贝伐单抗联合全视网膜光凝治疗增生型糖尿病视网膜病变的疗效观察

目的　检测贝伐单抗玻璃体内注射疗法（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓｉｎｖｉｔｒｅｏｕｓ,ＩＶＢ）对增生型糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａ-ｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ）中视网膜新生血管（ｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＲＮＶ）的消退作用;评估ＩＶＢ联合全视网膜光凝（ｐａｎ-ｒｅｎｔｉｎａｌｐｈｏｔｏｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ,ＰＲＰ）对ＰＤＲ的临床疗效和安全性。方法　本研究收集行ＰＲＰ的ＰＤＲ患者７２例（７２眼）,根据术前是否ＩＶＢ分为注射组和对照组,注射组在完成ＩＶＢ１．２５ｍｇ后第７天行眼底荧光血管造影（ｆｕｎｄｕｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ,ＦＦＡ）检查,并于当天开始第一个象限的ＰＲＰ,每周１次,共４次完成ＰＲＰ;对照组每周１次,共４次完成ＰＲＰ。两组患者均于ＰＲＰ后４周、８周、１２周复诊,并复查最佳矫正视力（ｂｅｓｔｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＢＣＶＡ）、眼压、ＦＦＡ、光学相干断层扫描、眼前节及眼底。结果　注射组ＩＶＢ后１周,ＢＣＶＡ提高,ＲＮＶ渗漏面积减少,与治疗前差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;注射组各时间点ＢＣＶＡ、ＲＮＶ消退情况均显著优于对照组（均为Ｐ＜０．０５）。注射组各时间点黄斑中心凹视网膜厚度均较治疗前显著下降（均为Ｐ＜０．０５）,对照组各时间点黄斑中心凹视网膜厚度均较治疗前显著降低（均为Ｐ＜０．０５）,两组之间各时间点比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　ＰＲＰ能延迟单纯ＩＶＢ后ＲＮＶ的复发;联合治疗可更有效地推动ＰＤＲ中ＲＮＶ消退,安全可靠,可以更好地保护患者的视觉功能。     

玻璃体切割术后（水眼）继发青光眼的手术治疗策略

目的　评估玻璃体切割术后（水眼）继发青光眼患者的手术治疗方法。方法　回顾性分析我院２０１３年１０月至２０１４年４月收治的玻璃体切割术后（水眼）继发青光眼患者２６例２６眼的临床资料,对所有患者进行复合式小梁切除术,术中采用预置缝线,术后随访１２个月,观察视力、眼压及并发症情况。结果　末次随访时,视力、眼压均较术前改善,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;２０眼获得了满意效果,６眼术后眼压回升,加用降眼压药物后４眼控制在正常范围,２眼眼压失控,再次行睫状体二极管光凝术,术后眼压正常。结论　复合式小梁切除术,术中采用预置缝线,对玻璃体切割术后（水眼）继发青光眼患者是一种安全有效的手术方式,可以在很大程度上减少术中暴发性脉络膜出血及术后脉络膜脱离的发生几率。     

HIF1α在大鼠碱烧伤角膜新生血管形成中的表达

目的探讨碱烧伤后角膜新生血管形成过程中缺氧诱导因子1(HIF1α)的表达及作用。方法使用碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管模型,将25只SD大鼠随机分成5组:每组5只,右眼作为正常对照组,左眼作为实验组,每日用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管,分别计算角膜新生血管面积,并行免疫组织化学检测和统计学分析。结果正常大鼠角膜HIF1α、VEGF没有表达或在上皮基底膜有微弱表达,新生血管组角膜全层HIF1α、VEGF表达明显增强,其表达部位主要分布在形成的新生血管区域和上皮全层。结论本实验HIF1α表达水平与角膜新生血管有明显相关性。     

