基于Walker256恶性胸水模型的中药甘遂量-毒-效关系研究

该文考察中药甘遂的量-毒-效关系,探讨甘遂的毒效变化特点,为临床安全合理用药提供科学依据。以恶性胸水模型为研究对象,在较大剂量范围内(甘遂0.045~1.620 g·kg~(-1)·d~(-1))考察甘遂对实验动物生化指标、胸水量等的影响,并通过因子分析方法综合评价甘遂的量-毒-效关系。结果显示,模型组大鼠具有较多的胸水量,且与空白组比较,ALT,AST,LDH,HBDH,IFN-γ,IL-2,TNF-α显著升高(P0.05),TP,ALB降低(P0.05)。给药后,与模型组比较,各组可不同程度的减少胸水量,降低IFN-γ,IL-2,TNF-α,升高TP,ALB,体现出一定的治疗作用,同时引起ALT,AST,LDH,HBDH升高,体现出一定的肝、心脏毒性。通过因子分析从9个指标中抽提出2个公因子,共解释了89.1%的信息。结果表明,甘遂在《中国药典》剂量范围内单独给药没有见到明显毒性,在药典高限3倍剂量下可产生肝脏、心脏毒性,随着剂量增加,毒性增强;同时甘遂具有"峻下逐水"功效,可减少恶性胸水模型大鼠的胸水量及改善相关生理指标,且具有剂量依赖性。综合分析其毒效特点,甘遂药典高限剂量为其相对最佳治疗剂量。     

毛蕊花糖苷抑制脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞炎症反应及机制研究

探究毛蕊花糖苷(acteoside,ACT)对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症反应的抑制作用及潜在机制。该实验以LPS诱导BV-2细胞作为炎症模型,将BV-2细胞分为正常对照组、模型组、给药组,ACT按指定浓度(12.5,25,50μmol·L-1)作用于细胞。采用NO试剂盒检测NO炎症因子的释放量,ELISA法检测TNF-α和IL-6的表达量,Western blot法检测炎症相关蛋白(i NOS,COX-2,p-IKKβ,IKKβ,p-IκB,IκB)的表达。此外,通过检测细胞核/浆中NF-κB p65的表达以及借助免疫荧光技术,阐明ACT对炎症转录因子NF-κB p65核转位的作用。结果显示,ACT可显著降低LPS诱导的BV-2小胶质细胞神经炎症,且呈剂量依赖性。具体表现在:显著降低炎症因子NO,IL-6和TNF-α的释放量,抑制炎症相关蛋白i NOS和COX-2的表达。同时,ACT可明显抑制NF-κB信号通路中关键蛋白IKKβ和IκB的磷酸化,且明显抑制NF-κB p65的细胞核转位。以上结果表明,毛蕊花糖苷可显著降低LPS诱导的小胶质细胞神经炎症反应,抑制炎症相关蛋白的表达,其潜在机制是通过抑制NF-κB信号通路实现的。     

葛根汤对退变颈椎间盘组织磷脂酶A2的影响

目的：观察葛根汤对模型动物退变颈椎间盘组织PLA2活性的影响，借以探讨葛根汤治疗颈椎病的抗炎作用机理。方法：选用动力失衡性颈椎病动物模型，造模动物到期后取C4-5颈椎间盘，采用催化活性与微孔比色相结合的测定法测定PLA2活性，结果：模型组颈椎间盘PLA2活性明显升高，正常组则很低，二者比较有显著差异。葛根汤无论是对早期治疗批还是治疗批均有下调PLA2的作用。以大剂量为优。结论：葛根汤具有下调退变颈椎间盘中PLA2活性的作用。从而可减少多种炎症介质的合成，这可能是其治疗颈椎病的作用机制之一。     

活血补肾方及其拆方对退变腰椎间盘IL-1β、TNF-α mRNA表达的影响

目的:观察活血补肾方及其拆方对退变椎间盘组织IL-1β、TNF-α mRNA表达的影响。方法:采用纤维环针刺法复制腰椎间盘退变动物模型。造模成功后,将50只新西兰大白兔随机分为活血补肾方、活血方、补肾方、吲哚美辛及模型对照组5组,给药6周。采用逆转录聚合酶链反应检测IL-1β和TNFαmRNA表达情况。结果:与模型组比较,活血补肾方、补肾方、活血方和吲哚美辛组IL-1β、TNFα mRNA的表达均下调(P<0.01)。结论:活血补肾方具有抑制IL-1β、TNFα mRNA表达的作用,这可能是活血补肾方减轻退变椎间盘炎症反应,减缓椎间盘退变,治疗椎间盘源性腰痛的机理之一。     

九节龙皂苷Ⅰ对胶质瘤U87细胞侵袭和迁移的影响

目的 观察九节龙皂苷Ⅰ(从九节龙全草中萃取)对胶质瘤U87细胞体外侵袭、迁移等生物学行为的影响及作用机制的探讨.方法 体外培养U87细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测胶质瘤U87细胞经不同浓度九节龙皂苷Ⅰ作用24、48、72 h后增殖率的变化;细胞划痕实验观察九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞移动能力的影响;Transwell侵袭转移模型评价九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱法分析九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞分泌基质金属蛋白酶(MMP)活性的影响.结果 MTT法显示一定浓度的九节龙皂苷Ⅰ可抑制U87细胞生长,并随着浓度增加和作用时间延长而明显增加(P＜0.05);与对照组比较,经九节龙皂苷Ⅰ作用后U87细胞迁移和侵袭能力明显降低,MMP-2分泌减少.结论 九节龙皂苷Ⅰ可有效抑制脑胶质瘤U87细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与九节龙皂苷Ⅰ降低细胞MMP-2活性相关.     

