人精子体外氧化损伤对线粒体tRNA~(LeuUUR)基因的影响

目的:探讨活性氧(ROS)对人类精子线粒体tRNALeuUUR基因的氧化损伤。方法:采用Percoll梯度离心法筛选具有正常生理功能的精子,作为正常精子模型,并分为损伤组20例和对照组20例,分别加入次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系或不予处理,37℃有氧环境中孵育60min。分别提取精子DNA,以Fpg酶切损伤碱基并采用接头介导PCR(LM-PCR)检测线粒体tRNALeuUUR基因的氧化损伤。采用Rhodamine(Rh123)荧光探针标记精子,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位,观察精子的功能。结果:与对照组相比,损伤组精子孵育后线粒体膜电位明显降低[(116.27±11.72)%vs(64.00±4.88)%,P<0.05]。Fpg酶切和LM-PCR显示精子线粒体tRNALeuUUR基因损伤。结论:ROS可能通过对精子线粒体tRNALeuUUR基因氧化损伤而影响精子功能(线粒体膜电位明显降低),从而引起不育。     

角膜碱烧伤房水一氧化氮及一氧化氮合酶变化

目的探讨角膜碱烧伤后房水一氧化氮（NO）与炎症反应的关系。方法用健康家兔动态观察对照组、实验组和对侧眼组眼内炎症反应及房水一氧化氮合酶（NOS）和NO2^-／NO3^-的活性。结果角膜碱烧伤后炎症反应与房水NOS和NO活性呈动态变化，实验组明显高于对侧眼组，且两组均高于对照组。结论房水NO的变化与角膜碱烧伤后的眼内炎症反应密切相关。     

数字减影血管造影与介入治疗在胃肠道动脉性出血中的应用价值

目的 探讨数字减影血管造影(DSA)诊断与介入治疗在胃肠道动脉性出血中的应用价值.方法 回顾性总结78例消化道动脉性出血患者的DSA表现和动脉栓塞、药物灌注的治疗经验.结果 本组患者十二指肠溃疡15例,胃溃疡5例,胃癌2例,Dieulafoy病1例,血管畸形和发育不良9例,胃肠术后吻合口出血8例,肝胆疾患术后肝动脉破裂出血10例,Crohn病5例、肠道憩室出血6例、小肠炎或溃疡6例,小肠息肉3例,小肠中度恶性间质瘤1例,小肠高分化平滑肌肉瘤2例,直结肠癌5例.74%(58/78)的患者DSA造影阳性,造影剂外溢直接征象者33%(26/78),术后吻合口出血直接征象者83%(15/18).介入治疗的病例中动脉药物灌注15例,技术成功率60%(9/15),临床成功率40%(6/15);栓塞36例,技术成功率86%(31/36),临床成功率72%(26/36);介人治疗后再出血率16%(8/51),其中1例栓塞后再呕血经胃镜治疗无效死亡.DSA造影和介入治疗后手术者27例,造影与术后病理诊断的符合率为78%(21/27).随访时间2个月至3年,未发生胃肠道缺血坏死等并发症.结论 DSA对消化道动脉性出血的定位、定性有着重要价值,选择性动脉栓塞及药物灌注止血安全有效,有助于择期手术和并发症处理.     

肾移植术后并发尿路上皮肿瘤的临床分析

目的 分析肾移植患者并发尿路上皮肿瘤的特点，探讨其诊治方法。方法 自1998～2003年肾移植患者1293例，术后发生尿路上皮恶性肿瘤21例（1．6％）。男4例，女17例。17例原发病为慢性问质性肾炎。发生尿路上皮肿瘤距肾移植6～62个月，平均26个月。其中膀胱癌6例，单侧肾盂或输尿管癌6例，单侧肾盂或输尿管、膀胱癌8例，双侧肾盂输尿管癌1例。10例上尿路肿瘤发生部位与移植肾同侧，4例发生于移植肾对侧。临床症状以无痛性肉服血尿和反复泌尿系感染为主。19例行手术治疗，术后所有患者免疫抑制剂用量减少1／3并辅以局部灌注化疗。结果 2例行姑息性治疗的晚期肿瘤患者分别于发现肿瘤5、8个月死亡。余19例现已随访2～5年。13例肿瘤复发，复发部位为膀胱或对侧原。肾、输尿管。所有患者在免疫抑制剂减量期间均未出现急性排斥。2例因切除移植肾恢复透析，17例肾功能正常。结论 慢性间质性。肾炎导致。肾功能衰竭的。肾移植患者和女性肾移植患者易发生移植后尿路上皮肿瘤；移植肾同侧上尿路较对侧好发肿瘤；对移植肾对侧为首发的上尿路发生肿瘤者可预防性行双侧上尿路根治性切除。     

