自体表皮细胞培养与异体真皮组合应用研究

严重烧伤病人皮肤修复中主要未解决的问题是真皮的替代。动物实验结果表明，异体皮移植后５天，用自体培养表皮细胞膜片覆盖真皮床，１４天后复合皮成活率是８４．６％±２．４％。组织学检查证实表皮已形成了复层结构，可见基底层、颗粒层和角质层。临床应用中，异体皮移植后１０天，去除异体表皮覆盖病人的自体培养表皮，３５天后未见排斥征象，异体真皮促进了培养表皮的分层、成熟和完整，组织学检查证实表皮细胞的边缘清楚，已分化形成颗粒层和角质层，真皮多细胞，已血管化，但表皮嵴缺乏。     

地高辛临床药物动力学参数的预测及个体化给药方案

用Bayesian一点法拟合心衰病人的DG个体药物动力学参数及个体化给药方案,用minitab对软件DG群体药物动力学数据进行统计学分析.以CrCL为固定效应变量,建立系列回归模型,预测心衰病人的DG个体药物动力学参数、个体化给药方案及其对映的(?)ss.结果显示CrCL与DG群体药物动力学参数存在高度的相关(P<0.001),相关系数分别为:CL=0.805,Vd=0.985,T_(1/2)=-0.517,K=0.525,D_(1.0)=0.714.并建立定量回归模型,预测DG个体药物动力学参数,预测参数与实测参数没有统计学差异,其中以Vd预测精度最好,有95%的预测值在实测值的95%置信限以内.与实测值相关系数为0.974,估计标准误差小于3.3%;其次是CL,有2/3的预测值在实测值95%置信限以内,与实测值相关系数为0.797,估计标准误差小于20%;T_(1/2)和K预测结果稍差.CrCL预测的个体化给药方案80%符合最佳个体化给药方案,且两者所对应的(?)ss没有显著性差异.     

NO在体外循环中脑损伤作用机制的研究进展

一氧化氮及一氧化氮合酶在体外循环导致的脑损伤中具有重要作用,它可以通过扩张血管/抑制血小板聚集与黏附/减少细胞凋亡等对脑组织产生保护作用。一氧化氮的临床应用仍需对其作用机制作进一步深入研究。     

超声心动图房室平面位移法对高血压病早期患者左室舒张功能的评价

目的:探讨超声心动图房室平面位移(AVPD)法评价高血压病早期患者(HT)左室舒张功能的可行性。方法:分别记录200例HT患者左房射血所致AVPD(AVPDa)值、AVPD与二尖瓣环4个位点上的AVPD均值(AVPDmean)比值,并与二尖瓣口E/A比值法(E/A分析法)进行对比。结果:200例HT患者AVPD法测值:AVPDmean值为(0·66±0·15)cm,AVPDa为(0·79±0·46)cm,E/A分析法:E/A最大峰值速度分别为(75·38±11·66)cm/s,(82·36±16·82)cm/s。根据AVPD方法诊断163例舒张功能异常,E/A分析法诊断171例舒张功能异常,二者之间差异无显著性意义(χ2=1·78,P>0·05)。结论:AVPD方法与E/A分析法有较好符合性,为一无创性评价HT患者左室舒张功能的新方法。     

热舒适的生理机制

目的为室内人工空调温度参数的设定及热舒适度提供实验证据.方法分别观察不同空调温度对大鼠下丘脑部位多巴胺神经元活动及体温的影响.结果当空调温度为28 ℃时,下丘脑多巴胺(DA)代谢产物--双羟苯乙酸(DOPAC)水平和体温在记录的1 h内保持不变.与此相比较: 1.当空调温度高于28 ℃时, DOPAC水平逐渐增加,当空调温度低于27 ℃时,DOPAC水平逐渐降低;2.当空调温度为26 ℃、27 ℃、28 ℃、29 ℃时,大鼠体温能够保持相对恒定.当空调温度高于29 ℃时,体温逐渐增加;当空调温度低于26 ℃时,体温逐渐降低.结论麻醉状态下的大鼠在空调温度为28℃时,体温调节活动处于最佳状态.     

