Apr-1基因对胆管癌细胞QBC939细胞周期的调节机制研究

目的 研究Apr-1基因对胆管癌细胞的细胞周期调节作用及机制.方法 采用脂质体介导法将Apr-1基因转染胆管癌细胞系QBC939,建立稳定表达Apr-1基因的细胞模型(QBC939-Apr-1).运用RT-PCR检测转染前后QBC939细胞系中Apr-1 mRNA的表达;流式细胞分析以及生长曲线等方法观察目的 基因对该细胞系的细胞周期的影响.采用细胞周期基因芯片,观察Apr-1基因对细胞周期相关基因表达的调节作用.结果 Apr-1基因在QBC939细胞系中呈阴性表达,转染Apr-1基因的QBC939-Apr-1细胞出现了Apr-1 mRNA的表达,成功建立了稳定表达Apr-1基因的细胞模型,该细胞模型表现出细胞生长受抑,细胞周期显示G2期细胞由9%增加至13%(P＜0.01).细胞周期抑制;并且细胞周期基因芯片检测结果发现:Skp2、UBE基因的表达水平出现明显上调,而CDC6、Cyclin H等25种基因的表达下降,其中MRE11A、CKS2、CDK8、CDC45下调在3倍以上.结论 Apr-1基因在体外能够使QBC939细胞的细胞周期在G2期延长,出现细胞周期多种调节基因的表达差异.

Abstract：

Objective To investigate the role and the mechanism of Apr-1 gene on cholangiocarcinoma QBC939 cell lines proliferation and cell cycle regulation. Methods Apr-1 gene was transfected into QBC939 cells by using liposomes to establish a QBC939 cell model ( QBC939-Apr-1 ) stably expressing Apr-1 gene. Apr-1 mRNA expression and the changes in cell cycle and cell growth of QBC939 cells were analyzed by RT-PCR, flow cytometry ( FCM ) and growth curve before and after transfection. The regulatory effect of Apr-1 gene on the expression of cell cycle-related genes was investigated in QBC939 cells before and after Apr-1 transfection using cell cycle gene microarrays. Results Significant suppression of cell growth was observed with the cell model stably expressing Apr-1 gene. Apr-1 over-expression caused cell arrest from 9% to 13% (P ＜0. 01 ) increase in G2 population. Cell cycle gene microarrays demonstrated that the expression of Skp2 、UBE1 was up-regulated, while the expression of MRE11A 、CKS2 、CDK8 、CDC45 was down-regulated by more than 3 folds. Conclusions Apr-1 gene suppresses QBC939 cell proliferation in vitro, QBC939 cells presented with differences in the expression of cell cycle-related genes after Apr-1 gene transfection.     

胰腺癌外科治疗相关问题

胰腺癌是恶性程度很高的消化道肿瘤,手术切除仍是目前治疗胰腺癌的唯一方法,但是由于胰腺肿瘤的解剖和生物学特性,使得目前手术治疗上仍面临诸多亟待解决的问题,必须加以重视。本文希望通过术前可切除性评估及手术切缘情况、胰腺癌可能切除、术中淋巴结清扫范围、术前减黄及姑息手术等六个方面阐述目前胰腺癌手术治疗中出现的一些问题和研究的最新进展,以期进一步提高我国胰腺癌的诊治水平。     

