扁桃体细胞的表型及其自然杀伤功能

目的比较腭扁桃体细胞 (PTC)与外周血单个核细胞 (PBMC)的表型 ,观察IL 2刺激前后PTC的杀伤活性,探讨扁桃体的免疫功能。方法用流式细胞仪分别检测扁桃体与PBMC表面CD3,CD4 ,CD8 ,CD20,PTA1及9.1C3的表达情况。用4h51Cr释放实验检测静止时及IL 2刺激后PTC中NK细胞杀伤K562活性的改变。结果PTC中CD20的表达率为71.2 % ,PBMC为15.5 % ,且PTC中的平均荧光强度 (MFI)明显高于PBMC。静止的扁桃体细胞杀伤功能非常低 ,经IL 2刺激后杀伤功能显著提高 ,效靶比为200∶1时达到61.5 %。CD3阳性率在PTC和PBMC中分别为32.8%和57.7% ;CD4/CD8的比值分别为6.97和1.11。两种新分子血小板T细胞活化抗原1(PTA1)和9.1C3在扁桃体中均有表达。结论扁桃体单个核细胞中B细胞占多数 ,而且CD20的表达密度明显高于外周血B细胞 ;在T细胞中以CD4 细胞为主 ;IL 2活化后PTC有较高的自然杀伤活性 ;与CTL和NK细胞相关的膜标记PTA1和9.1C3均有表达。     

前列腺特异性抗原EIA试剂盒的研制及应用

目的 建立可定量测定人血清中前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）含量的夹心ＥＬＩＳＡ法,研制ＰＳＡ－ＥＩＡ检测试剂盒。方法 从健康男性精液中提取并纯化ＰＳＡ,分别免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠和山羊制备特异性单克隆抗体和多克隆抗体,并以纯化的ＰＳＡ为标准品,建立可定量测定血清中ＰＳＡ含量的夹心ＥＬＩＳＡ法。在此基础上组装ＰＳＡ－ＥＩＡ试剂盒,对该试剂盒的特异性、灵敏度、精密度、正确性和稳定性等多项指标进行评价。应用该     

Ghrelin对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响

目的观察Ghrelin对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机均分为对照组、糖尿病组、糖尿病+Ghrelin组和糖尿病+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6组,每组10只。建立STZ糖尿病模型,open-field实验排除合并抑郁症的糖尿病大鼠,Morris水迷宫测试学习与记忆能力,RT-PCR检测海马caspase-3mRNA的表达,免疫组化检测海马神经元caspase-3和BCL-xl蛋白表达,原位末端标记法检测海马神经元的凋亡。结果与对照组大鼠相比,糖尿病组和糖尿病+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6组学习与记忆能力显著受损(P<0.05),海马部位的caspase-3 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),BCL-xl蛋白表达显著下降(P<0.05),海马神经元的凋亡增加了49%(P<0.05)。糖尿病+Ghrelin组学习和记忆成绩明显优于糖尿病组(P<0.05),其海马部位的caspase-3 mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05),BCL-xl蛋白表达明显升高(P<0.05),海马神经元的凋亡减少了42%。结论 Ghrelin对糖尿病大鼠...     

人肺组织体外感染模型的建立及 NTHi 诱导炎症反应的机制研究

目的: 研究不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)诱导肺组织炎症反应的关键信号通路。方法: 肺组织与NTHi(10¹⁰ CFU/L)共孵育4 h和24 h。Western blotting检测肺组织的磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),电泳迁移率法检测核因子κB(NF-κB)核转位,实时定量RT-PCR检测Toll样受体(TLR)2 mRNA, 酶联免疫吸附试验检测上清的白细胞介素(IL)-8水平。另外,肺组织预先与抗TLR2单抗(anti-TLR2: 5 mg/L)、p38 MAPK抑制剂(SB203580: 20 μmol/L)或NF-κB抑制剂(PDTC: 25 μmol/L)孵育2 h,再加入NTHi(10¹⁰ CFU/L)刺激24 h,收集组织上清,测定IL-8。结果: 肺组织感染NTHi 4 h后,肺组织TLR2-p38 MAPK-NF-κB信号通路迅速被激活。感染24 h后,肺组织IL-8表达较未感染组显著增加 (P<0.05)。抗TLR2单抗、特异性p38 MAPK和NF-κB分子阻断剂可以明显抑制NTHi诱导的IL-8表达。结论: NTHi通过TLR2-p38 MAPK-NF-κB信号通路诱导肺组织分泌炎症因子。人体外肺组织感染模型为研究病原体和宿主相互作用提供了新的平台。     

乙型肝炎病毒治疗性多表位基因疫苗在小鼠中的免疫应答研究

目的:分析乙型肝炎病毒(HBV)重组多表位抗原基因在大肠杆菌中非融合表达的蛋白B-BPT的免疫原性,以期为HBV预防/治疗性疫苗的研制奠定实验基础。方法:构建重组质粒pBAD/BPT,并在大肠杆菌中诱导表达。以纯化的蛋白B-BPT免疫BALB/c小鼠,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测该融合蛋白诱导的小鼠细胞毒T淋巴细胞(CTL)应答。用流式细胞术(FCM)检测小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的比例,用MTT比色法检测淋巴细胞的增殖效应。结果:B-BPT蛋白免疫BALB/c小鼠后,可诱导特异性CTL应答(P<0.05,与空白对照组比较);B-BPT蛋白免疫后,可显著刺激小鼠脾淋巴细胞增值(P<0.05,与空白对照组比较)。结论:该非融合表达的蛋白B-BPT可有效地诱导小鼠特异性CTL免疫应答,为进一步研制乙肝预防治疗性疫苗奠定了基础。     

