骨髓间充质干细胞抑制转化生长因子-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞间质化

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)是否通过抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化,进而发挥其抗纤维化的作用及其机制。方法培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN细胞,用5μg/L的TGF-β1诱导分化,并分为对照组、转化生长因子(TGF)-β1刺激组、BMSCs干预组。采用倒置相差显微镜观察RLE-6TN细胞的形态变化;免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的定位;Western blotting法检测E-cad、α-SMA、p-Smad3、Snail1蛋白的表达。结果在TGF-β1的诱导下,肺泡Ⅱ型上皮细胞逐渐向肌成纤维细胞发生形态改变,由上皮细胞的鹅卵石状变成间充质细胞的梭形或纺锤形,且伴随着上皮标志物E-cad表达降低,而间充质细胞标志物α-SMA表达上调;给予BMSCs干预后,间充质化有所抑制,表现于细胞形态趋于上皮型,且上皮标志物E-cad表达上调,间质标志物α-SMA表达减少。与对照组相比,TGF-β1刺激组p-Smad3、Snail1蛋白表达上调。给予BMSCs干预后p-Smad3、Snail1蛋白表达显著降低。结论 BMSCs可能通过阻断TGF-β1/Smad3信号转导通路,抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化,从而抑制上皮细胞-间充质转化的进程。     

2940nm Er∶YAG点阵激光对雌性昆明鼠皮肤胶原纤维/弹性纤维形态学及MMP-1/TIMP-1表达的影响

目的研究2 940 nm Er∶YAG点阵激光照射后,对皮肤真皮结构和衰老机制的影响。方法将体质量(40±2)g健康雌性昆明小鼠72只随机均分为3组,分别标记为组1、组2、组3,每组24只。采取自身空白对照,记为组0。激光照射(18 J/cm2、24 J/cm2、30 J/cm2能量密度,对应组1、组2、组3)1、2、4周后分别处死组1、组2、组3小鼠各8只,取实验区域皮肤,取距离实验区域5 cm处背部皮肤为自身空白对照,进行丽春红-维多利亚蓝染色的病理组织观察,免疫组织化学染色观察金属基质蛋白酶-1(MMP-1)/金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的改变。使用Image Pro Plus 6.0软件对图像进行定量分析,选择平均光密度值(mean OD)作为统计数据。结果胶原纤维/弹性纤维染色结果显示,胶原纤维和弹性纤维表达均明显增加(P0.05),且不同剂量组间差异有统计学意义(P0.05)。点阵激光照射1周后,MMP-1表达增加,其中组3(高能量组)更为明显(P0.05)。2周后,MMP-1表达开始下降,4周后MMP-1表达显著下降(P0.05),组3(高能量组)尤为明显(与组1、组2相比,P0.05)。点阵激光照射1、2周后,TIMP-1表达均无明显改变(P0.05),照射4周后可观察到TIMP-1表达上升,但差异无统计学意义(P0.05),组间差异亦无统计学意义(P0.05)。结论 2 940 nm Er∶YAG点阵激光照射短期内可造成小鼠真皮胶原纤维和弹性纤维变性,后期促进两者增生,提示点阵激光可用于瘢痕组织新生;短期内可增加小鼠真皮细胞内MMP-1的表达,后期可抑制其表达,提示点阵激光可用于皮肤抗衰老治疗。     

肺炎链球菌肺炎对肺部树突状细胞及CD4~+T细胞的影响

目的探讨肺炎链球菌肺炎对Balb/c小鼠肺部树突状细胞及CD4~+T细胞的影响。方法 6~8周Balb/c小鼠随机分为对照组及肺炎链球菌感染组,流式细胞术检测肺炎链球菌感染后2 d、5 d肺组织中CD103~+DCs、CD11b~+DCs、p DCs及CD4~+T细胞亚类水平。结果肺炎链球菌肺炎致肺组织CD103~+DCs及p DCs水平显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01),而肺组织CD11b~+DCs水平显著低于对照组。肺炎链球菌肺炎促进肺组织IL-17A~+CD4~+T细胞和Foxp3~+Tregs表达,与对照组比较,感染后2 d、5 d差异均有统计学意义(P0.05),随着感染控制,Foxp3~+Tregs表达水平回降,感染后5 d Foxp3~+Tregs水平显著低于感染后2 d水平(7.3%±0.41%vs 9.38%±1.34%,P0.01)。肺炎链球菌肺炎对肺部Th2表达水平无显著影响,感染后5 d IFN-γ~+CD4~+T细胞水平显著升高,与对照组、感染后2 d组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论肺炎链球菌肺炎促进肺组织CD103~+DCs、p DCs表达,诱导CD4~+Th17、Tregs细胞分化发育。     

拇指腕掌关节韧带的力学特性及其意义

目的 :探讨拇指腕掌关节韧带力学特性 ,为关节运动分析、伤病致残时的修复与功能重建以及人工关节设计提供关节韧带力学特性参数。方法 :选择前斜韧带和背桡侧韧带做离体力学测试 ,得出韧带应力—应变关系、弹性模量和抗张强度 ,推导出本构方程。结果 :前斜韧带和背桡侧韧带的应力—应变关系呈幂函数关系 ,前斜韧带的本构方程 :σ =1.0 0ε1.17,背桡侧韧带的本构方程 :σ =2 .2 7ε1.60 。结论 :前斜韧带结构较疏松 ,其弹性模量和抗张强度都较背桡侧韧带小 ,外伤或自发性损伤引起退行性变的可能性大。     