活血解毒方对缺氧/复氧所致心肌细胞凋亡的影响＊

目的 研究活血解毒方对缺氧/复氧（H/R）所致的心肌细胞凋亡的影响。方法 体外培养H9C2心肌细胞并分成正常对照组（Control组）、缺氧复氧组（H/R组）、H/R + 活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药 + LY294002组，其中正常对照组给予DMEM培养基培养，缺氧复氧组给予缺氧4 h、复氧6 h处理，缺氧复氧 + 活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药 + LY294002组分别给予活血解毒中药、LY294002、活血解毒中药配合LY294002预处理24 h，然后均给予缺氧4 h、复氧6 h处理。采用CCK8检测各组心肌细胞的存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡水平，电镜观察各组心肌细胞中线粒体、自噬体的变化，Western Blot检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase3）、β-连环蛋白（β-Catenin）、p-p65、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）蛋白的表达。结果 活血解毒方预处理显著增加H/R诱导的H9C2心肌细胞凋亡，降低凋亡相关蛋白Cleaved caspase3、β-Catenin、p-p65表达，增加Bcl-2表达。结论 活血解毒方可通过抑制细胞凋亡，降低缺氧/复氧所致的心肌细胞损伤，其作用机制可能与PI3K信号通路相关。     

双参擦剂治疗强直性脊柱炎的临床研究

目的：观察双参擦剂治疗强直性脊柱炎的临床效果。方法：100例符合强直性脊柱炎标准的患者,随机分为2组：治疗组50例,外用双参擦剂配合手法治疗;对照组50例,手法治疗。2组疗程均为1个月。结果：经过1个月的治疗,两组腰背痛指数、晨僵持续时间、胸廓活动度3项指标较治疗前均显著降低,且治疗组上述指标改善值优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：双参擦剂是治疗强直性脊柱炎安全有效的方法。     

蟾酥注射液对恶性腹水的实验研究

目的：探讨蟾酥注射液对恶性腹水的作用机理。方法：将30只荷瘤昆明小鼠随机分为3组。给小鼠腹腔注射药物：蟾酥注射液组（简称治疗组1：注射蟾酥注射液每次1．5ml/只）、环磷酰胺组（简称治疗组2：注射环磷酰胺，每次以生理盐水稀释0．5mL中含0．5rag的环磷酰胺／只）和生理盐水组（简称对照组：每次注射生理盐水0．5mL／只。），每组10只。全部组隔离5天注射1次，共给药3次。每次注射前，称体重1次，最后1次注射后5天，采集血液，检测T淋巴细胞CD3、CD4、CD8，肿瘤坏死因子。结果：显示小鼠体重治疗组与对照组比较P〈0.05．治疗组之间比较P〉0．05；T淋巴细胞CD3治疗组与对照组比较P〈0．05，治疗组之间比较P〉0．05，CD4治疗组与对照组比较P〉0．05，治疗组之间比较P〉0．05；CD8治疗组与对照组比较P〈0．05，治疗组之间比较P〉0．05；肿瘤坏死因子治疗1组与对照组比较P〈0．01，治疗2组与对照组比较P〉0．05，治疗组之间比较P〈0．05。结论：蟾酥注射液对恶性腹水具有抑制作用，能够提高免疫功能，其对免疫功能的影响，主要是通过提高CD3、降低CD4，使CD4／CD8比值降低体现，与环磷酰胺相比效果更优。     

HPLC法测定注射用甲硝唑磷酸二钠的含量

目的:建立高效液相色谱法测定注射用甲硝唑磷酸二钠含量的方法。方法:采用Shim-pack VP-ODS(4.6mm×250mm,5μm);以0.68%磷酸二氢钾溶液(用氢氧化钠试液调节pH至6.0)-甲醇(80∶20)为流动相,流速为1.0ml·min-1,检测波长为321nm,进样体积为20μl。结果:甲硝唑磷酸二钠浓度在82.7~248.1mg·L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为100.5%(RSD=0.49%,n=9)。结论:本方法简单、快速、准确,稳定,重现性好。     

头清胶囊配合牵引治疗椎动脉型颈椎病眩晕临床疗效观察

目的：观察头清胶囊配合牵引治疗椎动脉型颈椎病以眩晕为主症的临床疗效。方法：将120例患者随机分为2组,每组60例,治疗组口服头清胶囊,并配合卧位枕颌带牵引,对照组口服活血胶囊,亦行卧位枕颌带牵引,疗程均为2周。回顾性分析临床资料及临床疗效。结果：观察组显效50例,有效8例,无效2例,总有效率96．7％,对照组显效24例,有效24例,无效12例,总有效率80％。2组比较差异有显著性（P〈0．05）,2组均未发生不良反应。结论：头清胶囊配合牵引治疗椎动脉型颈椎病眩晕疗效好。