HPLC同时测定陇中损伤胶囊中3种皂苷含量

目的建立同时测定陇中损伤胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的高效液相色谱梯度洗脱方法。方法采用C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸溶液（B）;梯度洗脱0～32 min（A23%～23%）,32～42 min（A 23%～30%）,42～67 min（A 30%～46%）;检测波长203 nm;流速1.0 mL/min。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1进样量分别在1.02～8.50μg（r=0.9995）、0.90～7.50μg（r=0.9990）、1.17～9.75μg（r=0.999 6）范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为100.98%（RSD=2.71%）、97.73%（RSD=1.98%）、99.57%（RSD=1.62%）。结论所用方法简单易行、准确可靠,可作为陇中损伤胶囊的质量控制方法。     

氧化苦参碱对大鼠冠脉结扎诱发急性心肌梗死的保护作用及机制

目的:研究氧化苦参碱( oxymatrine,OMT)对大鼠冠脉结扎诱发急性实验性心肌梗死的作用及可能作用机制.方法:SD大鼠按体重随机分为4组:假手术组、模型组、OMT 50,25 mg· kg -1组,各组ig给药,连续5d.末次给药后1h结扎冠状动脉左前降支(LAD)复制大鼠急性实验性心肌梗死模型,6h后,收集分析标本.HE染色观察大鼠心肌组织病理形态学变化,生化分析法检测血清中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)的活力,总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量,ELISA法分析血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果:OMT 50 mg·kg-1组能明显改善急性心肌梗死所致心肌组织间质水肿、炎细胞浸润等病理组织学改变;提高心肌梗死大鼠血清中SOD,CAT,GHS-Px活性,降低大鼠血清中MDA含量(与模型组比较,P＜0.05或P＜0.01);降低心肌梗死大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α的水平(P＜0.05或P＜0.01);对血清中T-AOC未见明显影响.结论:OMT对大鼠冠状动脉结扎诱发实验性急性心肌梗死具有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制免疫炎症因子分泌和改善氧化应激状态有关.     

穴位埋线疗法的优势病种及应用规律

目的:分析穴位埋线疗法在临床各科疾病中的优势,并探讨其临床应用规律,为临床治疗提供参考依据。方法:采用现代计算机技术,建立穴位埋线数据库,对近40年来与穴位埋线相关的文献进行筛选、录入、审核、提取、统计分析。结果:①录入1075篇文献,穴位埋线疗法在临床各科均有应用,尤其在内科中治疗病种最多,占所有病种的48.54%(50/103),以治疗胃脘痛为主,频次为102次,肥胖病频次为74次;其次是外科疾病,占所有病种的14.56%(15/103),以治疗腰腿痛为主,频次为79次;皮肤科以治疗牛皮癣为主,频次30次;五官科以治疗重睑术为主,频次为30次。②纳入的文献研究中,穴位选择以近部选穴和远部选穴为主;埋线工具有多种,主要以改制的腰穿针为主,在线的选择上以不同型号羊肠线为多。③疗效分析显示,穴位埋线疗法治疗各科疾病疗效显著,尤其以外科和皮肤科最为突出,总有效率均达90%以上。结论:穴位埋线疗法主要优势病种是内科的胃脘痛、肥胖病、痫证、哮喘、腹痛、面瘫、便秘;外科的腰腿痛;皮肤科的牛皮癣和五官科的重睑术。     

