离心淘洗技术在分离大鼠肝非实质细胞亚群中的应用

目的：采用离心淘洗技术分离纯化大鼠肝非实质细胞亚群。方法：通过原粒肝脏酶灌注,准备肝非实质细胞悬液,离心淘洗,收集不同流速(20和40ml／min)的细胞群。结果：经培养鉴定,流速21ml／min获得的为肝窦内皮细胞,40ml／min的为库普弗细胞,细胞纯度均大于95％。结论:在本实验室,离心淘洗技术已能成功应用于肝脏细胞分离过程。     

北京地区门诊慢性便秘患者多中心流行病学调查

背景:慢性便秘是一种临床常见病症,部分患者的治疗效果不佳。全面评估慢性便秘患者的症状学、发病诱因、既往治疗情况、精神心理状态等可更好地指导治疗。目的:探讨北京地区慢性便秘患者的临床特征。方法:统计2007年3～5月北京地区10家医院门诊患者中的慢性便秘患者,并对561例慢性便秘患者行问卷调查,包括治疗、症状谱、心理学等方面。结果:研究期间内10家医院消化内科门诊总人次73 923人次,慢性便秘患者共3009例次(4.1%),其中重度便秘患者649例次(21.6%)。561例慢性便秘患者中,25.1%的患者发病有一定诱因。62.2%的患者不完全在医师指导下使用通便药。排便费力为最常见(74.8%)和最令患者痛苦的症状(61.2%)。27.5%的患者合并胃食管反流症状,41.2%合并消化不良症状。52.7%的患者合并焦虑和(或)抑郁状态。结论:消化内科门诊中慢性便秘和重度便秘患者较多,排便费力是最常见、最令患者痛苦的症状,合并胃食管反流和(或)消化不良症状常见,患者易有焦虑和(或)抑郁等精神心理异常。     

野生型蛋白激酶GIα腺病毒抑制低氧肺动脉平滑肌细胞表型转换及细胞增殖

目的 观察携带野生型蛋白激酶GIα腺病毒(Ad-PKGIα)抑制低氧诱导人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转换及其增殖的影响,探讨其在低氧肺血管重建(HPVR)中的作用.方法 组织块法建立人PASMC细胞系.Ad-PKGIα转染PASMC;采用荧光显微镜观察转染效率;RT-PCR、Western blot检测PASMC中PKGIα mRNA表达、Ad-PKGIα转染对低氧PASMC表型转换中平滑肌α肌动蛋白(SM-α-actin)表达的影响.流式细胞仪检测Ad-PKGIα转染后低氧对PASMC细胞周期的影响;~3H-TdR掺入法检测PASMC增殖.结果 (1)Ad-PKGIα转染后PASMC中PKGIα mRNA水平、磷酸化PKGIα蛋白水平显著增高.(2)常氧时PASMC中SM-α-actin蛋白表达为44.25±5.34;3% O_2处理12 h PASMC中SM-α-actin蛋白表达水平降至32.18±4.19,处理24 h SM-α-actin蛋白表达水平降至21.90±2.44.(3)低氧条件下,PASMC开始增殖,随着低氧时间延长,PASMC增殖逐渐增加,至24 h PASMC增殖最多[(14 924±1491)次/min].与未转染对照组、腺病毒空载体组比较,Ad-PKGIα转染组PASMC增殖明显受到抑制.(4)低氧使未转染对照组和腺病毒空载体组的PASMC进入有丝分裂期,随着低氧时间延长,G_0/G_1期细胞比例逐渐减少,S+G_2/M期细胞比例逐渐增加.Ad-PKGIα转染后常氧状态下PASMC G_0/G_1期细胞比例下降、S+G_2/M期细胞比例上升趋势均明显减缓.结论 PKGIα基因在低氧肺血管重建信号转导途径中有重要的调节作用,可作为基因治疗的靶点之一.     

