survivin的siRNA靶向干扰膀胱癌的实验研究

目的实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）对膀胱癌生物学行为的影响。方法设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA，用脂质体转染T24膀胱癌细胞株。采用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡；荧光实时定量PCR检测干扰前后survivin的mRNA表达；用survivin的siRNA片段插入空载体后建立重组载体pRNAT-U6、1／Neo-survivin。结果脂质体转染T24细胞后的转染效率为92．3％；survivin编码基因序列特异的siRNA能有效下调survivin基因的表达，呈时间和剂量依赖性，最大效应浓度为100nmol／L，此时survivin表达水平下调了75．91％，并显著地抑制了细胞生长，抑制率达55．29％，差异有统计学意义（P〈0．01）；细胞凋亡率亦增至45．70％，与对照相比差异有统计学意义（P〈0．01）。用限制性内切酶将空载体线性化，T4DNA连接酶将siRNA片段插入空载体中，对该重组表达载体进行鉴定，获得RNA干扰质粒载体pRNAT-U6．1／Neo-survivin。结论siRNA．survivin能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平，促进细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖，可能成为膀胱癌基因治疗的新工具。成功构建的靶向survivin基因表达的RNA干扰质粒载体为进一步应用RNA干扰技术进行survivin基因功能研究奠定了基础。     

基于PACS的MRI影像多媒体教学与报告系统的研究

目的：开发基于医院影像归档和通讯系统（picture archiving and communication system，PACS）环境的MRI（磁共振显像）影像多媒体教学与报告系统。方法：医院PACS系统符合DICOM3.0标准，采用1000M光纤主干网，100M交换到桌面；在临床医生浏览工作站安装多媒体教学系统，在诊断工作站安装教学系统与报告系统；科学内容按部位分类，以树枝模式管理。教学字资料来源于具有一定权威的教科书、专及期刊。图像资料来源于各部位经病理及临床证实的病例，直接从PACS系统提取，经标注说明后，以件形式存放于PACS图像服务器硬盘。结果：MRI辅助影响教学系统能够实时调阅最合适病种的MRI征象、临床特点、病理、鉴别诊断、典型图像及注释、正常断面解剖等，供教学、诊断和报告参考。结论：PACS环境下MRI辅助影像学系统，能满足临床医生和低年资影像诊断医生对MRI影像知识进一步继续医学教育的需求，能为影像诊断医生提供教学及科研工具，提高MR室工作质量和工作效率。     

肺组织β-AR和GRK2与重症急性胰腺炎肺损伤的关系以及甲强龙的影响

目的：探讨重症急性胰腺炎（SAP）致急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织β-AR和G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）的变化规律以及甲强龙的影响。方法：SD大鼠36只，随机分为3组，每组12只。对照组，仅做十二指肠翻动；模型组，胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠（1 mL/kg），建立SAP模型；干预组，建立SAP模型后1 h给予甲强龙（30 mg/kg）。于6 h和12 h分别处死大鼠6只取肺组织，放射配基结合实验测量肺组织β-AR最大结合容量B_max和平衡解离常数K_d，免疫荧光法检测肺组织GRK2表达。结果：模型组和干预组胰腺组织损伤评分显著高于对照组，模型制备成功；模型组和干预组肺组织损伤评分显著高于对照组，发生SAP肺损伤；模型组β-AR B_max显著低于对照组和干预组，K_d显著高于对照组和干预组；模型组GRK2的表达显著高于对照组和干预组。结论：SD大鼠肺组织有丰富的GRK2表达，SAP肺损伤大鼠肺组织GRK2表达显著增加，这可能是β-AR下调的重要机制。     

人NRAGE基因重组腺病毒载体的构建及其对293细胞细胞周期的影响

目的构建hNRAGE基因的重组腺病毒载体,并研究其对293细胞细胞周期的影响。方法采用PCR方法扩增hNRAGE基因片段,并亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdTrack-CMV/hNRAGE。经测序检测后,用PmeI酶切使pAdTrack-CMV/hNRAGE被线性化,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1用电穿孔法共转化大肠杆菌BJ5183,进行同源重组。经PacI酶切鉴定后,用磷酸钙法转染QBI-293A细胞,包装成重组体腺病毒Ad-hNRAGE颗粒。利用穿梭质粒pAdTrack-CMV中GFP报告基因的表达,观察重组腺病毒的产生,测定病毒颗粒的浓度。用Western blot检测目的基因的表达。采用MTT法检测293细胞的活力,用流式细胞术分析hNRAGE基因对293细胞周期的影响。结果成功地构建hNRAGE重组腺病毒载体。Western blot检测结果证实,hNRAGE基因可在293细胞中表达。收获病毒后,经测定病毒颗粒的浓度大约为6.5×109个/μL。转染了重组腺病毒Ad-hNRAGE的293细胞与正常细胞相比较,增殖率显著降低,G0-G1和G2-M期的细胞增多,S期的细胞明显减少。结论hNRAGE基因可能有抑制293细胞生长的作用。     

TIM2转基因细胞瘤苗对小鼠作用的初步研究

目的 观察小鼠TIM2转基因H22肝癌细胞瘤苗在小鼠体内的成瘤作用 ,初步研究其免疫原性.方法 构建TIM2基因真核表达载体pIRES2-EGFP - TIM2,脂质体法转染H22细胞,制备得到TIM2基因修饰的H22细胞瘤苗,建立小鼠肝癌移植瘤模型,观察其在小鼠体内的成瘤作用.结果 成功得到TIM2基因修饰的H22 细胞瘤苗,免疫接种小鼠后,可明显抑制小鼠体内肿瘤的发生和发展;给予H22-TIM2接种的小鼠CD4亚群、CD4/CD8比值显著高于H22-EGFP 细胞接种组、荷瘤对照组和正常对照组.结论 TIM2基因修饰H22细胞后,可显著降低H22细胞的体内成瘤性,抑制小鼠肿瘤生长,同时.在体内具有一定的免疫原性,为进一步探讨TIM2 在肿瘤生物治疗中的作用提供了初步的实验依据.     

