粉尘螨Hsp60基因的测序、克隆和原核表达

目的 探索和发现粉尘螨新的变应原组分。方法 以粉尘螨热休克蛋白60(Heat shock protein 60,Hsp60)为研究对象,用简并引物PCR方法扩增出其cDNA片段,并对该片段进行了序列测定和分析。同时,对该基因片段进行了克隆、原核表达。结果与结论 成功确定粉尘螨Hsp60基因片段cDNA序列;构建了pET-28a(+)-Hsp60重组质粒,并在E.coli BL21中得到高效表达。     

天麻钩藤饮抗大鼠视神经夹伤模型视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究

目的 观察天麻钩藤饮对视神经夹伤模型大鼠视网膜神经上皮层厚度和视网膜神经节细胞（RGC）凋亡的影响。设计 实验研究。研究对象 SPF级雄性Wistar大鼠48只。方法 将大鼠随机分6组,每组8只,分别为正常对照组,阴性对照组,天麻钩藤饮低剂量组（0.6 g/ml）、中剂量组（1.2 g/ml）、高剂量组（2.4 g/ml）和银杏叶片阳性对照组（1.2 mg/ml）,除正常对照组大鼠不做处理,其他组大鼠右眼均建立视神经夹伤模型,正常对照组和阴性对照组给予纯净水灌胃。于给药30天处死动物取眼球,做石蜡切片HE染色,观察各组视网膜神经上皮层厚度,TUNEL法检测RGC的凋亡程度。主要指标 HE染色视网膜神经上皮厚度及RGC凋亡数量。结果 阴性对照组（171.04±13.86 μm）比正常组（208.98±8.46 μm）视网膜神经上皮厚度显著减少（P=0.000）。而天麻钩藤饮中、高剂量组大鼠视网膜厚度（分别为187.68±11.16 μm 和189.22±9.54 μm）比阴性对照组显著增加（P=0.043,0.001）,且中、高剂量组与阳性对照组（191.35±9.03 μm）之间无显著差异（P=0.052,0.670）;TUNEL凋亡检测发现,阴性对照组凋亡细胞数（9.09±2.24个/高倍视野）比正常组（0.59±0.61个/高倍视野）明显增加（P=0.000）,中剂量组、高剂量组和阳性对照组RGC的凋亡（分别为7.00±1.88, 5.22±2.05, 5.03±2.03个/高倍视野）均比阴性对照组显著减少（P=0.024, 0.000,0.000）。结论 天麻钩藤饮对大鼠视神经夹伤模型具有一定抗RGC凋亡的作用,随药物浓度的升高,抗凋亡作用更显著。     

PRKCI基因单核苷酸多态性与神经管畸形的相关性研究

目的探讨PRKCI基因单核苷酸多态性（SNP）与中国山西省神经管畸形（NTDs）发生的相关性。方法采用病例对照研究,利用MassARRAY分子量阵列分析平台,检测133例NTDs标本和135例非病理性胎儿标本PRKCI基因中17个标签SNPs的基因分型,分析其与NTDs发生的相关性。结果 17个SNPs位点中,16个的微效等位基因频率（MAF）与HapMap或dbSNP数据库的结果基本一致。除rs9876082外,其余SNPs位点的基因型分布和等位基因频率在病例组和对照组均无明显差异。rs9876082位点为纯合的微效等位基因A时,NTDs的发病率增加（P=0.035,比值比=2.135,95%可信区间=1.846-2.471）,但是调整其它变量后进行logistic回归分析,这种相关性不再明显（P=0.057）。结论 PRKCI基因rs9876082位点与NTDs的发生有弱的相关性,这种相关性需进一步加大样本进行验证,PRKCI基因可能不是通过其SNPs影响NTDs的易感性。     

维生素D治疗慢性肾脏疾病继发性甲状旁腺功能亢进症的进展

继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)是慢性肾脏疾病(CKD)最常见的并发症之一.维生素D及其类似物是治疗SHPT的常用药物,充分了解低维生素D状态对CKD患者的危害,维生素D制剂治疗SHPT的药理机制及治疗过程中应该注意的问题,有助于临床医师合理应用此类药物,延缓SHPT发展为三发性甲状旁腺功能亢进症.     