经内镜逆行胰胆管造影术后并发胰腺炎危险因素分析

目的探讨经内镜逆行胰胆管造影术（ERCP）后并发胰腺炎（PEP）的危险因素,为PEP的预防提供参考。方法回顾性分析1 896例ERCP患者,分为PEP组（n=285）及无PEP组（n=1 161）,对比分析两组各相关危险因素,涉及患者因素、操作因素及术者因素。结果患者因素中女性、年龄（小于60岁）、胰腺炎病史、无胆总管结石、疑有Odd i括约肌功能障碍者易并发PEP（P〈0.05）;而有无胆红素增高、胆总管直径过小（小于0.4 cm）、有无壶腹部憩室、合并糖尿病、高血压与PEP的发生无显著相关性（P〉0.05）。操作因素中胰腺显影、胰管括约肌切开术、胆道括约肌气囊扩张术患者在PEP组所占比例明显高于无PEP组（P〈0.05）;而治疗性或诊断性ERCP、Odd i括约肌测压术、胆道括约肌切开术患者在两组中所占比例无显著差异。术者操作例数少、操作时间长、插管困难或失败与PEP的发生相关（P〈0.05）;而ERCP操作失败与PEP无关（P〉0.05）。结论年龄小于60岁的女性,且有胰腺炎病史和疑有Odd i括约肌功能障碍、胰腺显影差、术者熟练性差、插管困难等是PEP的主要危险因素。     

人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞外增殖作用的研究

目的 观察人软骨糖蛋白-39( HCgp39)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠淋巴细胞激活的影响,探讨其在类风湿关节炎(RA)发病中的作用.方法 建立CIA大鼠模型,分别在建模1、2、3、4、5、6、7、8周后,分离、培养大鼠脾淋巴细胞,CCK-8法检测HCgp39对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测血浆中抗HCgp39抗体及COMP的分泌水平,分析指标之间相关性.结果 建模2周后,HCgp39抗原特异性T细胞与对照组比较出现明显增殖反应(P均＜0.01),与建模时间、抗HCgp39抗体水平显著正相关,与血管翳和滑膜炎症评分显著负相关.各组抗HCgp39抗体水平和COMP水平较对照组显著增高(P均＜0.01),且抗HCgp39抗体水平与建模时间及COMP呈显著正相关.结论 HCgp39可刺激CIA大鼠脾淋巴细胞的体外异常增殖,初步提示HCgp39抗原短肽在CIA早期及后续的发病过程中可能起着一定作用.     

广州地区不良孕产史夫妇外周血异常核型分析

目的观察不良孕产夫妇异常染色体分布类型及其与不良孕产的关系。方法对261对不良孕产夫妇外周血淋巴细胞进行细胞遗传学分析,采用G显带方法。结果 261对不良孕产史夫妇染色体异常80例(15.3%),其中相互易位9例;Turner嵌合体1例;染色体异态70例,包括9号染色体小臂间倒位10例,次缢痕长度增加16例,D组、G组短臂的随体长度增加或减少或双随体共36例,大Y、小Y共8例。结论不良孕产夫妇染色体异常主要为平衡易位和多种染色体异态,后者在不良孕产史夫妇中的高发生率提示其具有一定临床效应。     

基于肺表面活性物质的临床价值对新生儿呼吸窘迫症的治疗新探讨

目的探讨肺表面活性物质（PS）珂立苏（Calsurf）治疗新生儿呼吸窘迫症的临床疗效。方法将42例生后确诊为新生儿呼吸窘迫症（NRDS）患儿分为2组,其中对照组21例给予机械通气治疗,治疗组21例在机械通气治疗基础上使用珂立苏治疗。比较2组治疗前后的临床表现、血气分析结果及胸片的变化。结果治疗组在应用珂立苏后皮肤迅速转红,用药6 h后PaO2、a/APO2、PaO2/FiO2均明显提高,PaCO2下降,pH上升,用药24h、3d,PaO2和a/APO2仍在较高水平,与对照组比较,差异均有显著意义（P〈0.05或P〈0.01）。胸部X线显示治疗组肺野透亮度改善与对照组比较,差异有显著意义（P〈0.05）。2组治疗后,治疗组存活19例（90.4%）,对照组存活12例（57.1%）,2组存活率相比,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论肺表面活性物质能快速、有效地改善NRDS患儿肺通气、换气功能。     

髌骨成形术对类风湿关节炎全膝关节置换术后髌骨轨迹和膝前痛的影响

分析全膝关节置换术（total knee arthroplastv,TKA）保留髌骨并行髌骨成形术后对膝前区疼痛及髌骨运动轨迹影响的疗效,为临床治疗提供参考。2007年1月~2011年1月,共随访类风湿关节炎保留髌骨全膝关节置换术患者226例383膝,其中男51例,女175例,年龄34~85岁。所有患者膝关节评分采用美国HSS评分系统,髌骨评分采用Feller等评分标准,随访时调查膝前痛,拍摄膝关节正、侧及髌骨90度轴位X射片。髌骨成形术：去除髌骨周围所有骨赘,磨平边缘,修整髌骨至Wiberg分型II型,用电刀切除髌骨周围软组织,试模复位后无拇指试验no thumb test阳性者松解髌骨支持带。结果显示患者术前、术后的HSS评分、髌骨评分、膝前痛评分、髌骨功能评分差异均有显著意义（P〈0.01）。类风湿关节炎保留髌骨的全膝关节置换术,术中对髌骨进行髌骨成形术处理,使髌骨形态恢复至Wiberg分型II型,术后髌骨运动轨迹良好,膝前痛的发生率低,术后疗效可靠。