噬菌体展示TM-TNF-α模拟肽体内杀瘤效应的研究

目的　研究噬菌体展示TM -TNF- α模拟肽的体内杀瘤效应及机制。方法　大量制备所需的噬菌体展示肽,比较不同展示肽对小鼠的肝癌细胞H2 2的体外杀瘤效应,挑取杀瘤效应最好的展示肽并选择其合适的滴度进行体内实验。小鼠接种H2 2细胞3d后,于肿瘤接种部位皮下注射噬菌体展示肽,观察肿瘤的生长情况。结果　噬菌体展示TM- TNF -α模拟肽在体内能明显抑制肿瘤的生长(P <0 .0 1)。且抑瘤率与展示肽之间呈剂量依赖关系。HE染色发现展示肽治疗组肿瘤组织中有大量淋巴细胞浸润,而sTNF- α治疗组除淋巴细胞浸润还可见中性粒细胞、浆细胞浸润。结论　直接注射噬菌体展示TM -TNF -α模拟肽可在体内有效杀瘤,其杀瘤机制可能不同于分泌型TNF -α。     

补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及MRP表达的影响

目的：探讨补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌细胞耐药逆转作用及机制。方法:采用MTT及流式细胞术，分别观察补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP耐药细胞的细胞毒作用和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的影响。结果:补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞有一定的杀伤作用，能增强顺铂（DDP）对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用，显著降低MRP的表达（P＜0.01），但对维拉帕米（VRP）的协同逆转作用不明显。结论:补肾化瘀解毒方药物血清具有增效和耐药逆转作用，其机制可能与其抑制肺癌耐药细胞MRP的表达有关。     

鼻咽癌患者树突状细胞对EBV特异性细胞毒T细胞的免疫反应

目的：用负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的鼻咽癌患者树突状细胞（DC）诱导自身CD8^＋T细胞，观察其细胞毒性T细胞的免疫应答能力。方法：在体外分离并诱导成熟HLA—A2基因型鼻咽癌患者自身的DC，分别负载EB病毒抗原LMP-2的HIA—A2限制型两个表位肽段CLGGLLTMV（CLG）和LTAGFIFL（LTA）后，诱导自身CD8^＋T细胞，培养2周后，运用酶联免疫斑点法（Elispot）和HLA-肽四聚体法（Tetramer）检测诱导后T细胞的免疫应答情况。结果：经DC抗原呈递后分泌IFN-γ的CLG和LTA特异性CD8^＋T细胞数，分别为（42．67±33．79）个／孔和（25．67±18．25）个／孔，而呈递前分别为（2．67±1．97）个／孔和（5．33±1．86）个／孔。两者IFN-γ^＋CD8^＋T细胞数均有明显增加（P〈0．05）。CLG和LTA肽段特异性细胞毒性T细胞（CTL）的中位数在呈递前分别为0．135％和1．14％；呈递后则为1．045％和1．945％。两者较呈递前均明显增加（P〈0．05）。结论：负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的DC诱导鼻咽癌患者自身CD8^＋T细胞，可产生特异性CTL，对鼻咽癌患者的免疫治疗具有潜在的应用价值。     

抗生素不同用药方案预防乳癌手术部位感染的成本效果分析

目的探讨抗生素不同用药方案对乳癌术后手术部位感染的预防效果和成本的影响。方法506例乳腺癌改良根治手术患者随机分为观察组(n=253)和对照组(n=253)。观察组术前半小时静脉滴注头孢曲松2.0g;对照组术后3d每天静脉滴注头孢曲松2.0g。观察和记录术后患者手术部位感染情况并计算感染有关的医疗成本。结果术后感染发生率观察组和对照组分别为1.19%(3/252)和1.58%(4/253),其中手术部位感染共6例(1.19%),观察组和对照组各3例(1.19%),差异无统计学意义(P>0.05);对照组呼吸道感染1例。预防和治疗术后感染的直接医疗费用观察组为(163±78)元,对照组为(388±134)元,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成本-效果分析表明,术前单次头孢曲松在预防手术部位感染方面与对照组等效,且医疗费用显著降低,具有更高的性价比。     

散发性帕金森病患者γ-synuclein基因的研究

目的 探讨γ-synuclein基因C243G和A377T多态在散发性帕金森病(Parkinson’s disease，PD)的疾病易感性中的意义。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态法，对上海汉族人中145例PD患者和184名正常人进行γ-synuclein基因C243G和A377T多态分型，并作与PD的遗传关联研究。结果 PD患者与正常对照间γ-synuclein基因C243G和A377T多态分布的差异无显著性，两种多态与PD亦无关联(P值均大于0．05)。结论 上海地区汉族人群中γ-synuclein基因C243G和A377T多态与散发性PD无关。     

