2009至2011年铜绿假单胞菌的临床分布及耐药分析

目的：分析2009至2011年本院临床分离出来的铜绿假单胞菌耐药性的变迁,为临床合理的给药方案提供参考。方法采用肉汤稀释法对临床分离出的2781株病原菌中的252株铜绿假单胞菌对12种抗菌药物进行药敏分析。结果临床上分离铜绿假单胞菌标本主要为痰和支气管灌洗液下呼吸道标本,占62.3%（157/252）。铜绿假单胞菌感染发生率主要分布在ICU 27.8%（70/252）和感染科19.8%（50/252）。铜绿假单胞菌对大多抗菌药物的耐药性逐年增加,尤其亚胺培南和美洛培南已经达到41%（30/74）和35%（22/74）,敏感性最高的为多粘菌素B和氨基糖苷类阿米卡星。结论铜绿假单胞菌感染有上升趋势,对常用抗生素耐药率增加,需引起临床重视。加强其耐药监测可以为临床提供治疗依据。     

HyProCure跗骨螺钉治疗成年人柔韧性扁平足早期疗效分析

背景：成人柔韧性扁平足的有效治疗方法目前仍存在争议。距跗关节稳定机制这一概念的提出和HyProCure跗骨螺钉的发明,给成人柔韧性扁平足治疗带来了新的理念和方法。目的：评价HyProCure跗骨螺钉治疗成年人柔韧性扁平足的早期临床疗效。方法：2012年9月至2013年3月,对27例（34足）成人柔韧性扁平足患者采用HyProCure跗骨螺钉实施距下关节稳定术治疗。男20例,女7例,年龄18-77岁,平均（33．8±11．6）岁。术后定期随访,随访内容包括临床并发症评估、x线和CT检查及基于PACS5．0系统的图像测量,并采用美国足踝外科协会（American Orthopedic Foot and Ankle Society,AO—FAS）踝与后足功能评分和视觉模拟评分（visual analogue score,VAS）进行术后疗效评定。结果：所有患者均获随访,随访时间3-6个月,平均（4．7±1．8）个月。除1例术后1个月因HyProCure脱出跗骨窦行更换手术外,余无明显围手术期并发症发生。随访期间无一例永久移除HyProCure。手术前后距骨第1跖骨角（14．1°±6．0°vs 4．7°±2．8°,P〈0．01）、跟骨倾斜角（16．1°±2．0°VS20．4°±2．2°,P〈0．05）、距舟覆盖角（24．9°±3．3°vs15．0°士2．1°,P〈0．01）和距骨第2跖骨角（32．3°±4．2°VS14．6。土1．9。,P〈0．01）改善明显,患足内侧纵弓高度显著提升（P〈0．01）,VAS疼痛评分明显改善（P〈0．05）,术后AOFAS踝与后足功能评分较术前提高了74．9％（44．2±11．1w77．3±10．7,P〈0．01）。结论：采用HyProCure跗骨螺钉治疗成年人柔韧性扁平足可以有效恢复正常足部骨性结构关系、手术创伤小、术后可早期负重、患足疼痛改善明显、功能提高显著,但远期疗效仍需进一步观察。     

鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对替加环素体外敏感性检测的方法学评估

目的 评估不同药敏试验方法检测鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对替加环素的体外药敏结果.方法 连续收集2012年1月至3月临床感染患者分离的50株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)和49株肺炎克雷伯菌,采用微量肉汤稀释法、Vitek-2法、MIC Test Strip(MTS)法及纸片扩散法分别测定替加环素对两种细菌的敏感性,并以微量肉汤稀释法为参考方法,评估Vitek-2法、MTS法及纸片扩散法与参考方法的一致性.结果 按照美国食品药品监督局(FDA)的判断标准,微量肉汤稀释法、Vitek-2法和MTS法检测替加环素对CRAB和肺炎克雷伯菌的敏感性分别为94.0％/91.8％,68.0％/91.8％和90.0％/91.8％.对于CRAB,Vitek-2法和MTS法与参考方法的基本一致率/分类一致率(EA/CA)分别为94.0％/72.0％和92.0％/90.0％,66.0％ (33/50)的菌株Vitek-2法检测的MIC值比参考方法高1～2个稀释度,MTS法检测的MIC值存在32.0％ (16/50)偏高及22.0％ (11/50)偏低;对于肺炎克雷伯菌,Vitek-2法和MTS法与参考方法的EA/CA分别为95.9％/98.0％和83.7％/91.8％,36.7％ (18/49)的菌株Vitek-2法检测的MIC值比参考方法低1～3个稀释度,79.6％(39/49)的菌株MTS检测的MIC值比参考方法低1～3个稀释度.Vitek-2法和MTS法检测两种细菌均未出现重大误差(VME)和大误差(ME).纸片扩散法与参考方法相比,对于CRAB,采用敏感/耐药(≥14 mm/≤10 mm)折点,CA为94.0％,高于Jones等推荐的折点(≥16 mm/≤12 mm,CA为82.0％);对肺炎克雷伯菌,采用敏感/耐药(≥14 mm/≤10 mm)折点,CA为93.9％,高于FDA中肠杆菌的折点(≥19 mm/≤14 mm,CA为67.3％).结论 对于CRAB菌株,MTS法与微量肉汤稀释法的一致性较高,MIC结果存在一定程度的偏差;对于肺炎克雷伯菌,Vitek-2法与微量肉汤稀释法的一致性较高,MIC结果存在一定程度的偏低;纸片扩散法与微量肉汤稀释法一致性较低,针对不同细菌其判定折点需进一步研究.     