抗醛糖还原酶单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的:制备抗醛糖还原酶(AR)的单克隆抗体(mAb),并与本室制备的抗醛糖还原酶相似蛋白(ARL-1)mAb进行比较。方法:经RT-PCR获得AR基因,将基因插入pGEX-4T-1(His)6C中,构建重组质粒pGEX-4T-1(His)6C-AR,以重组质粒转化E.coliRosetta诱导表达GST-AR蛋白。以纯化的GST-AR蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb。应用间接ELISA和Western blot方法对mAb进行筛选和鉴定。使用Clustalx和Antheprot软件,比较AR与ARL-1的同源性,表达GST-dAR[80~142氨基酸(aa)],与ARL-1差异较大;并分析AR的抗原性,表达GST-dA1(1~79aa)、GST-dA2(80~99aa)、GST-dA3(111~142aa)、GST-dA4(143~316aa)。利用AR全长及截短蛋白,采用Western blot分析制备的抗AR mAb识别AR抗原的部位。结果:获得3株稳定分泌抗AR mAb的杂交瘤细胞系ARB3、AR7B3G4和ARF10。3株抗GST-AR的mAb均为IgG1(κ型),腹水mAb效价为1∶4×105,细胞培养上清mAb效价为1∶1×104,3株mAb均可与胎盘组织中的AR蛋白起反应,而与GST-ARL-1和GST蛋白无交叉反应。它们分别为抗GST-dA1、GST-dA3和GST-dA4蛋白的mAb。结论:成功地制备了3株特异性抗AR mAb,可分别识别AR的1~79、111~142、143~316位氨基酸。将它们与抗ARL-1mAb联合应用,将有助于进一步研究AR与ARL-1蛋白的功能,并为深入探讨AR、ARL-1与相关疾病的关系及进行大规模的流行病学调查提供了有力的工具。     

高压氧对急性移植物抗宿主病小鼠细胞因子表达的影响

目的:观察高压氧(HBO)对骨髓移植时急性移植物抗宿主病(aGVHD)小鼠脾组织中细胞因子表达的影响,探讨HBO抗aGVHD的作用机制.方法:应用直线加速器排空C57BL/6小鼠骨髓后,注入BALB/C小鼠骨髓与脾淋巴细胞的混合液,复制aGVHD模型.应用RT-PCR技术检测经HBO、环孢素A(CsA)、氨甲喋呤(MTX)处理后,小鼠脾组织中白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)及白细胞介素10(IL-10)mRNA水平的变化.结果:HBO组小鼠11d的生存率明显高于异基因移植组及CsA MTX组;HBO组小鼠脾组织中TNF-α和IL-2mRNA相对含量显著低于异基因移植组(P＜0.05)、显著高于CsA MTX组;HBO组小鼠脾组织中IL-4和IL-10 mRNA相对含量显著高于异基因移植组及CsA MTX组(P＜0.05).结论:HBO可能通过调节促炎/抑炎细胞因子的分泌而发挥其明显的抗aGVHD作用.     