抗病毒治疗对乙型肝炎病毒感染者肾移植术后临床转归的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒感染者肾移植术后临床转归及治疗对策.方法 将术前乙肝病毒标志物阳性(HBsAg阳性、HBeAg阳性或HBeAb阳性、HBV DNA阳性或阴性)的32例肾移植术后患者分为抗病毒治疗组和无抗病毒治疗组两组.观察两组(术前1周至术后9年)的肝功能(ALT、AST、TBIL、PT)变化、病毒复制(HBV DNA)及存活情况.结果 抗病毒治疗组23例患者肝功能损害复常率为82.60%,存活率为82.60%,HBV DNA(PCR法)下降(≥2 log10)或保持低复制率为86.95%;未抗病毒组9例患者肝功能损害复常率为22.22%,存活率为11.11%,HBV DNA(PeR法)下降(≥2log10)或保持低复制率为11.11%.抗病毒组肝功能复常率、存活率及HBV DNA下降或保持低复制率高于无抗病毒组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).19例拉米夫定治疗患者6例出现病毒学反弹31.58%,1例加用阿德福韦酯,2例换用恩替卡韦后好转,其余3例肝功能衰竭死亡.结论 持续有效的抗病毒治疗可以有效控制乙肝病毒复制,促进肝功能恢复,减少肝衰竭发生,提高乙肝病毒感染者肾移植术后患者存活率.在治疗过程中出现病毒学反弹应及时换用或加用有效药物减少肝衰竭发生.     

Wnt2信号通路重要成员在胶质瘤中的表达及其意义

近来发现Wnt信号通路对个体发育和肿瘤生成具有重要作用[1-2].为进一步探讨Wnt通路在胶质瘤中是否存在表达异常及其在胶质瘤生成中的作用,我们采用RT-PcR、组织芯片免疫组织化学染色以及蛋白印迹法,对人脑胶质瘤Wnt2通路相关因子的表达变化及其意义进行了分析.     

一个遗传性痉挛性截瘫家系的临床特点与spastin基因突变分析

目的探讨遗传性痉挛性截瘫(hereditary spastic paraplegia,HSP)一家系的临床特点及其与spastin基因突变关系。方法对整个家系进行详细的临床检查,先证者和家系内另两例患者进行了肌电图检查,先证者还进行了胸髓核磁共振检查。应用聚合酶链反应结合DNA序列分析方法,检测该家系中先证者和其父亲spastin基因的突变情况。结果家族中所有患者具有遗传性痉挛性截瘫的典型表现,先证者胸髓核磁共振成像显示胸髓明显萎缩,PCR-DNA序列分析患者spastin基因的17个外显子均未发现有异常的突变。结论该HSP家系的患者具有典型的临床表现,并非spastin基因外显子突变所致。     

鸡胚发育过程中端脑神经元凋亡的分布

目的：研究鸡胚发育过程中端脑神经细胞凋亡的时空分布。方法：采用硫堇染色、TUNEL法染色观察凋亡神经细胞的分布。透射电镜技术观察细胞的超微结构的变化。结果：鸡胚第5d、第6d时可见少量凋亡细胞，随着鸡胚的发育，凋亡细胞渐渐增多。鸡胚第7d时，凋亡细胞数达到高峰，随后数量渐渐减少。鸡胚第12d时，几乎不见凋亡细胞。凋亡细胞主要分布于嘴段背侧和两侧脑室之间的组织等部位。透射电镜观察到凋亡细胞的超微结构的改变。结论：鸡胚神经系统发育中选择性发生神经元凋亡，凋亡细胞的分布呈现一定的时空规律。     

阿霉素对兔心肾损伤与一氧化氮合酶表达

目的:探讨阿霉素(Adr)对心和肾损伤与一氧化氮合酶(NOS)表达。方法:用治疗剂量阿霉素静脉注射法建立兔心、肾损伤模型组,测定兔心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP):取心和肾组织进行HE染色及超薄切片染色;NADPH组化染色并进行图像分析,观察动物心和肾组织中ALP、Ca~(2+)-ATP酶和 NOS的变化。结果:实验组CO、LVSP均明显低于对照组,LVEDP明显高于对照组;实验组心和肾组织的超微结构受损伤,Ca~(2+)-ATP酶活性明显下降,而NOS表达明显上调。结论:治疗剂量阿霉素能够降低心和肾组织中Ca~(2+)-ATP酶的活性和上调NOS的表达,是导致心和肾组织损伤的重要原因。