溃疡性结肠炎患者手术治疗预测因素分析

手术是溃疡性结肠炎（UC）内科治疗无效或发生严重并发症者的治疗选择.目的：分析UC患者行手术治疗的可能预测因素.方法：纳入1998年8月～2009年9月北京协和医院住院UC患者312例,其中34例接受手术治疗,278例接受非手术治疗,回顾性分析、比较两组患者的各类临床资料.结果：住院UC患者手术率为10.9%,手术死亡率为5.9%,重度UC患者手术率为23.9%.手术组13例患者为激素抵抗,8例为激素依赖,9例发生严重并发症,4例激素治疗有效者主动要求手术治疗.手术组平均住院次数显著多于非手术组（P〈0.05）,术前Hb、白蛋白显著低于非手术组（P〈0.05）,CRP显著高于非手术组（P〈0.05）,重度结肠炎、全结肠炎患者比例显著高于非手术组（P〈0.05）.结论：疾病严重程度高、病变范围广、对激素抵抗的UC患者,手术需求增加.     

N受体对四磨汤诱发的胃窦平滑肌收缩的影响

目的研究烟碱（N）受体对四磨汤诱发的sD大鼠离体胃窦平滑肌条收缩活动的影响。方法离体胃窦平滑肌条置于盛有Krebs液的组织浴槽中以记录其等长收缩活动,观察不同剂量四磨汤（1μL、5μL、25μL、50μL、100μL、150μL、200μL）对大鼠胃窦平滑肌条收缩活动的影响,并观察N受体阻断剂六烃季胺（10^-4mol／L）对四磨汤引起的胃窦平滑肌收缩活动的影响。结果四磨汤引起大鼠胃窦纵行和环行平滑肌条收缩活动增加呈剂量依赖性。六烃季胺对于四磨汤引起的胃窦纵、环形平滑肌条兴奋作用均具有部分抑制效应,对环行肌条的作用明显高于对纵行肌的影响。结论四磨汤对大鼠胃窦平滑肌的收缩活动具有明显的兴奋作用,但部分作用与N受体有关,胃窦环行肌更为依赖N受体的作用。     

活化的类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Toll样受体4诱导Th17细胞分化

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs) Toll样受体4(TLR4)通过诱导Th17细胞分化参与RA疾病发生发展的意义.方法 采集22例RA患者和20名健康对照外周血,流式细胞术检测Th17细胞频率,脂多糖刺激PBMCs 2 d,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PBMCs TLR4 mRNA水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清液白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量.收集上清液与CD4+脐带血单个核细胞(CBMCs)培养3d,RT-qPCR检测CBMCsIL-17 mRNA水平.ELISA检测上清液IL-17含量.统计学处理采用成组t检验.结果 与健康对照组比较,RA患者Th17细胞频率[(0.53±0.14)％与(1.57±0.68)％]、TLR4 mRNA显著升高(P均＜0.01);PBMCs经脂多糖刺激后,RA患者TLR4 mRNA升高3.5倍,而健康对照组下降到0.11倍;RA患者PBMCs产生的IL-6、TNF-α较健康对照组明显增加(P＜0.01);RA患者PBMCs上清液诱导CD4+CBMCs IL-17 mRNA水平、IL-17含量与健康对照组相比均显著升高(P＜0.01);而未经脂多糖刺激,2组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RA患者PBMCs的TLR4表达及对脂多糖的刺激的反应性增加,且具有较强的诱导Th17细胞分化能力.     