UGT1A1基因多态性与伊立替康为主方案治疗晚期结直肠癌的毒性和疗效的相关性分析

目的 探讨中国汉族人结直肠癌患者尿苷二磷酸葡糖苷酸转移酶1A1（UGT1A1）基因多态性分布,评价UGT1A1基因多态性与伊立替康（CPT-11）为主方案治疗晚期结直肠癌的毒性和疗效的关系。方法 以CPT-11为主的FOLFIRI方案（CPT-11 180mg／m²）和IFL方案（CPT-11 125mg／m²）治疗晚期结直肠癌,检测患者的UGT1A1*28和UGT1A1*6基因型,分析UGT1A1基因多态性及其与化疗毒性、疗效和预后的相关性。结果 共纳入192例患者,189例行UGT1A1*28和UGT1A1*6基因型检测,野生型占37.6％,1个位点变异型占43.9％,2个位点突变异型占18.5％。183例可评价毒副反应,3～4级中性粒细胞减少的发生率为26.6％（51／183）;3～4级迟发性腹泻的发生率为15.1％（29／183）。2个位点变异的患者3～4级迟发性腹泻发生率显著高于野生型患者（26.5％vs.9.0％,P=0.021）。UGT1A1*28野生型、杂合突变型、纯合突变型的2～4级迟发性腹泻的发生率分别为29.6％、37.5％和88.9％,差异具有统计学意义（P=0.02）。UGT1A1*28纯合突变者4级中性粒细胞减少的发生率为33.3％,高于UGT1A1*28野生型的9.6％,但差异无统计学意义（P=0.07）。Logistic多因素分析显示UGT1A1*28和UGT1A1*6基因型是2～4级迟发性腹泻的影响因素。CPT-11剂量高者的3～4级中性粒细胞减少（OR=5.666,95%CI：2.088～15.377,P=0.001）和2～4级迟发性腹泻（OR=4.481,95%CI：1.568～12.807,P=0.005）发生率也显著升高。158例可评价疗效,获CR 3例、PR 30例、SD 91例、PD 34例,总有效率为20.9％。2个位点变异患者的有效率为33.3％,高于野生型的15.3％,但差异无统计学意义（P=0.063）。治疗时间在6周以下者疾病进展的风险显著增加（OR=6.106,95％CI：1.680～22.197,P=0.006）。Cox多因素分析显示,ECOG评分、治疗时间及治疗方案是影响患者预后的独立因素,而UGT1A1基因多态性与预后无关。结论 UGT1A1*28和UGT1A1*6基因型2个位点变异的患者应用CPT.11为主方案化疗的不良反应发生率较高,但疗效较好,由不良反应导致的治疗时间缩短可能会影响其获得更好的疗效。     

转基因食品的快速PCR鉴定

用十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵(CTAB)法快速高效地从样品中提取了可供分析的基因组DNA,经PCR扩增,鉴定了含有35S启动子和NOS终止子的转基因样品.该方法的灵敏度可达0.1%,并且具有很好的稳定性.     

甲醇中毒大鼠视网膜及肝脏细胞的超微结构改变

[目的]了解甲醇中毒大鼠肝脏及视网膜细胞超微结构变化.[方法]取SD大鼠16只,随机分为4组,分别以等量甲醇、甲醇+乙醇、乙醇和生理盐水灌胃,观察各组实验动物的中毒表现及行为变化,常规取材、固定、制片,电镜下观察各组实验动物肝细胞和视网膜细胞的超微结构变化.[结果]甲醇中毒大鼠生理反应迟钝、运动机能下降.电镜下,甲醇染毒或甲、乙醇混合染毒大鼠肝细胞的线粒体肿胀,原有双层膜结构模糊,同时粗面内质网退化、扩张、溶解、脱颗粒.尤以甲醇和乙醇混合染毒动物的肝细胞损害更为显著.甲醇对眼部损害主要体现在眼底异常及结膜充血或出血.在亚细胞水平,甲醇对感光细胞的光感受器(膜盘)有明显的损伤作用.[结论]甲醇染毒或甲、乙醇混合染毒对大鼠肝细胞的线粒体和视网膜感光细胞的光感受器(膜盘)有明显损伤作用.     

The genetic load for hereditary hearing impairment in Chinese population and its clinical implication

Objective To understand the genetic load in the Chinese population for improvement in diagnosis, prevention and rehabilitation of deafness. Methods DNA samples, immortalized cell lines as well as detailed clinical and audiometric data were collected through a national genetic resources collecting network. Two conventional genetic approaches were used in the studies. Linkage analysis in X chromosome and autosomes with microsatellite markers were performed in large families for gene mapping and positional cloning of novel genes. Candidate gene approach was used for screening the mtDNA 12SrRNA, GJB2 and SLC26A4 mutations in population-based samples. Results A total of 2,572 Chinese hearing loss families or sporadic cases were characterized in the reported studies, including seven X-linked, one Y-linked, 28 large and multiplex autosomal dominant heating loss families, 607 simplex autosomal recessive hereditary hearing loss families, 100 mitochondrial inheritance families, 147 GJB2 induced heating loss cases, 230 cases with enlarged vestibular aqueduct(EVA) syndrome, 169 sporadic cases with auditory neuropathy, and 1,283 sporadic sensorineural hearing loss cases. Through linkage analysis or sequence analysis, two X-linked families were found transmitting two novel mutations in the POU3F4 gene, while another X-linked family was mapped onto a novel locus, nominated as A UNX1 (auditory neuropathy, X-linked locus 1). The only Y-linked family was mapped onto the DFNY1 locus(Y-linked locus 1, DFNY1). Eight of the 28 autosomal dominant families were linked to various autosomal loci. In population genetics studies, 2,567 familial cases and sporadic patients were subjected to mutation screening for three common hearing loss genes: mtDNA 12S rRNA 1555G, GJB2 and SLC26A4. The auditory neuropathy cases in our samples were screened for OTOF gene mutations. Conclusions These data show that the Chinese population has a genetic load on hereditary heating loss. Establishing personalized surveillance and prevention models for hearing loss based on genetic research will provide the opportunity to decrease the prevalence of deafness in the Chinese population.     