人Uroplakin Ⅱ启动子用于靶向性基因治疗膀胱癌的实验研究

目的探讨利用人UroplakinⅡ(hUPⅡ)启动子进行靶向性基因治疗膀胱癌的可能性。方法将hUPⅡ启动子和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)克隆到腺病毒载体Ad5中,构建重组体pAd-hUPⅡ-TNF。转染细胞293后产生复制缺陷型的重组腺病毒,感染膀胱癌细胞系BIU-87,检测TNF-α对BIU-87细胞体外生物学行为及体内成瘤性的影响。结果成功构建pAd-hUPⅡ-TNF重组腺病毒载体,转染细胞293获得复制缺陷型重组腺病毒。BIU-87细胞经重组腺病毒感染后可产生高浓度的TNF-α,并降低BIU-87的生长速度。感染腺病毒的BIU-87培养液可抑制L929细胞的生长。裸鼠原位膀胱肿瘤动物模型实验结果表明膀胱灌注重组腺病毒48h后,裸鼠尿液含高浓度的TNF-α,4周后腺病毒组膀胱重量和体积明显低于对照组(P<0.01)。结论hUPⅡ启动子TNF-α为治疗基因的重组腺病毒可特异性使膀胱癌细胞系BIU-87产生高浓度的TNF-α,并降低BIU-87和L929细胞的生长速度。重组腺病毒可使裸鼠尿内含高浓度的TNF-α,并可抑制裸鼠原位膀胱肿瘤动物模型膀胱癌细胞的成瘤性。     

腹内高压对门静脉压、中心静脉压影响的实验研究

目的研究腹内压升高对大鼠中心静脉压和门静脉压的影响。方法将20只成年雄性SD大鼠分别通过颈静脉插管、穿刺门静脉主干法来测定中心静脉压和门静脉压，运用氮气气腹法制作大鼠腹内高压动物模型。建立气腹后分别在0、5、10、15、20、25、30、35、40、45mmHg压力值下测得中心静脉压和门静脉压。结果中心静脉压和腹内压之间的直线回归方程为Y=2．824＋0．045X，相关系数r=0．984（P〈0．01）；门静脉压和腹内压之间的直线回归方程为Y=8．887＋0．939X，相关系数r=0．998（P〈0．01）。结论腹内压与中心静脉压和门静脉压有很好的相关性，可以根据腹内压监测中心静脉压和门静脉压的变化。     

臂丛神经卡压综合征的诊治

目的探讨位于臂丛神经及其前中斜角肌周围的神经卡压综合征的特点及其诊治方法。方法2003年7月～2006年1月,采用门诊收集病例,根据病情轻重分组,分别采用药物、局部封闭及手术方法治疗179例确诊为臂丛神经和(或)其属支卡压综合征的患者。其中采用药物、手法治疗89例；注射治疗74例,其中需要第二次注射32例；手术治疗16例,同时或分别进行双侧手术2例,需要第二次手术者1例。结果128例患者得到1个月～2年5个月随访。其中,药物手法治疗55例,症状均有不同程度改善或能维持现状。局部注射治疗58例(其中接受第二次注射者24例),2例出现心跳减缓,其余病例无并发症发生,VAS评分情况：1分2例,2分16例,3分20例,4分12例,5分3例,6分3例,7分2例；第二次注射结果：2分5例,3分16例,4分3例。手术治疗15例,其中10例术后症状得到明显改善,恢复工作。结论臂丛神经及其属支涉及其周围众多神经,可产生众多症状；明确病因后,治疗上以保守治疗为主,效果欠佳者采用手术治疗,均可取得较好疗效。     

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立

.学者论坛·在动物实验中解决临床难题···························，·······································································……顾玉东(3)基因〕:程     

甲状腺~(99)Tc~mO_4~-显像冷结节的临床诊断价值

目的　探讨甲状腺99TcmO-4 显像冷结节对不同性质甲状腺疾病的诊断价值。方法　采用静脉注射99TcmO-4 185MBq ,2 0min后甲状腺前位静态显像 ,采集总计数 1× 10 6。显像显示甲状腺结节局部放射性分布缺损或低于正常甲状腺组织则定性为冷结节。结果　 34 2例甲状腺99TcmO-4 显像发现冷结节 85例 ,发生率为2 4.9% ,85例冷结节中 ,37例 (4 3.5 % )为甲状腺瘤 ,15例为甲状腺癌 (17.6 % ) ,2 0例 (2 3.5 % )为结节性甲状腺肿 ,8例 (9.4% )为甲状腺炎 ,4例 (4 .7% )为单纯性甲状腺囊肿 ,1例 (1.3% )为甲状腺外肿物。结论　冷结节在甲状腺99Tcm O-4 显像时较为常见 ,且不同性质甲状腺疾病的冷结节及其周围组织有一定的特征性表现 ,因此99TcmO-4显像冷结节对甲状腺腺瘤、甲状腺癌、甲状腺囊肿、甲状腺炎等常见疾病具有较高的临床价值。     

928株革兰阴性杆菌耐药性监测

目的：了解青岛地区临床分离的重要革兰阴性杆菌的耐药情况以指导合理用药。方法：2001年青岛3家医院临床分离的5种革兰阴性杆菌用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果：5种病原菌均占3家医院革兰阴性杆菌分离率的前5位，大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的耐药率达60％－87％，细菌对亚胺培南均呈高度敏感，但铜绿假单胞菌耐亚胺培南株占25．8％，头孢他啶的抗菌活性是三代头孢菌素中最高的；复方酶抑制剂表现出良好的抗菌活性。结论：细菌耐药问题仍是目前临床的严重问题，地域性的耐药性监测是必要的。