黑乳海参中两个新的四环三萜化合物

目的：研究黑乳海参体内的化学成分.方法：应用多种色谱技术对黑乳海参体内的化学成分进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果：分离得到了2个三萜皂苷元类化合物,应用化学方法和各种光谱方法鉴定其结构为：3β,17α-二羟基-7,9-二烯-海参烷;3β,17α-二羟基-9,22-二烯-海参烷.结论：2个化合物均为新化合物.命名为黑乳参皂苷元A和B.是我国学者首次从海参中分离得到的三萜皂苷元类化合物.     

基于蛋白质组学分析栀子水提液肝损伤时-毒关系及其机制

研究栀子水提液致大鼠肝毒性的时-毒关系及其作用机制。大鼠随机分为C组(0 d),D5组(5 d),D12组(12 d),D19组(19 d),D26组(给药19 d停药7 d)。各组灌胃给予对应时长栀子水提物,给药剂量为10 g·kg^-1,C组给予等量生理盐水。各组末次给药后麻醉大鼠,摘取肝脏,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察肝脏形态变化。提取肝脏蛋白,Nano-ESI液相-质谱联用系统检测蛋白,Protein Discovery软件鉴定蛋白,SIEVE软件对蛋白进行相对定量定性分析,基于STRING构建蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络,使用Cytoscape软件对差异蛋白进行聚类分析。Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)数据库对聚类蛋白进行富集信号通路分析。将筛选的差异蛋白表达与肝脏病理等级评分结果进行Pearson相关性分析。结果发现D5组、D12组、D19组大鼠肝损伤程度均显著高于C组,D5组肝损伤程度略高于D12组、D19组,D26组与C组无显著差异。蛋白质组学筛选重点差异蛋白147个,主要形成6大聚类,涉及主要通路5条,包括药物代谢通路、视黄醇代谢通路、蛋白酶体、氨基酸的生物合成通路以及糖酵解/糖异生通路。Pearson相关分析发现不同给药时间差异蛋白表达与肝脏病理程度的变化具有一定的时序关系。上述结果表明由栀子引起的肝损伤程度并不随着给药时间增加而增加,停止给药后可恢复正常。以上通路可能与栀子水提液致肝损伤作用机制相关。     

丹红合剂对家兔血小板聚集的影响

目的 观察丹红合剂对家兔血小板聚集的影响.方法 采用随机数字表法将40只大耳白家兔随机分为5组,每组8只,分别为空白对照组(予等容量的0.5％羧甲基纤维素纳),丹红合剂5、2.5、1.25 g/kg组,阿司匹林0.025 g/kg组.各组均按1ml/kg容积灌胃,1次/d,连续给药8d.于末次给药1h后心脏取血,用二磷酸腺苷(ADP)、胶原、花生四烯酸(AA)3种诱导剂进行血小板聚集实验.结果 丹红合剂5、2.5、1.25 g/kg组对ADP诱导的家兔血小板聚集率的抑制率分别为9.4％、5.1％、0.6％,对胶原诱导的家兔血小板聚集抑制率分别为34.5％、11.1％、5.6％;对花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集抑制率分别为21.4％、11.6％、2.3％.结论 丹红合剂具有抑制血小板聚集作用.     

胶艾汤中阿胶炮制对其止血作用影响的研究

目的:优选胶艾汤中阿胶的最佳炮制方法。方法:以小鼠出血时间与凝血时间为指标,比较生品、蛤粉炒、蒲黄炒、蒲黄烘、烘法、微波法、真空法所得炮制品的止血作用差异。结果:阿胶6种炮制品均有明显的止血作用,与空白组比较P<0.05或0.01,其强弱顺序是:蛤粉炒、真空法>蒲黄烘、微波法>烘阿胶、蒲黄炒,生阿胶作用最差,真空法与蛤粉炒阿胶的止血作用与宫血宁相当,无显著性差异,P>0.05。结论:阿胶最佳炮制方法是蛤粉炒,其出血时间与凝血时间最短。     

三七总皂苷对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的研究三七总皂苷(total sapon ins of Panax notoginseng,PNS)对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的保护作用。方法用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)5 mg.kg-1.d-1,sc,连续7 d,建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给大鼠腹腔注射PNS25和50 mg.kg-1.d-1,连续14 d,测定全心重量指数(HW/BW),左心室重量指数(LVW/BW即LVI);采用试剂盒用分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)和一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NDS)活力;用放免分析法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果ISO模型组大鼠的HW/BW,LVI明显升高;左心室Hyp、AngⅡ含量增高;NO水平下降,诱生型NOS(iNOS)活力显著升高,结构型NOS(cNOS)活力显著降低。PNS能明显提高心肌组织NO水平和cNOS活力,降低胶原的含量及iNOS活力,抑制AngⅡ产生,使HW/BW及LVI下降,抑制心肌肥厚。结论PNS对ISO所致大鼠心肌肥厚具有保护作用。     