失眠症患者睡眠质量的主观评估与多导睡眠图参数对比分析

目的 探讨失眠症患者对睡眠质量的主观评估,并通过对多导睡眠图(PSG)睡眠参数的定量分析,对失眠症患者的睡眠状况进行客观评估,进一步将二者进行对比分析.方法 对失眠症患者和健康人各100例运用匹兹堡睡眠质量指数问卷(PSQI)进行评定,并分别进行多导睡眠图的整夜睡眠描记,次日晨起后询问夜间睡眠情况.结果 失眠症组PSQI各成分得分及总分均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组相比,失眠症组的睡眠潜伏期(min)延长(失眠症组43.69±11.54,对照组16.01±10.44)、总睡眠时间(min)减少(失眠症组314.65±91.89,对照组446.41±77.81)、睡眠效率降低(失眠症组64.51%±18.59%,对照组91.32%±3.58%)、快眼动睡眠时间(min)减少(失眠症组33.26±15.61,对照组93.21±21.63),差异有统计学意义(P＜0.01).失眠症组对总睡眠时间的评估较PSG检测值显著减低、对睡眠潜伏期的评估较PSG检测值显著增高,自我评估与实际睡眠情况不一致.结论 失眠症患者睡眠质量较差.失眠症患者的PSG各睡眠参数有特征性的改变,利用PSG检查发现失眠症患者对失眠情况的主客观评估不一致,存在过高估价睡眠潜伏期和过低估价睡眠时间的倾向.     

异丙酚对慢性神经痛大鼠脊髓诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 研究不同剂量异丙酚对慢性神经痛大鼠触诱发痛痛阈及其脊髓组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的影响。方法 Wistar大鼠40只,随机分为四组,Ⅰ组为空白对照;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组结扎左侧坐骨神经。术后第7天,Ⅰ、Ⅱ组腹腔注射生理盐水50 ml·kg-1,Ⅲ、Ⅳ组腹腔注射异丙酚50 ml·kg-1或75ml·kg-1,每天一次共6 d。在术后第6、10和12天,使用Von Frey法分别测定各组大鼠触诱发痛痛阈,比较不同剂量的异丙酚对大鼠痛阈的影响。术后第12天取L4-5和L5-6节段脊神经节和脊髓组织,采用半定量RT-PCR法,对各组大鼠脊髓组织iNOS mRNA表达进行检测。结果 术后第10和12天,Ⅲ、Ⅳ组大鼠双侧的痛阈值高于Ⅱ组(P<0.05);术后第12天,Ⅲ、Ⅳ组大鼠脊髓组织iNOS mRNA表达低于Ⅱ组(P<0.05)。结论 异丙酚通过抑制脊髓组织iNOS mRNA转录,降低其表达,而起到一定的抗伤害作用。     

压力性尿失禁的病因学研究

目的　绝经后压力性尿失禁 (SUI)患者补充雌激素的临床疗效尚有争议。本研究通过对血雌二醇 (E2 )浓度及子宫韧带的雌激素受体 (ER)的观察 ,分析雌激素与SUI和盆底组织膨出 (POP)发生的关系。方法　绝经前、后对照组、POP组和绝经后SUI组共 5组 73例子宫全切患者 ,免疫组化方法测定主韧带、宫骶韧带ER含量。结果　 ( 1)绝经前POP组血E2 浓度 ( 4 7.2 9pg ml± 38.30pg ml)、韧带ER值明显低于绝经前对照组 (E2 73.83pg ml± 5 2 .72pg ml;ER主韧带9.5 8%± 2 .39% ,ER宫骶韧带11.6 4 %±2 .6 8% ) ,差异非常显著 (P <0 .0 1)。 ( 2 )绝经后韧带ER值 :对照组 (ER主韧带10 .89%± 2 .5 4 % ,ER宫骶韧带13.0 9%± 3.0 3% )、POP组 (ER主韧带11.85 %± 2 .89% ,ER宫骶韧带13.2 1%± 3.4 6 % )及SUI组 (ER主韧带9.6 4 %± 5 .0 1% ,ER宫骶韧带11.12 %± 6 .13% )之间无显著差异 ( P >0 .0 5 )。 ( 3)绝经前、后对照组韧带ER值无显著差异 (P >0 .0 5 )。绝经前对照组月经增生期、分泌期韧带ER值无显著差异 (P >0 .0 5 )。血E2 浓度与韧带ER值无相关性。 ( 4 )绝经后对照组绝经时间与主韧带ER值成正相关 ,与宫骶韧带ER值无相关性。绝经后POP组和SUI组主韧带、宫骶韧带ER值与绝经时间成正相关。 ( 5 )各组研究对?