两种内淋巴给药方式对豚鼠耳蜗功能和形态的影响

目的 观察经耳蜗侧壁打孔(侧壁径路)和经圆窗膜、基底膜穿刺(双膜径路)两种内淋巴系统给药方式对豚鼠耳蜗整体形态结构和功能的影响并比较两种方式的优劣.方法 40只正常健康杂色豚鼠分为A、B两组(每组20只),所有动物左侧为给药耳,右侧为非给药耳.A组采用侧壁径路进入中阶灌注携带增强型绿色荧光蛋白基因的5型重组腺病毒(adenovirus5-enhanced green fluorescence protein,AdS-EGFP)5 μl;B组采用双膜径路进入中阶灌注AdS-EGFP 5μl.给药前后行听性脑干反应(ABR)测试,观察听功能改变.耳蜗冰冻切片直接荧光观察腺病毒分布,HE染色观察手术径路的愈合情况.基底膜铺片鬼笔环肽染色观察毛细胞受损情况,扫描电镜观察局部损害情况.结果 所有动物术后均存活.穿刺部位修复良好,耳蜗的完整性得以保持.EGFP在Corti器和血管纹内壁细胞内标记明显,表明两种给药径路都可以将药物成功注入内淋巴系统.A组证实成功14只(70%),手术前后ABR反应阈(声压级)变化[(33.1±10.3)dB]与对侧非给药耳[(9.4±3.9)dB]比较差异具有统计学意义(F=46.34,P=0.0005);B组证实成功8只(40%)手术前后阈值改变[(2.5±3.8)d8]与对侧耳[(2.5±3.8)dB]比较差异无统计学意义(F=0.00,P=1.000).两种方法在部分动物中都有药物渗漏入外淋巴的现象,给药局部产生炎性反应,侧壁径路对毛细胞的损害范围大于双膜径路.结论 两种手术径路都可将药物成功注人豚鼠耳蜗的内淋巴系统中,局部有炎性反应,术后耳蜗的完整性可以获得完全恢复.侧壁径路对豚鼠耳蜗毛细胞缺失和ABR反应阈的影响大于双膜径路,但是经侧壁径路进入中阶的手术成功率高于双膜径路,选择何种灌注径路需要根据实验要求来定.     

长江中下游地区菱属植物的DNA分子鉴别

目的 对野生菱和栽培菱种rDNA ITS片段进行分析，探讨该片段在两大群体中的系统学及鉴别研究意义。方法 对菱的rDNA ITS区进行了PCR扩增、测序，运用clustal、Mega 2．0等软件对ITs区进行序列分析鉴别。结果 获得rDNAI TS1、ITS2和5．8S rDNA完整序列，10个居群菱的ITS1与ITS2序列的长度分别为234～236 bp和220～221 bp，5．8S区均为164bp，不同居群的碱基差异为0．22％～2．94％。变异位点数为16个，信息位点数6个。用NJ法根据ITS序列数据构建系统发生树。结论 尽管菱属各居群间rDNA ITS的差异百分率较小，其亲缘关系较近，但根据ITS序列的特征可以很好地鉴别野生菱、栽培菱，菱属植物有可能都起源于同一种野生类居群。     

磁共振成像新技术在脊柱病变中的应用

磁共振成像新技术包括磁共振同/反相位成像、弥散加权成像、灌注加权成像及动态增强成像等.这些新技术的应用在鉴别脊柱良恶性病变方面有较高价值.并有助于监控脊柱恶性病变的放疗或化疗后改变.