芝麻素通过PI3K/Akt信号通路抑制肥大细胞活化研究

[目的]观察芝麻素对肥大细胞活化的影响并探讨其可能作用机制.[方法]通过IgE介导体外实验观察芝麻素对IgE介导的肥大细胞组织胺的释放及对PI3K/Akt蛋白表达的影响.[结果]与模型对照组比较,芝麻素大、中剂量可明显抑制肥大细胞释放组织胺,且可有效抑制肥大细胞释放炎性细胞因子PI3K/Akt蛋白的表达(P<0.05).[结论]芝麻素抗过敏作用可能部分与抑制PI3K/Akt信号通路有关.     

神经纤维瘤病患者与健康人破骨细胞机能的差异性研究

目的 目的 探讨神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 1,NF1)患者和正常人外周血来源的破骨细胞的形成、游走,骨表面附着和骨吸收功能,以及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk)、Rac1活化的不同.方法 分离NF1患者和正常人外周血单个核细胞,细胞因子作用下分化为破骨细胞,然后观察破骨细胞的形成、游走,骨表面附着和骨吸收功能,并且用Western-Blot方法比较2组标本在巨噬细胞集落刺激因子(macrophase colony-stimulating factor,M-CSF)刺激后Akt、Erk以及Rac1的活化情况.结果 NF1患者破骨细胞前驱细胞的数量为正常对照组的2倍.在破骨细胞形成试验中,NF1患者破骨细胞的形成显著高于正常对照组.NF1破骨细胞增殖显著高于正常对照组.NF1患者破骨细胞游走能力较正常对照组明显增加.NF1患者的骨吸收显著高于正常对照组.NF1患者破骨细胞Actin环形成显著高于正常对组.与正常对照相比,NF1患者破骨细胞活性Akt和活性Erk水平显著增高.NF1患者Rac1活性显著增高.结论 NF1患者的破骨细胞前驱细胞功能增强(包括移动功能、附着功能和骨吸收功能),在M-CSF刺激下,Akt和Erk活化水平增强,NF1患者破骨细胞中Rac1-GTPase活化增加.     

金华地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型及耐药基因位点突变类型分析

目的分析金华地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型分布特征及HBV耐药基因位点突变情况,并探讨两者的关系。方法选取104例经核苷（酸）类似物治疗的慢性乙型肝炎患者为研究对象,采用Sanger双脱氧法测序技术检测患者血清HBV的基因型和10种常见的HBVP区耐药基因位点突变情况,并分析两者关系。结果本组慢性乙型肝炎患者中,HBVB基因型占46.15%,C基因型占53.85%,未发现其他基因型。检测出发生耐药基因位点突变61例,突变率为58.65%,其中C基因型占65.57%,B基因型占34.43%。HBVP区耐药基因位点突变率最高的为M204V/I（73.85%）,其次为L180M（36.92%）和A181V/T（23.08%）。HBVP区耐药基因发生单位点突变的占50.82%,其中M204I突变类型最多（29.51%）;发生多位点突变的占49.18%;以M204I和M204V/I+L180M两种突变类型最常见。HBVC基因型的患者耐药基因突变率高于B基因型的患者（71.43%vs43.75%,P＜0.05）,其中C基因型的患者A181V/T位点突变率高于B基因型的患者（14.29%vs2.08%,P＜0.05）。结论金华地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型以B、C基因型为主;HBVP区耐药基因位点突变类型以M204I和M204V/I+L180M两种类型最常见;HBVC基因型的患者比B基因型的患者更易发生耐药突变,且更易发生A181V/T位点突变。     

血糖变异性与重症脑出血患者预后的临床研究

目的 探讨血糖变异性与重症脑出血患者预后的关系。方法 对河北大学附属医院神经内科58 例重症脑出血患者有无机械通气、住院时间、急性生理与慢性健康评估Ⅱ (APACHE Ⅱ ) 等临床资料进行分析。按预后分为存活组(n=41) 和死亡组(n=17) 两组。记录所有患者的初始血糖值、血糖值、血糖标准差、变异系数,用血糖标准差及变异系数来衡量血糖变异性。探讨血糖变异性与死亡的关系。结果 死亡组与存活组比较,有无机械通气、住院时间、APACHE Ⅱ评分差异有统计学意义（P<0.05）。死亡组血糖标准差、变异系数均高于存活组（P<0.05）。结论 血糖变异性与重症脑出血患者的预后密切相关。     