慢性粒细胞白血病患者的骨髓间充质干细胞对树突状细胞功能的调控

目的 探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓间充质干细胞(MSC)对单个核细胞来源的树突状细胞(DC)的功能的调控及其机制.方法 采用细胞贴壁法获取CML患者骨髓MSC,在低血清培养液中培养和扩增.获取正常成人志愿者外周血单个核细胞,直接在体外诱导生成DC(正常DC组),另加入正常志愿者MSC(正常诱导组)或CML患者骨髓MSC(CML诱导组)以诱导生成DC.用流式细胞仪检测各组收获DC的免疫表型及MSC对DC吞噬功能的影响;用酶联免疫吸附试验检测各组DC白细胞介素12(IL-12)的分泌;混合淋巴细胞反应检测MSC对DC介导的异体T淋巴细胞增殖能力的抑制作用.结果与正常DC组相比较,正常诱导组和MSC诱导组培养7 d后未成熟DC的共刺激分子CD1a、CD80、CD83、CD86、CD40和HLA-DR的表达量较低(P＜0.05);与正常DC组相比较,诱导9 d后,正常诱导组和MSC诱导组成熟DC的CD40、CD86和CD83的表达量较低(P＜0.05).与正常DC组相比较,CML诱导组的不成熟DC的吞噬功能显著降低(P＜0.05),CML诱导组DC IL-12的分泌量显著下降(P＜0.05).CML诱导组的DC对T淋巴细胞增殖的刺激作用有所下降(P＜0.05).结论 CML患者骨髓MSC对DC的分化成熟以及其免疫调控能力有一定的抑制作用.

Abstract：

Objective To study the effects and mechanisms of mesenthymal stem cells (MSCs)derived bone marrow of patients with chronic myelogenous leukemia (CML) on function of monocytederived dendritic cells in vitro. Methods Bone marrow mononuclear cells from CML patients were obtained and cultured. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) derived from normal volunteers were isolated and cultured in DC differentiational condition. Moreover, PBMCs were co-cultured with CML bone marrow-derived MSCs (CML-MSC) or normal volunteers' bone marrow-derived MSC (normal-MSC) in DC differentiational condition. Immunophenotype and the endocytosis of monocytederived DCs were investigated by FACS. The level of IL-12 was evaluated by enzyme linked immunosorbant assay (ELISA). The immunoregulatory ability was detected by mixed lymphocyte culture assay. Results CML-MSCs or normal-MSC inhibited the up-regulation of CD1a,CD40,CD80,CD86,and HLA-DR during DC differentiation and reduced CD40,CD86,and CD83 expression during DC maturation. CML-MSCs inhibited the endocytosis of DCs and decreased their capacity to secret IL-12. CML-MSC could significantly suppress the function of DCs stimulating proliferation of T lymphocytes. Conclusion CML-derived MSCs harbored effect on the differentiation and maturation of DCs in vitro ; CML-MSC could inhibit the immunregulation of DCs.     

顺行球囊扩张治疗移植肾输尿管梗阻：附4例报告

目的探讨经皮肾穿刺造瘘顺行球囊扩张治疗移植肾输尿管梗阻的安全性和疗效。方法回顾分析2002年以来本院4例接受顺行球囊扩张治疗的移植肾输尿管梗阻的患者资料,3例先行经皮肾穿刺造瘘,待肌酐降至正常,经造瘘口行输尿管镜术,1例直接行经皮肾穿刺造痿输尿管镜术,证实梗阻系输尿管或输尿管膀胱吻合口狭窄所致,顺行球囊扩张,成功后留置双J管。结果4例患者均1次扩张成功,术后输尿管梗阻症状缓解,尿量恢复至梗阻前水平,随访6～24个月,肾功能稳定,无梗阻复发。结论顺行球囊扩张治疗移植。肾输尿管梗阻是可行的。     