SOX13抗体对酮症倾向糖尿病患者胰岛功能的影响

目的 探讨SOX13抗体(sry related HMG box 13-antibody,SOX13-Ab)对酮症倾向糖尿病(KPD)患者胰岛功能的影响,进一步确定SOX13-Ab在KPD患者中的自身免疫反应特征.方法 2005年1月至2009年11月对南京鼓楼医院内分泌科就诊的245例KPD患者[男138例,女107例,年龄33(1～80)岁]均检测SOX13-Ab、谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)和蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A),以SOX13-Ab单一阳性患者为病例组,以GAD-Ab、IA-2A单一阳性及抗体均阴性组患者为对照组,比较4组患者的胰岛功能.各组平均C肽水平采用中位数(四分位数间距)表示,经自然对数转化后进一步采用方差分析比较组间差异.结果 (1)女性患者中SOX13-Ab单一阳性、GAD-Ab单一阳性组空腹C肽(FCP)和餐后2 h C肽(PCP)水平分别为166.0(300.0)和166.5(159.3)、285.0(527.0)和231.0(502.5)pmol/L,均显著低于抗体阴性组[FCP为287.5(302.7)pmol/L、PCP为528.0(774.0)pmol/L;均P＜0.05];(2)发病年龄≤40岁或病程≤5年的KPD患者中,其FCP水平SOX13-Ab组[166.0(56.0)vs 228.0(250.0)pmol/L]、GAD-Ab单一阳性组[191.0(137.5)vs 324.0(340.0)pmol/L]均显著低于抗体阴性组[167.1(223.1)vs 324.0(340.0)pmol/L];而在病程＞5年的KPD患者中,GAD-Ab单一阳性组FCP水平为130.0(458.8)pmol/L、SOX13-Ab单一阳性组为189.5(357.7)pmol/L,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);(3)协方差分析显示SOX13-Ab单一阳性与抗体阴性组之间FCP、PCP比较差异无统计学意义(P＞0.05);而GAD-Ab/SOX13-Ab双阳性组FCP与抗体阴性组比较差异有统计学意义(P＜0.05);(4)GAD-Ab、IA-2A单一阳性组内FCP与病程均呈显著负相关(r值分别为-0.500、-0.821,P值分别为0.007、0.023),而SOX13-Ab单一阳性组内FCP与病程之间无显著负相关性(r=-0.104,P=0.606).结论 SOX13-Ab对KPD患者胰岛功能的影响弱于GAD-Ab.     

我国小儿丙泊酚靶控输注系统在小儿短小手术中的应用

目的 探讨我国新型小儿丙泊酚靶控输注系统应用于小儿短小手术的可行性,并与国外小儿Marsh系统比较.方法 90例美国麻醉医师协会体格情况分级Ⅰ级、3～5岁、择期行单侧腹股沟斜疝疝囊结扎术小儿,数字随机法分为L组(内嵌我国新型小儿丙泊酚药代学模型)和M组(国外小儿Marsh模型),每组45例.所有患儿术前不用镇静药,常规监测血压、心电图、脉搏血氧饱和度、脑电双频指数(BIS).两组分别以我国、国外两种药代模型行丙泊酚血浆靶控输注,初始目标血浆浓度为6 μg/ml,同时复合局部神经阻滞后开始手术.如切皮时发生明显体动则将血浆浓度上调1μg/ml,直至体动消失,最高至8 μg/ml,如仍有体动则停靶控输注改为吸入麻醉.监测诱导前(T_0)、麻醉诱导毕(T_1)、切皮时(T_2)、切皮后3 min(T_3)、5 min(T_4)和术毕时(T_5)的心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、呼吸频率(RR)和BIS值.记录丙泊酚各目标血浆靶控浓度以及吸人麻醉下完成手术的例数,术后苏醒时间和术中、术后并发症.结果 L组在靶控输注下及血浆浓度为6 μg/ml时可完成的手术例数多于M组(P＜0.01).T_1～T_4时点HR、SBP、DBP、RR和BIS值组内比较,L组差异无统计学意义,M组差异有统计学意义(P＜0.05);L组T_2～T_4时点上述指标均小于M组(P＜0.05或0.01).L组术中并发症少于M组(P＜0.05).结论 小儿短小手术同样应用血浆靶控输注丙泊酚6 μg/ml时,我国内嵌新型小儿丙泊酚药代系统较Marsh系统能较好地抑制应激反应,血流动力学平稳,并发症较少,符合临床要求.     

