腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

Double-bundle anatomical versus single-bundle isometric medial patellofemoral ligament reconstruction for patellar dislocation

Purpose

The purpose of this study was to evaluate reconstruction of the medial patellofemoral ligament (MPFL) using the double-bundle anatomical or single-bundle isometric procedure with respect to the patients’ clinical outcomes.

Methods

In this retrospective study, we evaluated the clinical outcome of double-bundle anatomical versus single-bundle isometric reconstruction of the MPFL for patellar dislocation patients. Sixty-three patients were included in this study from August 2004 to January 2008. From August 2004 to September 2006, MPFL reconstruction using a single-bundle isometric technique was performed in 21 patients (26 knees). Since October 2006, the double-bundle anatomical reconstruction of the MPFL has been used as the routine surgical procedure. It was performed in 37 patients (44 knees). Fifty-eight patients (70 knees) could be followed up. According to the different techniques, we divided the patients into two groups: group D with double-bundle anatomical reconstruction (37 patients) and group S with single-bundle isometric reconstruction (21 patients). Clinical evaluation consisted of the number with a patellar re-dislocation, patellar apprehension sign, Kujala score, subjective questionnaire score, the patella lateral shift rate and patellar tilt angle measured by cross-sectional CT scan.

Results

According to the Kujala score and the subjective questionnaire score, the outcome of the double-bundle group was better than the outcome of the single-bundle group especially in the long-term. Patellar re-dislocation occurred in three patients in the group S, while no re-dislocation occurred in the group D. In total, 26.9 % of group S was considered to have patellar instability, compared to 4.54 % of the group D. After operation, the patellar tilt angle (PTA) and the patella lateral shift rate (PLSR) were restored to the normal range, with statistical significance (P < 0.05) compared to the preoperative state.

Conclusion

Single- and double-bundle reconstruction of the MPFL can both effectively restore patella stability and improve knee function. However, outcomes in the follow-up period showed that the double-bundle surgery procedure was much better than in single-bundle surgery.     

非剥脱1550nm铒玻璃点阵激光治疗活动性痤疮及痤疮瘢痕临床疗效观察

目的：观察非剥脱1550nm铒玻璃点阵激光治疗活动性痤疮及痤疮凹陷性瘢痕的临床疗效及安全性。方法：应用非剥脱性1550nm铒玻璃点阵激光治疗中重度痤疮患者25例，其中16例表现为活动性痤疮皮损（粉刺、丘疹、脓疱、结节）合并痤疮后凹陷性瘢痕，3例为痤疮瘢痕不伴活动性皮损，6例为活动性皮损不伴瘢痕形成。治疗1-3次，每次间隔3-4周，于末次治疗1个月后观察疗效。结果：活动性皮损22例，痊愈2例（9．1％）、显效14例（63．6％）、有效6例（27．3％）、无效或恶化0例（O％），总有效率为72．7％；痤疮凹陷性瘢痕19例，痊愈2例（10．5％）、显效10例（52．6％）、有效7例（36．8％）、无效或恶化0例（0％），总有效率为63．2％。且随着治疗次数的增加疗效逐步提高。术后仅出现轻度红肿，平均2-3天消退，均无色素沉着、水疱等不良反应，无1例恶化，患者满意率达840。结论：非剥脱1550nm铒玻璃点阵激光治疗活动性痤疮及痤疮后凹陷性瘢痕均有显著疗效，且安全、不艮反应轻，患者满意率高。     

肝门部胆管癌外科治疗分析

目的　研究影响肝门部胆管癌疗效的因素。方法　回顾性分析 1997～ 2 0 0 2年收治的198例肝门部胆管癌的临床资料。结果　 198例的主要临床表现为黄疽 (94 5 % ,187例 )、瘙痒(5 6 6 % ,112例 )和腹痛 (33 8% ,6 7例 )。Bismuth CorletteⅠ型 14例 ,Ⅱ型 19例 ,Ⅲa型 12例 ,Ⅲb型 15例 ,Ⅳ型 112例 ,分型不清楚者 2 6例。手术切除 12 0例 (83 3% ) ,根治性切除 5 9例 (41 0 % ) ,姑息性切除 6 1例 ,剖腹探查胆道置管引流 2 4例 ,ERCP及PTCD内外引流 5 4例。 16例术后行放射治疗。术后生存时间与职业、术前最高血清总胆红素水平、手术方式和术后放疗四个因素显著相关。ENBD、ERBD或EMBE、胆道探查置管引流、肿瘤姑息切除、根治切除不同治疗方式的术后生存时间总体差异有显著意义 (χ2 =87 0 4 89,P <0 0 1)。结论　早期诊断和根治切除是提高肝门部胆管癌疗效的重要措施。     

载银磷酸锆纱布对烧伤创面常见细菌作用的实验研究

目的 了解载银磷酸锆纱布对烧伤大鼠创面感染常见细菌的抗菌效力。方法制作Wistar大鼠烫伤(以下称烧伤)感染模型，采用试管双倍稀释法测定载银磷酸锆及磺胺嘧啶银的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。观察大鼠创面用磺胺嘧啶银纱布、普通尢菌纱布、载银磷酸锆纱布(小水洗及水洗20次)后痂下组织的细菌计数和对创面愈合的作用。结果载银磷酸锆对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠竹菌的MIC各为8、8、16mg／L，MBC各为16、8、32mg／L，为磺胺嘧啶银的2～8倍?大鼠创面用未水洗的载银磷酸锆纱布覆盖后，痂下细菌计数比用磺胺嘧啶银纱布低91％，比普通无菌纱布低99％未水洗的载银磷酸锆纱布对创面愈合的作用明显优于其他两种纱布，且其痂下组织细菌计数与水洗20次的效银磷酸锆纱布比较，差异无显著性意义(P＞0．05)。结论载银磷酸锆埘烧伤创面感染常见细菌有较强的抑制和杀灭作用，其敷料可作为治疗措施中新的选择。     