骶后孔(八髎穴)的临床应用解剖学

目的 :为八穴的针灸推拿以及骶后神经和骶管麻醉提供解剖学依据。方法 :我们测量了 30例骶骨标本 ,将骶后中线定为Y轴 ,将通过两骶角的连线定为X轴 ,测定骶后孔中点至两轴的距离 ;并测量骶后孔的口径 ,骶后孔中点至相应骶前孔中点的间距以及每侧 1～ 2 ,3～ 4骶后孔中点间距。结果 :根据统计分析 ,我们确定了两种骶后孔定位方法 ,取得了 1～ 2 ,3～ 4骶后孔中点间距的数值 ;4对骶后孔口径的大小顺序是 :1孔 >2孔 >4孔 >3孔。结论 :两种定位方法可帮助医生对骶后孔进行更为准确的定位 ,避免一些给患者带来的损伤 ,可使一些医疗麻醉等措施得以成功实施 ,有助于提高临床疗效     

人白细胞介素15单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :用rhIL 15与沙门氏菌裸菌相偶联制备IL 15单克隆抗体 (monoclonalantibody ,McAb) ,以便为疾病的诊断、治疗和发病机制的研究提供可靠的生物制剂。方法 :将纯化的rhIL 15蛋白与沙门氏菌裸菌相偶联制成免疫原 ,用脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB c小鼠 ,以PEG为促融剂 ,将脾细胞与SP2 0细胞进行融合 ,HAT选择培养 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,通过多次克隆化 ,获得稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞株 ,并对所获得的细胞株及分泌的McAb特性进行了分析。结果 :获得 4株能稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞系 (hybridomacell,Hc) ,ELISA法检测其效价分别为 1:10 6 、1:10 7、1:10 7、1:10 7。Dotblot检测IL 15的灵敏度为 1 5ng ,其中一株 (1 7E4 )尚可用于Westernblot检测。结论 :成功制备了 4株IL 15McAb杂交瘤细胞系。     

基于PACS的MRI影像多媒体教学与报告系统的研究

目的：开发基于医院影像归档和通讯系统（picture archiving and communication system，PACS）环境的MRI（磁共振显像）影像多媒体教学与报告系统。方法：医院PACS系统符合DICOM3.0标准，采用1000M光纤主干网，100M交换到桌面；在临床医生浏览工作站安装多媒体教学系统，在诊断工作站安装教学系统与报告系统；科学内容按部位分类，以树枝模式管理。教学字资料来源于具有一定权威的教科书、专及期刊。图像资料来源于各部位经病理及临床证实的病例，直接从PACS系统提取，经标注说明后，以件形式存放于PACS图像服务器硬盘。结果：MRI辅助影响教学系统能够实时调阅最合适病种的MRI征象、临床特点、病理、鉴别诊断、典型图像及注释、正常断面解剖等，供教学、诊断和报告参考。结论：PACS环境下MRI辅助影像学系统，能满足临床医生和低年资影像诊断医生对MRI影像知识进一步继续医学教育的需求，能为影像诊断医生提供教学及科研工具，提高MR室工作质量和工作效率。     

谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达

目的 构建谷胱甘肽转硫酶－血小板因子4（GST－PF4）融合蛋白表达载体，并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法 通过RT－PCR方法，从HL－60细胞中克隆PF4cDNA，然后克隆至载体pUC19中，序列测定后把PF4基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEC-4T-3中，并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达。结果 获得了PF4 cDNA。序列分析表明，该序列与GenBank数据库中的序列一致。重组质粒酶切鉴定表明，PF4基因已正确插入到pGEX-4T-3中。重组融合蛋白表达载体GST－PF4经IPTG诱导表达，在SDS－PAGE后得到1条蛋白表达带，相对分子质量（Mr)约为36000。结论 成功地构融合蛋白表达载体GST－PF4，并大肠杆菌中获得有效表达，为进一步研究打下良好的基础。     

重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化

目的 在大肠杆菌中高效表达幽门螺直菌的热休克蛋白A基因（hspA)，并对其初步纯化。方法 用巢式PCR扩增hspA基因。经测序证实后，克隆于表达载体pIM-1中，转化大肠杆菌。以SDS－PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达，并测定N－端氨基酸的序列。采用固相镍离子亲和层析，对重组hspA进行初步纯化。结果 扩增的hspA基因为357bp，并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达。重组蛋白的表达量最高可达细菌总蛋白的60．5％。免疫印迹及氨基酸测序结果证实，表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位。固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为87．8％，结论 hspA亚单位的高效表达与初步纯化，为批量获得Hp亚单位抗原打下了基础。     

时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的：通过内质控的定量分析，对时间分辨荧光分析的方法学进行客观评价。方法：以促甲状腺激素检测为例，对系统探测灵敏度 ，低、中、高持控血清的批内和批间精密度，批间稳定性参数Slope、ED20、ED50、ED80等4项指标，系统探测的准确度（回收试验），系统探测的有效性（平行试验），受试者工作特性曲线（receiver operator characteristic,ROC）等进行定量测定和描述。结果；TSH的最小测定值为0．002μU/mL.低、中、高3种质控样品批内和批间变异系数均小于5％，批间稳定性参数各变异系数均小于5％，与统计学要求相一致，且符合标准曲线质控参数的重现性。回收试验满足临床要求，符合检验统计结果。理论值与实测值间作回归分析，相关系数r=0．999。ROC显示，甲亢诊断的最佳阈值为0．3μU/mL，甲低诊断的最佳阈值为5．0μU/mL。甲亢敏感度为89．3％，特异度为93．3％，准确度为90．1％，阳性似然比为13．4，甲低敏感度为83．8％，特异率为90．9％，准确度为86．4％，阳性似然比为9．2。结论：时间分辨荧光免疫分析方法是一种效果好、准确度高、灵敏度高、特异性强、测试精度良好的自动化免疫分析方法。