广西HIV感染者呼吸道非结核分枝杆菌定植情况和临床特点分析

目的呼吸道非结核分枝杆菌定植是HIV感染者发生播散性非结核分枝杆菌感染的危险因素,并可能对肺结核的诊断造成干扰。我国HIV感染者中非结核分枝杆菌呼吸道定植情况和临床特点目前尚无较大样本的研究报道。本文分析HIV感染者痰培养中非结核分枝杆菌的阳性率和相关因素,从而总结其临床特点。方法 2006年8月至2008年7月,对广西省4个诊疗机构中CD4〈350的HIV感染者进行临床症状、胸片、痰涂片,痰分枝杆菌培养和血液分枝杆菌培养在内的结核筛查。结果 1073例HIV感染者在结核筛查时进行了痰分枝杆菌培养,检出非结核分枝杆菌87例（8.1%）,129例（12.0%）为结核分枝杆菌。在痰培养阳性的标本中,43%为非结核分枝杆菌。非结核分枝杆菌在呼吸道的定植率随着患者CD4水平降低而逐渐升高,在CD4计数〉200/μl、100～200/μl、50～100/μl和〈50/μl的患者组中分别为2.8%、6.4%、7.1%和9.8%。痰涂片抗酸杆菌阳性的患者中12.0%为非结核分枝杆菌,非结核分枝杆菌呼吸道定植的患者中8.5%痰涂片结果为抗酸杆菌阳性。与痰培养阴性的患者相比,有呼吸道非结核分枝杆菌定植的患者CD4水平较低,除体重下降更多见外,其他临床症状如发热、咳嗽、盗汗、乏力等,以及胸片异常表现均未增加。结论我国HIV感染者中痰培养非结核分枝杆菌的阳性率较高,尤其是在CD4〈200的患者中,需要加强临床观察。在未有进行细菌培养的情况下,非结核分枝杆菌在呼吸道的定植可能造成结核的误诊,应给予重视。     

卡托普利对血管成形术后再狭窄作用的实验研究

目的探讨卡托普利对血管成形术后再狭窄的干预作用。方法SD雄性大鼠60只,分单损组、干预组和对照组。单损组采用改良导丝法制作大鼠颈动脉再狭窄模型。干预组将卡托普利研磨成粉状,生理盐水稀释配制成5mg/ml溶液,分别于制模前6 d开始按10 mg/(kg.d)剂量经灌胃针给予大鼠至术后各时间点。对侧颈总动脉作为假手术对照组。每组各时间点6只大鼠,于制模后1天、4天、7天、14天及28天原位灌注固定取材。根据HE染色标本情况,选血管形态结构完整的50个标本,进行HE染色,采用病理图像分析系统染色片进行形态计量分析。结果损伤后从第7天起新生内膜厚度和面积逐渐增加,到28天达峰值;与单损组比较,干预组血管壁三层厚度无显著差别,干预组第14、28天新生内膜面积显著减低。狭窄率于血管损伤后逐渐增加,到28天达峰值,与单损组比较,干预组在14天和28天狭窄率明显变小,各时间点内弹力板面积、外弹力板面积及重塑指数两组之间无显著差别。结论卡托普利减小大鼠颈动脉损伤后新生内膜面积及狭窄率,抑制新生内膜形成,但不改变内、外弹力板面积及重塑指数,不影响血管收缩性重塑。     

腹腔镜脾切除术在外伤性脾破裂中的应用体会

目的探讨腹腔镜脾切除术治疗外伤性脾破裂的安全性与可行性。方法回顾性分析我院2006年10月至2009年10月期间经腹腔镜脾切除治疗的48例外伤性脾破裂患者,男32例,女16例。根据脾蒂的不同类型分别采取不同的处理方法,其中处理脾蒂采用钛夹夹闭12例,丝线结扎结合钛夹夹闭8例,圈套器结合钛夹夹闭处理10例,结扎束LigaSure处理8例,Endo-GIA处理8例。结果 32例顺利完成腹腔镜脾切除术,14例改行手助腹腔镜脾切除术,2例为脾周围粘连紧密伴胃短血管破裂出血而中转开腹。手术时间120~170 min,平均140 min;术中出血量300~1 200 ml,平均800 ml。术后无胃漏、胰漏、大出血等并发症发生。结论腹腔镜脾切除治疗外伤性脾破裂中,根据脾蒂的不同类型,采取个体化处理方案可减少术中出血及副损伤,提高手术成功率。     