达芬奇机器人手术配合流程再造及效果评价

目的 优化达芬奇机器人手术配合流程,提高工作效率.方法 收集2013年1月至2013年9月,在我院实施的达芬奇机器人手术236例.对手术配合流程进行再造,对流程再造前后手术医师、手术室护士的满意度,开台时间采用1检验和x2检验统计分析.结果 流程再造后,开台时间与流程再造前比较,存在统计学差异（P＜0.05）.手术医师、手术室护士的满意度较再造前提高（P＜0.05）.结论 达芬奇机器人手术配合流程再造有利于提高手术室的工作效率.     

应用神经内镜结合显微镜治疗颅内表皮样囊肿

目的 探讨神经内镜结合显微镜治疗颅内表皮样囊肿效果和技术要点.方法 回顾性分析北京天坛医院内镜神经外科专业组从2010年4月至2013年4月,应用神经内镜结合显微镜治疗颅内表皮样囊肿41例的临床资料.结果 36例肿瘤颅内表皮样囊肿内容物镜下全切除,5例少量残留;6例将囊肿壁完全切除,其余部分切除,手术后恢复良好,无迟发性出血和无菌性脑膜炎的发生.结论 应用神经内镜治疗颅内表皮样囊肿,能最大限度的切除肿瘤,有效防止并发症的发生.     

抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK基因的转录组分析 #br#

目的 转录组分析抑制丝氨酸-苏氨酸-酪氨酸激酶 1（STYK1/NOK）后仓鼠肾正常细胞 BHK21的基因表 达,并分析其可能作用的信号通路。方法 BHK21细胞分为空载体组（转染 6 µg空载体 pBs/U6）、低转染浓度组（2 µg si-STYK1/NOK质粒+4 µg空载体 pBs/U6）和高转染浓度组（6 µg si-STYK1/NOK质粒）。转染 48 h后,Western blot 检测 STYK1/NOK蛋白表达,基于检测结果,选取空载体组和高转染浓度组提取总 RNA进行转录组测序。将测序所 得的序列进行过滤比对,获得差异表达基因后,应用 R软件进行生物功能（GO）分析和 KEGG信号通路分析。应用 STRING蛋白质互作数据库中的互作关系进行差异基因蛋白互作网络的分析。采用 qRT-PCR验证关键差异表达基 因亚甲基四氢叶酸脱氢酶 2（Mthfd2）、转录激活因子 5（Atf5）,ⅡA分泌型磷脂酶 A2（Pla2g2a）、6-磷酸果糖-2-激酶/ 果糖-2,6-双磷酸酶 3（Pfkfb3）的表达。CCK-8法检测空载体组和高转染浓度组细胞增殖情况。结果 Western blot 结果表明高转染浓度组明显抑制 STYK1/NOK蛋白表达。高转染浓度组与空载体组相比,共发现差异表达基因 44 个,包括 19个上调基因和 25个下调基因。GO富集分析发现差异表达基因主要影响生物调控、细胞进程、代谢调控、 细胞生物过程、细胞、细胞部分、胞外区、配体和催化活性。KEGG通路分析发现差异表达基因主要集中作用于免疫 系统、癌症、细胞周期、信号转导和氨基酸代谢等方面。qRT-PCR结果表明,高转染浓度组Mthfd2、Atf5的相对表达量 显著上调（P＜0.05）,Pfkfb3、Pla2g2a的相对表达量显著下调（P＜0.05）,与测序结果相一致。细胞增殖实验表明高转 染浓度组细胞增殖明显高于空载体组（P＜0.01）。结论 抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK表达后,致使 BHK21细胞原 癌基因表达增强,抑癌基因表达减少,促进细胞增殖。     