国人Stargardt病患者ABCA4基因突变分析与表型特征

目的通过对眼底黄色斑点症患者ABCA4基因突变分析,分析国人Stargardt病(STGDI)患者中ABCA4基因突变特点及其表型特征。设计回顾性病例系列。研究对象北京同仁医院可疑Stargardt病患者119例,其中17例家族史明确,102例为散发。方法利用PCR扩增DNA直接测序方法检测患者ABCA4基因50个编码外显子及外显子与内含子交界区,并记录患者的表型特征。主要指标ABCA4基因测序结果、家族史、眼底像、相干光断层扫描(OCT)、眼底自发荧光(AF)、视网膜电图(ERG)、视力。结果 119例STGDI患者中110例(92.4%)检测到2个及以上ABCA4基因致病突变,9例(7.6%)检测到1个致病突变。本研究共检出136种突变,其中新发现突变16种。基因突变中55.1%(75/136)为错义突变,15.4%(21/136)为缺失或插入,17.6%(24/136)为剪接位点突变,11.8%(16/136)为无义突变。最常见突变为无义突变p.Y808X,其等位基因频率最高为17次(7.1%)。STGDI患者平均发病年龄(12.85±9.01)岁,平均最佳矫正视力(0.11±0.12)。结论本研究结果拓展了ABCA4基因突变谱。中国人STGDI患者发病年龄早、视力损伤重,且ABCA4基因特点与其他种族明显不同。     

上颌窦对上颌后牙显微根尖手术的影响

显微根尖手术是临床上保存牙髓根尖周病患牙的有效手段之一,也是治疗其疑难病例的必备技术。但由于位置靠后操作空间狭小、根尖与上颌窦毗邻,导致在上颌后牙区进行根尖外科手术仍存在一定挑战。本文就上颌窦与上颌后牙解剖关系、对显微根尖手术影响以及辅助技术如:3D打印手术导板、超声骨刀等在上颌后牙区手术中的应用进行总结。文献复习结果表明,上颌后牙根尖与上颌窦空间关系通常分3类:根尖突进上颌窦底;根尖与上颌窦底相接触;根尖和上颌窦底之间有间隙或空间。术前CBCT检查后结合患牙根尖周和上颌窦状态以及根尖病损到上颌窦距离评估手术难度,术中应用导板、内窥镜、超声骨刀等以使手术更加安全可靠和精准微创,但后者在临床上的普及仍需进一步推广。目前尚缺乏高质量的上颌后牙区现代显微根尖手术长期疗效的临床研究。     

唾液外泌体与口腔疾病相关研究进展

唾液外泌体是指存在于唾液中的直径在30～150 nm的细胞外囊泡。随着近年来技术手段的发展,大量研究揭示唾液外泌体在多种口腔疾病的发生发展中发挥重要作用,如唾液外泌体CD9及CD81通过调控细胞粘附及运动促进肿瘤细胞转移、唾液外泌体miR-24-3p通过作用于PER1促进肿瘤细胞增殖、唾液外泌体程序性细胞死亡配体-1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)mRNA抑制炎症组织的破坏等,具有作为诊断口腔癌、牙周炎等口腔疾病的生物标志物的潜能。因此,唾液外泌体可作为口腔疾病潜在的预后和诊断标志物。唾液外泌体除与口腔疾病,如口腔癌、牙周炎、口腔扁平苔藓、干燥综合征等有关外,还同远处部位肿瘤如胰腺癌、肺癌等及系统性疾病如帕金森综合征、炎症性肠病等密切相关;深入研究唾液外泌体对口腔、全身系统性疾病的诊断与治疗作用,开发唾液外泌体作为疾病诊断的生物标志物的潜力具有重要意义。     

POLH对过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的影响

目的　探究DNA聚合酶η（POLH）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制。方法　以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H₂O₂处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H₂O₂最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H₂O₂组、H₂O₂+HA组和H₂O₂+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达。结果　RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜（1.00±0.22）相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降（0.38±0.62）（P<0.000 1）。RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200 μmol·L^-1 H₂O₂处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示, 200 μmol·L^-1 H₂O₂处理后细胞的凋亡明显增加。RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高（P<0.000 1）。免疫荧光染色结果显示,与H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降。免疫印迹实验检测结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞促凋亡蛋白BAX表达量明显下降,而抑凋亡蛋白BCL-2表达量明显升高（均为P<0.01）;与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞Keap1蛋白水平明显下降,而转录调控蛋白Nrf2表达明显升高（均为P<0.01）。结论　过表达POLH可通过增强DNA损伤修复功能抑制H₂O₂诱导的晶状体上皮细胞凋亡,其抑制氧化应激机制可能与Nrf2-Keap1-ARE通路有关。     