直肠癌神经周围浸润的临床研究

目的 探讨直肠癌神经周嗣浸润（PNI）的临床意义.方法 回顾性分析郴州市第一人民医院2003年1月至2005年1月间行直肠前切除低位吻合术（Dixon）的204例直肠癌患者的临床资料,标本常规石蜡切片后行苏木精-伊红染色,以肿瘤细胞浸润神经束或神经束膜判定为PNI阳性.分析PNI与直肠癌临床病理特征和预后的关系.结果 204例直肠癌患者中PIN阳性65例（31.9%）.PNI与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤生长方式、分化程度、肿瘤切除情况有关（P＜0.05）.PNI阳性组患者术后生存时间为（43.8±1.5）个月,明显短于PNI阴性组的（57.2±1.5）个月（P＜0.01）.PNI阳性的Ⅱ期患者术后平均生存时间为（46.5±3.2）个月,显著低于Ⅲ期患者的（55.7±1.2）个月（P＜0.05）.结论 PNI可作为直肠癌的预后判断指标.     

介入和外科手术治疗布加综合征39例诊治体会

目的总结介入治疗、根治术、转流减压术治疗布加综合征（Budd-Chiari syndrome,B-CS）的诊治经验。方法回顾性分析39例BCS患者的临床资料,其中行介入治疗15例,根治手术9例,转流手术15例。结果手术均一次性获得成功,围手术期死亡率0%,下腔静脉压力平均下降14.8（5～24）cmH2O。所有病例术后症状、体征不同程度消退。随访32例,13例基本恢复正常生活,11例可从事轻度体力劳动,8例不能从事体力劳动但生活可自理。1例胸腔积液反复出现,术后1年基本消失,遗留胸廓塌陷。1例根治术后复发,拒绝再次手术治疗,随后失访。结论介入治疗逐渐成为B-CS的首选术式,但根治术和转流术等外科术式也各有其适应证和不可替代性。临床工作中应根据病理类型和血流动力学变化特征,制定个体化的最佳手术方案。     

肝泡型包虫病的手术治疗:附43例病例分析

目的 探讨肝泡型包虫病手术治疗的方式和疗效.方法 对我院2000年至2008年收治的43例肝泡型包虫病患者分成两组回顾性分析.根治性手术组19例、姑息性手术组24例.结果 姑息性手术组围手术期病死1例,2例术后出现远处转移,2例术后出现肝内播散,4例因术后再次出现黄疸、3例因术后反复发作胆管炎而入院治疗.根治性手术组3例术后出现胆瘘,1例出现胆管炎,3例出现消瘦.术后30例获得随访(≤3年至≤8年).随访期间,姑息性手术组有10例患者病死,长期生存率为28.5%(4/14);根治性手术组中有1例患者因贲门癌病死,长期生存率为93.7%(15/16).结论 根治性手术是治疗肝泡型包虫病的首选方法.可使患者获得临床治愈并长期存活.而姑息性手术多用于解决梗阻性黄疸或并发症,以便为进一步治疗争取时间.

Abstract：

Objective To study the operative techniques and the surgical results of hepatic alveolar echinococcosis. Methods Forty three patients with hepatic alveolar echinococcosis treated in our Hospital from 2000 to 2008 were studied retrospectively. They were divided into two groups: radical resection group (19 cases) and palliative resection group (24 cases). Results There were 1 surgeryrelated death, 2 patients with remote metastases, 2 patients with intrahepatic dissemination, 4 patients with recurrent jaundice and 3 patients with cholangitis in the palliative resection group. There were 3 patients with biliary fistula, 1 patient with cholangitis and 3 patients with emaciation in the radical resection group. Among the 30 patients followed-up for ≤3-≤8 years, 10 patients died in the palliative resection group and the long-term survival rate was 28.5% (4/14). One patient died from gastric cancer in the cardiac in the radical resection group and the long survival rate was 93. 7%(15/16). Conclusions The first choice of treatment for hepatic alveolar echinococcosis is radical resection. Patients could be cured by radical resection. Palliative surgery is an option for patients not manageable otherwise.