基于谱效相关的何首乌抗血小板聚集药效物质研究

应用体外抗血小板聚集生物活性检测方法,并结合化学指纹图谱进行谱效相关分析,探索何首乌抗血小板聚集的活性物质。采用体外抗血小板聚集法进行检测,何首乌50%乙醇提取物的抗血小板聚集作用强于10%或90%的乙醇提取物,超声提取优于回流提取。对正交试验的不同提取物进行抗血小板聚集活性评价,抑制率在32.03%~74.56%。谱效相关分析结果表明,反式二苯乙烯苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素与抗血小板聚集活性的相关系数较高且具有统计学意义,分别为0.963(P0.01),0.902(P0.01)和0.656(P0.05);进一步对上述3种与活性相关系数较高化合物的单体进行活性验证,均有较好的抗血小板聚集活性;最后根据3种单体化合物在何首乌中的含量差异计算相对活性贡献度可知,反式二苯乙烯苷是何首乌体外抗血小板聚集的主要活性物质。     

基于稳定同位素指纹的春三七主根产地判别研究

研究建立春三七主根产地判别技术,为三七地理标志产品保护和溯源提供理论依据.采集广西百色片区、云南文山片区、云南新拓展片区三七主产县三年生春三七样品共44份,利用元素分析-稳定同位素质谱仪测定了其稳定性碳、氮、氢、氧同位素比率,结合Duncan多重比较分析、Fisher判别分析和逐步判别分析建立3个片区三年生春三七主根产...     

二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响

目的 观察古代经典名方二妙散（EMS）对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法 按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS（5.4 g·kg^-1）组及甲氨蝶呤（MTX,0.5 mg·kg^-1）组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型（此为第2次免疫）,并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光（IF）双标法检测CIA小鼠关节中CD4⁺T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17（IL-17）和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3（FoxP3）在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果 与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重（P<0.01）;小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高（P<0.01）,Treg细胞表达比例显著减少（P<0.01）;与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低（P<0.01）,Treg细胞的表达比例显著增加（P<0.01）。结论 EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。     

藏药细叶亚菊的质量标准研究＊

目的 建立细叶亚菊的质量标准，为其质量控制和合理开发利用提供科学参考。方法 采用性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法（TLC）对细叶亚菊进行定性分析；参照《中国药典》（2020年版）通则方法对细叶亚菊水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物进行含量检查；利用高效液相色谱法（HPLC）测定细叶亚菊中绿原酸、异绿原酸A的含量。结果 确定了细叶亚菊的药材性状及显微特征。TLC鉴别显示，供试品（细叶亚菊药材）与对照品（绿原酸、异绿原酸A）在相应位置上均显示相同颜色的荧光斑点。13批细叶亚菊水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量分别为8.55%-13.07%、6.81%-12.68%、1.11%-3.53%、8.41%-11.64%；绿原酸、异绿原酸A的含量范围分别为0.072%-0.440%、0.283%-1.324%（n=3）。结论 本研究建立的方法准确稳定，可为细叶亚菊的质量控制提供参考。暂规定细叶亚菊水分不得过12.0%，总灰分不得过10.0%，酸不溶性灰分不得过2.5%，水溶性浸出物不得少于8.0%，绿原酸不得少于0.2%，异绿原酸A不得少于0.6%。     

LC-MS/MS同时测定左金丸和香连丸中6种生物碱的含量

目的:建立左金丸(黄连、吴茱萸)和香连丸(黄连(吴茱萸制)、木香)中6种生物碱含量的LC-MS/MS测定方法。方法:色谱条件:Phenomenex Luna C18柱(5μm,250 mm×4.60 mm);乙腈-水(4 mmol/L乙酸铵和0.08%甲酸)为流动相,梯度洗脱;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测,MRM模式。结果:左金丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的平均回收率分别为101.0%,101.3%、101.2%、100.2%、99.6%、99.7%,RSD分别为1.1%、1.8%、0.98%、1.0%、1.3%、1.3%,香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱和吴茱萸碱的平均回收率分别为101.6%、99.8%、101.9%、101.0%、101.3%,RSD分别为1.0%、1.9%、0.75%、1.1%、1.9%。结论:本方法可同时测定左金丸和香连丸中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,具有快速、简便等特点。