信号转导及转录激活因子4（STAT4）介导的circ_0001879表达对高糖条件下人视网膜微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨信号转导及转录激活因子4（STAT4）介导的circ_0001879表达对高糖处理的人视网膜微血管内皮细胞(HREC)增殖和凋亡的影响。方法　将HREC分为正常组（5.5 mmol·L^-1葡萄糖）、高糖组（25.0 mmol·L^-1葡萄糖）和甘露醇对照组（5.5 mmol·L^-1葡萄糖+19.5 mmol·L^-1甘露醇）,继续培养。将高糖组细胞进一步分组,进行相应转染处理。采用实时荧光定量PCR检测各组细胞circ_0001879、miR-338和多效生长因子（PTN）的表达。通过MTT、流式细胞术分析circ_0001879调控miR-338/PTN对HREC增殖和凋亡的影响。采用双荧光素酶报告实验确定miR-338和circ_0001879、miR-338和PTN之间的相互作用;ChIP实验验证STAT4与circ_0001879的结合。结果　与甘露醇对照组HREC中 circ_0001879（1.21±0.13）、miR-338（0.99±0.08）和PTN（1.12±0.11）的表达相比,高糖组HREC中circ_0001879（2.93±0.21）和PTN（3.62±0.33）的表达显著升高,而miR-338（0.44±0.05）的表达降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。通过MTT和流式细胞术检测各组细胞增殖活力和凋亡率,结果显示,过表达miR-338能够抑制高糖处理的HREC的增殖活力,促进HREC凋亡,而敲减miR-338的表达则作用相反;miR-inhibitor对高糖处理的HREC的作用能够被si-circ部分抑制。双荧光素酶报告实验结果显示,PTN是miR-338的一个靶基因,且其表达受miR-338和circ_0001879的影响。ChIP实验结果显示,STAT4与circ_0001879启动子区域的B1、B3结合,STAT4能够与circ_0001879的启动子结合并且促进circ_0001879的转录。结论　STAT4能够激活circ_0001879的转录,circ_0001879进一步通过调节miR-338/PTN轴促进高糖条件下HREC增殖,抑制细胞凋亡。     

蜕皮甾酮体外抑制β-淀粉样蛋白的纤维形成及神经毒性(英文)

目的　处于聚集及纤维丝状态的 β 淀粉样蛋白片段 1 - 4 2 (Aβ1 -4 2 )具有神经毒作用 ,可导致阿尔茨海默病 (AD)。本文观察蜕皮甾酮体外对Aβ1 -4 2 的聚集、纤维丝形成及其神经元毒性的影响 ,旨在为蜕皮甾酮防治AD提供依据。方法　透射电镜观察蜕皮甾酮及维生素E(VitE)对试管内Aβ1 -4 2 聚集和纤维丝形成的影响 ;MTT法及乳酸脱氢酶 (LDH)活性法检测培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元存活率及神经元受损情况。结果　① 1 0 0 μmol·L-1 Aβ1 -4 2 分别与磷酸盐缓冲液 (PBS)、1 0 0 μmol·L-1 蜕皮甾酮和 1 0 0 μmol·L-1 VitE孵育 3d时 ,各组均无纤维丝形成 ;孵育 7d时 ,各组均见纤维丝形成 ,但蜕皮甾酮和VitE组的纤维丝形成较PBS组明显减少 ,尤以蜕皮甾酮组更明显。2 0 μmol·L-1 的蜕皮甾酮和 2 0 μmol·L-1 VitE对Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成无明显影响。② 1 0 0μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元存活率明显下降。蜕皮甾酮或VitE 1 0～ 1 0 0 μmol·L-1 预处理 30min,再与 1 0 0 μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元的存活率呈剂量依赖性增加 ,LDH活性呈剂量依赖性降低。结论　离体条件下 ,蜕皮甾酮可直接抑制Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成 ,减轻Aβ1 -4 2 对神经元的毒性 ,?     

王万春治疗特殊类型毒蛇咬伤经验

王万春认为特殊类型毒蛇咬伤临床上较为少见,包括咬伤特殊人群如孕妇、儿童等,特殊部位如咬伤头面、会阴等.虽情况少见,临床治疗时要考虑多方面因素,但主要为蛇毒对人体的伤害,故采用中西医结合疗法,结合患者情况辨证施治,善用膏药散剂等外敷,内服外敷,中西结合,疗效显著.