2002年广东省H3N2亚型流感病毒流行的分子基础

目的 了解广东省2002年H3N2亚型流感病毒流行及抗原性变异情况。方法 用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离，用交叉血凝抑制实验对毒株进行抗原性分析；提取病毒RNA，用一步法RT-PCR扩增血凝素基因(H3A)，产物纯化后，并将其克隆到pMD18—T Vector，进行序列测定和分析。结果 2002年1-10月共获得流感病毒246株，其中H3N2亚型210株，占85．4％，H1N1亚型2株，占0．8％，B型34株，占13．8％；2002年流感流行的高峰是6月；抗原性分析显示，2002年广东省H3N2亚型流感病毒A／粤/236/2002和2001年流行株A／粤／448／2001以及目前国内代表株A／闽／151／2001的抗原比分别是5．6和4．0；其HAl区氨基酸序列和国际代表株A／悉尼／5／97同源性为94．2％，有19个氨基酸差异，其中发生在抗原决定族A、B、E上的有6个，受体结合部有3个。结论 2002年广东省流感病毒以H3N2亚型为主，其流行的分子基础是基因变异导致抗原性发生漂移。     

动态旋转系统构建组织工程化血管模型中血管内皮细胞分泌功能监测

目的 比较静态和动态旋转系统中构建组织工程化血管模型中血管内皮细胞分泌功能。方法新型可降解材料聚羟基丁酸酯(PHB),用胶原包埋,形成多孔状PHB 胶原管形支架。分离传代、分化人脐静脉内皮细胞,接种于PHB管型支架内腔面,分别在静态、动态旋转系统中培养14 d后,测定血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)水平。结果 在动态旋转系统构建组织工程化血管模型中血管内皮细胞分泌NO、PGI2水平显著高于静态系统,在11 d NO分别为(120.52±3.83)μmmol／L、(80.98±5.98)μmmol／L,PGI2分另9为(20.48±1.52)μg／L,(16.59±1.29)μg／L,与静态系统相比,差异有显著性(P<0.05)。结论胶原包埋PHB支架有利于细胞的黏附和生长,可作为组织工程化血管的支架材料。在动态旋转系统构建组织工程化血管模型中血管内皮细胞,具有与正常血管类似的"生理功能"。     

梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定

目的　构建梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体 ,检测其表达产物的免疫原性 ,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法　从TpNichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因 ,与GenBank登录的序列做blast比较 ,定向克隆构建原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd ,转入大肠杆菌ril表达菌 ,SDS -PAGE分析重组蛋白的表达 ,Western -blot检测重组蛋白的免疫原性。结果　载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致 ,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为 98%～ 1 0 0 %。SDS -PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为 41kDa的特异蛋白带 ,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论　Tp原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd成功构建 ,且能够在ril表达菌中融合表达 ,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。     

重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用的改变

目的　研究重症肺炎患者中性粒细胞的功能改变。方法　采用免疫化学法测定 32例重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用和氧化酶反应的变化 ,并与健康对照组比较。结果　重症肺炎患者血液中性粒细胞的基础和PMA刺激的胞吐作用均明显下降 (P <0 .0 1) ;重症肺炎患者的基础和PMA刺激的反应性氧属 (ROS)产生明显增加 ;重症肺炎患者肺部中性粒细胞释放乳铁蛋白、髓过氧化物酶 (MPO)和ROS增加 ,PMA刺激后相似 ;肺炎的严重性与血液中性粒细胞释放乳铁蛋白呈负相关。结论　重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用明显受损 ,与预后相关。     

血小板活化状态在先天性心脏病中的作用

目的：研究血小板的活化状态在先天性心脏病中的作用。方法：采用流式细胞术测定P选择素的表达作为血小板活化的特异性指标，患者分为非紫绀组32例、紫绀组9例、健康对照组12例．研究先天性心脏病患者血小板活化功能的变化。结果：与健康对照组相比，非紫绀组和紫绀组先天性心脏病患者P选择素的表达均明显升高，紫绀组尤为显著。结论：先天性心脏病患者存在血小板的活化状态，紫绀型先天性心脏病更明显，这可能是引起这些患者止血功能异常的原因之一。     

额叶内侧面损伤的临床特点及救治

目的 总结17例额叶内侧面损伤的临床特点及救治经验。方法 对我科1999年7月至2003年4月收治的额叶内侧面损伤患者进行回顾性分析。结果 手术治疗1例，恢复良好，保守治疗16例，其中恢复良好12例，中残2例，死亡2例，全组死亡率11．77％。结论 额叶内侧面损伤一般意识障碍较轻，但易直接发生枕骨大孔疝，严密观察病情及动态CT检查，颅内压监测，不拘泥传统手术指征，及时抓住手术时机，可有效降低致残率及死亡率。     