小儿重症支原体肺炎免疫学临床研究

目的探讨小儿重症支原体肺炎体液免疫变化。方法 108例重症支原体肺炎患儿的临床资料,分为普通治疗组（46例）和增加免疫方法治疗组（58例）。结果重症支原体肺炎患儿血清免疫球蛋白IgM水平明显高于轻症组,差异具有统计学意义（P〈0.01）;在治疗上免疫治疗组在热退时间、肺部啰音吸收时间、咳嗽缓解时间、胸片吸收时间、肺外并发症消失时间、住院时间均优于普通治疗组,差异均具有统计学意义（P值均〈0.05）。结论重症支原体肺炎患儿较轻症组存在体液免疫功能异常,对于有适应症的患儿早期增加免疫治疗方法可缩短病程,减少并发症。     

唑来膦酸对大鼠颌面骨和外周骨创伤后骨改建的影响

目的 研究唑来膦酸对大鼠颌面骨和外周骨创伤后骨改建的影响。方法 SD大鼠随机分为实验组和对照组,每周分别给予尾静脉注射唑来膦酸(80μg/kg)和PBS。用药两周后,在全麻下拔除一侧上颌第一磨牙,并在同侧胫骨近心端制备骨缺损,缝合创口,继续用药至术后1、4和12周后分批处死,分离并收集骨组织样本。Micro-CT分析各组骨缺损区新骨形成情况。HE和Masson染色分析骨缺损区软组织愈合情况、新骨形成情况、有无炎症反应和死骨形成等。ELISA法检测骨改建过程中关键因子RANKL和OPG的表达。结果 Micro-CT结果显示,实验组拔牙创表面高低不平,中部浅凹处可见游离的死骨片,而对照组拔牙创新骨形成区域与周边骨质均匀连续,进行了正常的生理性骨改建。实验组胫骨缺损区愈合,骨皮质完整连续,较对照组厚且致密,骨松质内的新生骨亦明显较对照组排列紧密。术后4周和12周,实验组胫骨BV/TV值较对照组明显上升(P<0.05),实验组颌骨BV/TV值较对照组差异无统计学意义。组织学染色显示,实验组颌骨拔牙创黏膜未愈合或延迟愈合,未愈合的黏膜下方可见暴露骨坏死,骨质出现不同程度的硬化,且周围伴有大...     

26例腹膜后肿瘤临床诊治分析

目的：观察腹膜后肿瘤的手术效果。方法：对1980-2005年26例腹膜后肿瘤病例进行回顾分析。结果：完整切除20例,部分切除或探查活检6例,手术死亡0例。5年生存率：未切除组为14．3％、恶性切除组为37．5％、良性切除组为69．2％。结论：提高手术切除率是改善预后的关键,术前核磁共振（MRI）、数字试影（DSA）检查有助于了解肿瘤内及周围血管的走行,用不同方法处理侵及重要血管的腹膜后肿瘤并争取彻底切除,是减少术后复发,提高生存率的有效方法。     

疏肝解郁胶囊联合艾司西酞普兰治疗轻中度单相抑郁症临床研究

目的：观察疏肝解郁胶囊联合艾司西酞普兰治疗轻中度单相抑郁症的临床疗效及对血清去甲肾上 腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT） 水平和神经功能的影响。方法：选择120例单相抑郁症轻中度患者为研究对 象,按随机数字表法分为研究组和对照组各60例。对照组给予艾司西酞普兰口服,研究组在对照组基础上给 予疏肝解郁胶囊口服,持续服药8 周。评价2 组临床疗效,比较2 组治疗前后美国国立卫生研究院卒中量 表（NIHSS） 评分及血清NE、5-HT、白细胞介素-1β （IL-1β）、肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介 素-6（IL-6） 水平,观察不良反应发生情况。结果：2组总有效率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗 后,2组血清NE、5-HT水平较治疗前升高（P＜0.05）,且研究组血清NE、5-HT水平高于对照组（P＜0.05）。 治疗后,2组NIHSS评分较治疗前降低（P＜0.05）,且研究组NIHSS评分低于对照组（P＜0.05）。治疗后,2组 血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平较治疗前降低（P＜0.05）,且研究组血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平低于对照 组（P＜0.05）。研究组不良反应发生率低于对照组（P＜0.05）。结论：疏肝解郁胶囊联合艾司西酞普兰治疗轻 中度单相抑郁症能有效改善血清NE、5-HT水平,降低炎症因子的表达,提高神经功能。