人体乳腺硬癌癌细胞器形态结构的定量研究

目的:区分乳腺正常细胞器和各期乳腺癌细胞器之间的差异,从而建立检查量化指标。方法:本文对女性乳腺硬癌癌细胞器线粒体,溶酶体的16个形态参数进行体视学统计分析。结果:发现癌细胞与正常细胞比较,其线粒体、溶酶体的体积、表面积和面数密度等形态参数存在高度显著差异和显著差异。结论:探讨了癌细胞的线粒体,溶酶体形态变异与功能之间的关系,为乳腺癌临床诊断提供了重要的定量依据。     

骨型化生性乳腺癌伴有破骨细胞样多核巨细胞一例

患者女 ,84岁。发现左侧乳腺肿物 1个月余 ,经美国俄亥俄州立大学医学中心活检诊断为“恶性梭形细胞肿瘤伴骨及骨样成分”于 2 0 0 1年 11月 2 6日入该院。体检 :全身体表淋巴结无肿大。左侧乳腺外上象限扪及一 4cm× 3cm肿物 ,质硬实 ,活动性差 ,与皮肤无粘连 ,乳头无内陷 ,肿物表面皮肤颜色稍暗 ,无典型桔皮样外观。行乳腺改良根治术。病理检查 :送检物为“左侧乳腺及腋窝淋巴结” ,为一 2 4cm× 2 2cm× 6cm纤维脂肪样组织 ,一侧附一梭形皮肤 ,面积 2 0 5cm× 9 0cm。乳头位于皮肤中心 ,无明显内陷或变形 ,距乳头一侧 1 5cm处有一 6 0cm…     

红细胞变形性的影响因素及测量方法

红细胞的变形能力是一种重要的流变现象，是影响血液循环的主要因素，具有重要的生理学意义。红细胞的变形能力是某些疾病的重要特征。本文从内部因素、外部因素和其他因素三个方面，介绍了小同因素对红细胞变形性的影响，并比较、讨论了测量红细胞变形性的主要方法。     

遗尿儿童和青少年情绪和行为问题及相关因素研究

目的 调查河南省儿童青少年遗尿症的情绪和行为问题的现况及其影响因素。 方法 从2019年10月—2020年3月,采用分层随机整群抽样方法抽取河南某县5所中小学校,采用一般资料调查表、长处和困难问卷及儿童睡眠调查表进行调查,对影响遗尿患儿情绪和行为的因素进行单因素、多因素分析。 结果 实际发放问卷4 500份,回收4 120份,有效问卷3 912份,有效回收率为94.95%。调查结果显示有7.82%儿童患有遗尿症。遗尿组的情绪症状、多动和困难总分得分明显高于正常组(P＜0.001),两组品行问题、同伴交往和社会行为得分的比较差异无统计学意义(P＞0.05)。Pearson相关分析结果显示,遗尿儿童和青少年的困难总分与打鼾、夜间呼吸问题、嗜睡、注意力缺陷、睡眠总分均存在正相关关系(P＜0.05)。多元线性回归结果显示睡眠呼吸紊乱、照顾者文化程度低、便秘、学习成绩较差是遗尿患儿情绪和行为问题的影响因素。 结论 遗尿患儿情绪和行为问题的检出率高,影响因素是睡眠呼吸紊乱、照顾者文化程度低、孩子学习成绩差、便秘,应引起关注。     

2017—2021年扬州市宝应县水痘流行病学特征分析

目的 分析2017—2021年扬州市宝应县水痘的流行特征,为水痘防制工作提供参考依据。方法 通过查阅监测系统相关数据的方式,采用描述性流行病学方法对2017—2021年扬州市宝应县水痘发病情况进行流行病学特征分析。结果 2017—2021年扬州市宝应县累计报告水痘病例3 841例,年均发病率为105.74/10万,5年发病率总体呈逐年上升趋势(χ2=112.92,P<0.01);有2个发病高峰期,主要集中在5—7月及10月至次年的2月,报告发病数分别占总病例数的27.65%、51.54%;人群以15岁及以下学生及幼托儿童为主,占79.24%;男性发病率略高于女性;城区发病率高于乡镇地区;突发公共卫生事件的发生主要集中在水痘发生的高峰期;疫苗首针剂的接种率总体呈现逐年上升的趋势(χ2=37.37,P<0.01)。结论 扬州市宝应县水痘的发生情况有明显的季节、年龄、职业和地区差异,加强15岁及以下人群的水痘二针剂疫苗的接种及防护知识宣传,这是预防水痘疫情发生和扩散的关键。