糖尿病足的介入治疗及术前CTA评估

目的探讨糖尿病足下肢血管影像特征及综合介入治疗的临床价值。方法对25例糖尿病足患者介入术前行CT血管造影（CTA）检查,对其中19例患者分别或同时采用经导管局部尿激酶溶栓术、经导管血栓抽吸术、血管腔内球囊成形术、血管内支架植入术等多种介入治疗方法。结果糖尿病足下肢动脉同时存在不同程度的狭窄与闭塞,尤其是膝下动脉的狭窄、闭塞;综合介入治疗可以改善糖尿病足下肢动脉血供,近期疗效令人满意。结论CTA检查可以准确显示下肢动脉病变部位及程度,对选择合适介入治疗方案可以提供有效的信息;对糖尿病足的综合介入治疗疗效满意,可显著降低患者的病残率。     

数码摄像机在医学形态学现实和虚拟实验教学中的应用研究

医学形态学实验教学是整个教学过程中至关重要的环节,是学好其他基础医学课程和临床医学课程的必要前提.数码摄像机运用于形态学实验教学制作基础-临床综合性实验系统、构建医学形态学虚拟实验室、同步实时显示教师的示教等,这就使得医学形态学的实验教学内容形象生动、易于接受,从而提高了学生的学习兴趣;同时,也极大地减轻了教师的工作量,提高了教学效率.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌噬菌体分离及其生物学特性观察

目的 分离、筛选宽噬产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs):大肠埃希菌噬菌体,观察其生物学特性.方法 以30株产ESBLs大肠埃希菌为宿主菌,从医院污水中分离获得噬菌体,筛选出宽噬噬菌体,进行吸附实验、一步生长实验、噬菌体DNA初步酶切分析和电镜观察.结果 所筛选出的宽噬噬菌体φ9882其宽噬率为36.7%,滴度为8.1 x1018pfu/mL.5分钟吸附率约为98%,潜伏期约为30～40min,裂解量约为110.φ9882的DNA约为30 kb.电镜显示,φ9882具有直径70 nm微球形颗粒头部,棱角不明显,可见100 mn尾轴.结论 分离、筛选所获得的φ9882为宽噬噬菌体,其裂解性较强,裂解谱宽,吸收率高,潜伏期短,可进一步用于相应耐药菌感染的治疗研究.     

EC9706、Eca109细胞系中S100A4及基质金属蛋白酶-2的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌EC9706、Eca109细胞系中S100A4及基质金属蛋白酶-2(MMP-2,的表达.方法:采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测EC9706、Eca109中S100A4蛋白及MMP-2蛋白的表达,采用RT-PCR法检测EC9706和Eca109细胞中S100A4与MMP-2的mRNA表达.结果:EC9706、Eca109细胞系中均存在S100A4与MMP-2蛋白及mRNA的表达,S100A4蛋白及MMP-2蛋白的阳性表达主要定位于胞浆中,Eca109细胞系中偶见胞核着色.Eca109细胞系中S100A4与MMP-2蛋白和S100A4 mRNA的表达量高于EC9706(P<0.05).结论:在EC9706、Eca109细胞系中均有S100A4、MMP-2的表达,提示S100A4可能在食管鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用.     

Detection of thiopurine s-methyltransferase mutations by template directed determinator in incorporation with fluorescence polarization （TDI-FP）

Objective: To develop a new method for the detection of TPMT gene mutations and determine the frequencies of four TPMT alleles, TPMT^*1,^*3A,^*3B and ^*3C in a healthy Chinese population. Methods:A TDI-FP assay system was set up in out lab. To evaluate this system, 220 healthy individuals were analyzed for the polymorphic sites at positions 460 (G→A)and 719 (A→G)of the TPMP gene using our new TDI FP method. Results:Three TPMP *3C(G^460→G^719) heterozygotes were identified, TPMP ^*3A and TPMP ^*3B were not found. All mutations were confirmed by conventional DNA sequencing analysis. Conclusion:TDI-FP method has proven to be very efficient as a rapid and accurate approach for TPMP genotyping. TPMP ^*3C was the only polymorphism identified in this clinical samples we have registered.     

弓形虫主要表面抗原1截短型片段的纯化与鉴定

目的:表达和纯化弓形虫SAG1,分析其免疫原性。方法:将诱导表达SAG1后菌体裂解,离心,分别收集其上清和沉淀;亲和层析分离纯化裂解上清液中的SAG1,SDS-PAGE和Western blot鉴定SAG1纯度和免疫原性。结果:诱导后重组体pGEX-SAG1/Bl21超声裂解上清液、8M脲溶解沉淀的上清中都含有融合蛋白GST-SAG1,从超声裂解上清液中纯化获得融合蛋白GST-SAG1。结论:亲和层析获得具有免疫原性的SAG1。