液滴萃取表面分析-质谱法用于新鲜与蒸制三七根切片中皂苷成分的快速鉴别

三七为五加科植物三七(Panax notoginseng)的干燥根及根茎,为我国传统珍贵中药材,具有止血散瘀、消肿止痛等功效。相比于新鲜三七,蒸制三七对治疗肿瘤和心血管疾病等表现出更好的疗效。皂苷是三七主要的化学和药效成分,本研究基于表面萃取结合芯片多通道纳喷质谱技术,建立了液滴萃取表面分析-质谱方法 (LESAMS),能够直接、快速地对新鲜与蒸制三七根切片中木质部、韧皮部和形成层中皂苷成分进行鉴别。实验结果表明,新鲜与蒸制三七根中皂苷成分及其含量具有一定的差异,表现为在新鲜三七根切片中,人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rd,三七皂苷R1及其丙二酰类成分较高。而在蒸制三七根切片中,人参皂苷Rg5、Rk1等弱极性成分能被检测到,大极性成分则相对含量较低。本方法具有快速、稳健且灵敏度高的优势,且操作过程无需破碎、萃取、色谱分离等繁琐的步骤,实现了对鲜三七与蒸三七根切片所含化学成分及二者差异的无损分析。     

右美托咪啶对活体亲属供肾者术后肾功能的影响

 目的 探讨右美托咪啶对活体亲属供肾者术后肾功能的影响。方法 选择2015-01至2017-12择期亲属供肾术者40例,随机分为右美托咪啶组和对照组,各20例。右美托咪啶组供肾者麻醉诱导前10~15 min静脉泵入右美托咪啶1 μg/kg,继以0.5 μg/(kg·h)维持,手术结束前30 min停药;对照组供肾者按右美托咪啶组静脉泵入等量的生理盐水。于麻醉诱导前(T₁)、术毕即刻(T₂)、术后24 h(T₃)、术后48 h(T₄)采血检测TNFα、IL-6和IL-10的浓度。监测术前、术后24 h及48 h血清尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)浓度。结果 右美托咪啶组较对照组术后24 h和48 h血清BUN[24 h, (6.41±1.23) mmol/L vs (9.24±1.25) mmol/L; 48 h, (6.62±1.30) mmol/L vs (8.41±2.4) mmol/L]和Cr[24 h, (98.2±4.7) μmol/L vs (111.4±5.1) μmol/L; 48 h, (104.4±6.2) μmol/L vs (119.5±8.2) μmol/L]明显降低(P<0.05)。T₂-T₄时右美托咪啶组与对照组比较,血清TNF-α和IL-6浓度均明显降低,而IL-10的浓度明显增高(P<0.05)。结论 一定剂量的右美托咪啶对活体亲属供肾者手术后早期具有肾功能保护作用。     

HPLC法同时测定逍遥丸中阿魏酸和甘草酸含量探讨

 目的 探讨HPLC法同时测定逍遥丸中阿魏酸和甘草酸含量的方法。方法 采用Agilent Zorbax XDB-C18 的色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈/磷酸水溶液(0.05％)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长278 nm,柱温35 ℃。结果 阿魏酸的进样量在0.054～0.596 μg范围内(r=0.9995)、甘草酸的进样量在0.110～1.217 μg范围内(r=0.9993)线性关系良好,阿魏酸和甘草酸的平均回收率分别为99.29% (RSD=1.28％,n=6)和98.34% (RSD=1.61％,n=6)。结论 本方法简便快捷,重现性好,结果准确,可用于逍遥丸的质量控制。     

维持性血液透析终末期肾病患者肠道菌群特点探讨

 目的 探讨维持性血液透析终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)患者肠道菌群的特点。方法 收集维持性血液透析的稳定ESRD患者和健康对照组受试者各22例粪便样本,提取样本DNA,进行16S rRNA基因测序,对肠道菌群的分布情况进行分析。结果 (1)维持性血液透析ESRD组观察到的各样品微生物物种量、物种多样性较健康对照组低,物种多样性在18～44岁组有统计学差异;(2)两组在纲、目、科、属、种分类水平上分别发现2、4、9、29、28个相对丰度有统计学差异的物种(P<0.05); 其中Negatibicutes纲、粪球菌属-3相对丰度维持性血液透析ESRD组低于健康对照组,而丹毒丝纲、目、科、属、种水平相对丰度维持性血液透析ESRD组高于健康对照组;(3)通过KEGG代谢途径的差异分析,推测两组间有3个存在统计学差异的代谢途径(P<0.05),其中与碳水化合物代谢途径相关基因在健康对照组粪便样品中显著富集,而与细胞运动性及药物耐药途径相关基因在维持性血液透析ESRD组粪便样品中显著富集。结论 维持性血液透析ESRD组患者肠道微生物群落多样性降低,与健康对照组比较在微生物群落相对丰度、KEGG功能预测相关基因代谢途径上存在差异。