两种靶控方法输注异丙酚和瑞芬太尼的安全性和有效性比较

目的 比较靶控血浆浓度和效应室浓度输注异丙酚和瑞芬太尼的安全性及有效性。方法 选择44例腹腔镜胆囊切除的病人,年龄18～65岁,ASA Ⅰ～Ⅱ级,随机分为靶控血浆浓度组(P组)和效应室浓度组(E组)。设定异丙酚和瑞芬太尼的靶浓度分别为4 μg/ml和2 ng/ml。观察给药后意识消失时间、血液动力学变化以及听觉诱发电位指数(AAIs)的变化。术中调整两药靶浓度保持AAIS低于20。记录术毕停药后自主呼吸恢复和睁眼时间和AAIs的恢复。结果 E组意识消失的时间[(0.45±0.10)min]明显短于P组;此时两药的用量也明显高于P组。两组均能引起明显的低血压,但降低程度相似,且均未见严重的心血管副作用。AAIs在意识消失时P组为41±22;E组49±16:但插管时均在20以下。术中血液动力学保持较低水平(P<0.01)。两组的插管评分、麻醉质量评分相似。术后自主呼吸恢复时间和睁眼时间两组均无统计学差异。Aldrate评分及手术结束时疼痛评分差异均无显著性。结论靶控血浆和效应室浓度输注均可达到满意的麻醉效果,但靶控效应室诱导时间更短,且无明显心血管副作用。     

瘢痕成纤维细胞中cyclin D1、p16的表达及关系研究

目的:了解细胞周期蛋白D1、p16在病理性瘢痕中的表达及它们之间的相互关系,以探讨他们在瘢痕形成过程中的作用。方法:采用免疫组化(SP法)对8例成熟瘢痕、11例增生性瘢痕、11例瘢痕疙瘩及8例正常皮肤组织进行染色,观察CyclinD1和p16在不同组织中的表达。结果:正常皮肤及普通瘢痕成纤维细胞中CyclinD1、p16均为阴性;增生性瘢痕与瘢痕疙瘩成纤维细胞中CyclinD1、p16与正常皮肤相比均有极显著性差异(P<0.05);瘢痕疙瘩成纤维细胞CyclinD1表达高于增生性瘢痕,且有显著性差异(P<0.05);p16在瘢痕疙瘩成纤维细胞的表达比增生性瘢痕为高,但两者之间没有统计学差异.结论:CyclinD1、p16在病理性瘢痕的发生及发展中起重要的作用。在瘢痕疙瘩里p16的细胞抑制作用可能无法与CyclinD1的促细胞增殖作用相拮抗,所以细胞呈现持续增殖状态;而在增生性瘢痕里CyclinD1与p16可能处于相对的平衡状态,所以其生长具有一定的自限性。     

人脐血中血管内皮祖细胞体外扩增和鉴定的实验研究

目的：探讨从人脐血中分离、培养、体外扩增血管内皮祖细胞(EPC)的方法及体外进行EPC的鉴定。方法：采用密度梯度离心法从脐血中分离EPC，体外分别培养在包被有FN和不包被FN的培养皿中，采用免疫组织化学技术(SABC法)鉴定培养贴壁细胞表面标志CD31、CD34及KDR的表达；流式细胞仪检测细胞表面标志CD133及表达CD133细胞比例。结果：包被FN的培养皿中细胞贴壁及增殖均比未包被的多，免疫组化染色CD31、CD34及KDR均呈阳性，培养第4天流式细胞仪检测CD133^ 占21．3％。结论：密度梯度离心法可用于体外分离脐血中EPC进行实验研究，FN对于体外培养EPC有非常重要的作用。     

p73蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的 研究p73蛋白在原发性胆囊癌中的表达并探讨其与肿瘤生物学行为、预后的关系。方法 应用免疫组化S-P法检测p73蛋白在49例原发性胆囊癌、15例胆囊腺瘤性息肉和12例慢性胆囊炎组织中的表达。结果 p73蛋白在原发性胆囊癌中的阳性表达率为49％(24/49),而在胆囊腺瘤性息肉和慢性胆囊炎中均无表达,具有显著差异(P<0.01)。胆囊癌组织中p73蛋白表达与肿瘤分化程度有关,在低分化癌中有较高表达,与高中分化癌比较,差异有显著性(P<0.05)。与性别、年龄、淋巴结有无转移和Nevin分期无关(P>0.05)。与预后有关,p73蛋白表达阴性病人预后显著优于p73蛋白表达阳性病人,术后1年内死亡者p73阳性表达率为68％(21/31),1～3年死亡组为25％(3/12),而>3年死亡组为0,差异有显著性(P<0.05)。结论 p73蛋白在原发性胆囊癌组织中呈高水平表达,p73基因可能参与了胆囊癌的发生、发展过程,可作为判断原发性胆囊癌分化程度和预后的指标。     

小儿乙状结肠冗长症病理特点分析

目的 探讨小儿乙状结肠冗长症的病理特点，以提高对该症病理特点的认识。方法 分析我科1993～2002年间经手术治疗12例小儿乙状结肠冗长症的临床病理资料。结果 小儿乙状结肠冗长症病理特点与先天性巨结肠同源病相似。主要表现为乙状结肠肠壁肥厚，部分肌纤维变性。结肠黏膜萎缩，黏膜下充血水肿；肌间神经丛减少，均可见神经节细胞发育幼稚，且数量减少或体积变小，呈固缩或空泡变性。结论 小儿乙状结肠冗长症大多有肠神经元发育异常。