可动外固定架结合克氏针、空心螺钉治疗Pilon骨折能更好的恢复关节面的解剖关系，有利于踝关节的早期活动，可防止踝关节退行性变、创伤性关节炎及关节僵硬的发生，可避免伤口并发症和骨不连的发生，疗效满意。     

腹腔镜下切口疝补片修补术的临床应用

目的 探讨腹腔镜下腹壁切口疝修补术的手术方法、安全性等问题。方法对2004年3月至2006年5月79例行腹腔镜下补片修补术治疗腹壁切口疝病人的临床资料进行分析。结果 78例（98．7％）手术成功，1例因腹腔内广泛粘连而中转开放修补。平均手术时间为88min，平均术后住院4．6d，18例（22．8％）病人术中发现有1个以上的隐匿性缺损。术后并发症：术后短期内修补区腹壁明显疼痛58例（73．4％）。腹壁缝合点较长时间疼痛6例（7．6％），浆液肿14例（17．7％），无手术死亡，1例术后出现肠瘘，经保守治疗好转，1例腰部切口疝的病人术后复发。结论 多数病人腹壁切口疝可以经腹腔镜行粘连松解及补片修补术，并可在术中发现其他隐性缺损，手术安全性较高。对腹腔内广泛粘连而影响操作器械进入及粘连分离者，应及时中转开腹手术。     

原发性肾上腺皮质癌的诊治分析

目的总结和提高原发性肾上腺皮质癌的诊治水平。方法回顾分析16例肾上腺皮质癌患者的临床资料。根据其临床症状、内分泌功能测定、影像学特点做出诊断，手术治疗并随访。结果16例患者中，内分泌功能紊乱者8例，以库欣征、性征异常、醛固酮增多症为主。超声、CT、MRI测定肿瘤直径为4．8～19．5cm，平均7．8cm。3例有远处转移。行根治性切除术13例，侵及同侧肾脏者做肾和肾上腙切除术2例，肾上腺肿瘤并腔静脉癌栓切除2例，腔静脉部分切除1例。病理结果：Ⅰ其耳2例，Ⅱ期8例，Ⅲ期3例，Ⅳ期3例。随访3-62个月，手术2年以上的11例患者中有6例仍存活，但1例肺转移，1例骨转移；死亡5例，平均存活26个月。结论肾上腺皮质癌患者预后差。影像学检查结合临床症状是早期诊断的关键，根治性手术是惟一有效的治疗方法。