肾上腺组合性嗜铬细胞瘤四例报告及文献复习

Objective To discuss the clinical characteristics and management principles of com-posite pheochromoeytoma of adrenal gland (pheochromocytoma-ganglioneuroma). Methods Four cases of composite tumor of adrenal gland diagnosed pathologically were reviewed. All the cases were male, aged 37 to 62 years;three of them had the history of hypertension, one of them accompanied with paroxysmal palpitation, while one case was asymptomatic. Computerized tomography and ultra-sonography showed single tumor in adrenal, the diameter was about 2.5、3.8、6.3、15cm respectively. Two cases showed positive results in 131Ⅰ-metaiodobenzylguanidine (MIBG) scintigraphy. One case showed positive result in 99Tcm-hydrazinonicotinamide-3trysinoctreotide (HTOC) scintigraphy. Twenty-four hours urinary catecholamine examination revealed the average of norepinephrine, epi-nephrine and dopamine were (196.1±92.2)nmol/24 h, (26.6±8.9)nmol/24 h, (1957.9±913.5) nmol/24 h respectively. Two cases were at a little elevated level and the others with normal. All cases were managed with α-adrenergic receptor blocker preoperatively for 2-4 weeks. Results Tumor re-section was performed in all 4 cases, and 3 cases by retroperitoneal laparoscopy, one by open surgery. All 4 cases were diagnosed as composite pheochromocytoma of adrenal (Pheochromocytoma-gangli-oneuroma) by pathology. All patients had no evidence of recurrence or metastasis during follow-up from 15 to 38 months. Two of three cases with hypertension reverted to normotensive. Conclusions Composite pheochromocytoma of adrenal is rare, difficult to be diagnosed preoperatively. Except mild in eatecholamine secretion, which clinical manifestations are similar to pheochromocytoma. Pheochro-mocytoma-ganglioneuroma is no apparent tendency for aggressive behaviors, the results of surgical management are favorable.     

人肝癌裸鼠移植模型阿霉素诱导法建立肝癌多药耐药细胞系

目的:建立人肝癌多药耐药细胞系研究其耐药特性及机制.方法:给予移植人肝癌细胞的裸小鼠腹腔注射阿霉素(ADM)长期诱导,获得多药耐药细胞系BEL-7402/ADM.相差显微镜和HE染色观察细胞,MTT法检测耐药细胞的多药耐药性,流式细胞术检测耐药细胞表面多药耐药基因(mdr)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达.结果:BEL-7402/ADM对多种抗癌药物产生耐药,对阿霉素的耐药性提高了20.33倍.BEL-7402/ADM细胞表面P-gp和MRP表达阳性,与对照细胞BEL-7402表达比较,差异十分显著(P<0.01).GSH/GST表达无明显变化.结论:BEL-7402/ADM具有明确的多药耐药性,该模型的建立对研究肝癌多药耐药的产生及逆转具有重要价值.     

3种培养基体外培养人芽囊原虫的效果观察

目的　观察人芽囊原虫在 3种培养基中的生长繁殖情况 ,以探讨最佳的培养方法。　方法　从大学生粪便中分离人芽囊原虫 ,转种至 3种不同培养基 ,定时观察人芽囊原虫的生长繁殖情况 ,根据原虫密度评价培养效果。　结果培养 96h后 ,Locke’s鸡蛋血清 (LES)双相培养基中的人芽囊原虫密度最高 ,改良Jones单相液体培养基次之 ,Locke’s琼脂血清 (LAS)双相培养基原虫密度最低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;观察 3种培养基中的原虫密度高峰持续时间分别为 3 60h、96h和 72h ,最长存活时间分别为 5 5 2h、3 3 6h和 168h。　结论　Locke’s鸡蛋血清双相培养基较适用于人芽囊原虫体外增殖培养。     

硫喷妥钠治疗小儿难治性惊厥持续状态疗效观察

目的 探讨对小儿难治性惊厥持续状态的有效治疗方法。方法 对14例小儿难治性惊厥持续状态采用硫喷妥钠治疗并观察疗效。结果 硫喷妥钠治疗有效率为100％，1例出现呼吸抑制，3例于停药后复发。结论 硫喷妥钠对小儿难治性惊厥持续状态有明显疗效，但易发生呼吸抑制。惊止后应维持一段时间，以免复发。