肠胃清粗提物协同奥沙利铂抑制人结肠癌HCT116细胞及其作用机制研究

目的 探讨中药复方肠胃清(黄芪、党参、白术、八月札、薏苡仁、野葡萄藤、大血藤、猪苓)粗提物与奥沙利铂联合应用抑制人结肠癌HCTll6细胞的协同增效作用及机理.方法 奥沙利铂、肠胃清提取物分别单独以及联合作用于人结肠癌HCTll6细胞,采用MTT法检测半数抑制质量浓度(IC50),通过TransweⅡ实验检测侵袭转移抑制作用,并利用Western Blotting技术检测侵袭转移与凋亡相关蛋白的表达变化.结果 肠胃清提取物、奥沙利铂以及联合肠胃清提取物(0.15 mg/mL)时奥沙利铂对人结肠癌HCTll6细胞的半数抑制质量浓度分别为(3.24±0.06) mg/mL、(15.74±0.53)μg/mL及(10.32±0.37)μg/mL,联合用药组半数抑制质量浓度降低,侵袭抑制率提高,ADAM-17、MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达下调(P＜0.05),P53蛋白表达升高(P＜0.01).结论 中药复方肠胃清粗提物具有一定的抗人结肠癌细胞HCTll6作用,在与奥沙利铂联用时表现出明显的协同作用,其机制可能与降低ADAM-17、M MP-2、MMP-9、BCL-2蛋白以及提高P53蛋白的表达有关.     

小汗腺螺旋腺癌一例

患者女,70岁。40年前发现左颈部、躯干出现数个皮肤肿物,10余年前手术切除数个,术后复发并增多,2个月前肿物出现持续性钝痛,10 d前左颈部肿物出现破溃。组织病理学检查见真皮内肿瘤细胞团块,中央为良性小汗腺螺旋腺瘤的成分,周边为恶性肿瘤成分,恶性肿瘤成分中细胞轻度异形伴透明变性。免疫组化显示,癌胚抗原和上皮膜抗原呈阳性表达。诊断为小汗腺螺旋腺癌。手术切除后1个月复发,3个月复发的肿瘤增多增大,并出现破溃,术后6个月死亡。     

12小时留院制对住院医师人文素养和临床业务素质的影响

采用自行设计的调查问卷对本院接受过和正在接受住院医师留院制管理的临床医师共70人进行调查,探讨12小时留院制对住院医师人文素养和临床业务素质的影响.结果 显示住院医师留院期间的人文素养、临床知识和技能都得到了明显提高,住院医师12小时留院制是强化住院医师规范化培训的有效制度.     

胆囊息肉样病变的CT仿真胆囊内镜成像与超声的对比研究

目的评价cT仿真胆囊内镜（CTVEGB）对胆囊息肉样病变的诊断价值,提高识别癌前病变或早期胆囊癌的能力。方法对63例超声诊断为胆囊息肉样病变的患者进行口服对比剂胆囊CT检查和CT仿真内镜成像处理,选择其中经手术病理证实的34例进行CT仿真内镜成像与超声图像的对比研究。结果CTVEGB和超声对胆囊息肉样病灶的检出符合率分别为91．25％、93．40％,两者差异无统计学意义;恶性或恶性倾向的诊断准确率分别为77．80％、42．90％,两者差异有统计学意义。结论CTVEGB对胆囊息肉样病变的显示和恶性或恶性倾向的诊断具有较高的临床应用价值。