基于指纹图谱分析和多成分同时定量的龙血通络胶囊质量评价研究

目的建立龙血通络胶囊指纹图谱,并进行多成分定量分析,为评价龙血通络胶囊提供依据。方法采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长为280、325 nm。测定10批次龙血通络胶囊,建立指纹图谱,同时采用Q-TOF/MS对指纹图谱中共有峰进行指认及对部分特征峰进行定量分析。结果得到分离度、重复性均较好的龙血通络胶囊指纹图谱,标示出18个共有峰,相似度在0.92以上;采用LC-Q-TOF/MS方法指认了16个共有峰,其中7个共有峰经对照品比对,分别为白藜芦醇、7,4′-二羟基黄酮、龙血素A、龙血素B、紫檀茋、2,6-二甲氧基-4,4′-二羟基二氢查耳酮和2-甲氧基-4,4′-二羟基二氢查耳酮,并对这7个成分进行了定量分析,平均回收率在98.47%~101.93%(RSD均小于2.27%)。结论同时对龙血通络胶囊指纹图谱和7个指标成分进行分析,方法快速、简便、准确,可作为全面评价该制剂质量的有效方法之一。     

定量CT测量T12骨密度替代病变腰椎用于骨质疏松诊断的可行性

目的 探讨在低剂量CT肺癌筛查联合定量CT骨密度检查中,以测量T12椎体骨密度替代病变的L1或L2用于骨质疏松诊断的可行性。方法 选取1 298名接受低剂量CT肺癌筛查联合定量CT骨密度检查的健康体检者,测量其T12、L1、L2椎体骨密度,并计算校准的T12骨密度,记为T12^*。以L1+L2为诊断标准,分别分析各椎体组合T12+L1、T12+L2、T12^*+L1、T12^*+L2与L1+L2评估骨量的一致性和诊断骨质疏松的差异性。结果 各椎体组合与L1+L2评估骨量的一致性均较好（Kappa均>0.75,P均<0.05）。各椎体组合诊断骨质疏松的特异度均>98%。T12+L1、T12+L2诊断骨质疏松的敏感度分别为73.33%（143/195）及77.95%（152/195）;而T12^*+L1、T12^*+L2诊断骨质疏松的敏感度分别为83.08%（162/195）及90.26%（176/195）。结论 定量CT测量T12骨密度替代病变L1或L2,可能降低诊断骨质疏松的敏感度,应对其进行校准。     

OSAS与冠状动脉病变关系的临床研究

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)与冠状动脉病变关系,以及对其干预在冠心病预防与治疗中的作用。方法对合并鼾症的临床拟诊冠心病患者行冠状动脉造影术,剔除原发性心肌病和先天性血管发育不良后的150例患者,分析他们的OSAS的构成比。入选者分为OSAS组56例和非OSAS组94例,比较两组间的冠状动脉扩张、冠状动脉血流减慢、ACS、冠状动脉病变、多支病变、严重病变、完全闭塞病变、弥漫性长病变、分叉病变、开口病变的发生情况。结果OSAS构成占37.3%。OSAS组患者冠状动脉扩张、冠状动脉血流减慢、ACS、冠状动脉病变、多支病变、严重病变、完全闭塞病变、弥漫性长病变、分叉病变、开口病变的发生情况高于非OSAS组。结论OSAS患者的冠状动脉复杂病变发生率高,提高对OSAS的认知和干预是对冠心病预防与治疗的重要途径。     

尖锐湿疣患者皮肤损伤中Src同源序列酪氨酸磷酸酶的表达

目的 探讨尖锐湿疣(CA)患者皮肤损伤中Src同源序列酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)和Src同源序列酪氨酸磷酸酶-2(SHP-2)的不同表达及意义.方法 应用原位杂交技术诊断人类乳头瘤病毒(HPV)6/11相关CA,采用SP免疫组织化学染色技术检测40例HPV6/11阳性CA患者皮肤损伤、20例健康对照皮肤(包皮)中SHP-1和SHP-2的表达及分布.计数资料采用X2检验.结果 CA患者皮肤损伤中SHP-1和SHP-2表达阳性细胞主要位于棘细胞层,棕黄着色,阳性反应定位胞质;而健康对照包皮少数阳性着色主要定位于基底层细胞的胞质,呈浅黄着色.CA患者皮肤损伤和健康对照中SHP-1阳性率分别为80%和35%(X2=11.87,P<0.01);SHP-2表达阳性率分别为85%和30%(X2=18.15,P<0.01).CA患者中SHP-1和SHP-2的表达差异无统计学意义(rs=1.0,P>0.05).结论 CA中SHP-1和SHP-2在HPV6/11感染角质形成细胞过度增殖中起调控作用.     

广西白裤瑶族人群高血压患病率调查

目的 了解广西白裤瑶族人群高血压的患病情况及其影响因素. 方法 采用分层随机整群抽样方法对1170名≥15岁白裤瑶族人群的血压、身高、体重、体质指数、腰围、血脂及载脂蛋白进行测定,并将其结果与1173名当地的汉族人群作比较. 结果 广西白裤瑶族人群标准化高血压患病率明显低于当地的汉族人群(11.53%比16.79%,P＜0.01);白裤瑶族人群平均收缩压、舒张压和脉压水平也明显低于汉族人群[分别为(115.7±16.3)mm Hg比(120.0±16.3)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),P＜0.01;(74.1±9.4)mm Hg比(75.9±10.4)mm Hg,P＜0.01和(41.6±12.0)mmHg比(44.2±11.2)mm Hg,P＜0.01].白裤瑶族人群高血压患病与性别、年龄、体力活动、体质指数、腰围、总能量、总脂肪和钠盐摄人量呈正相关,与教育水平呈负相关,而汉族人群高血压患病与性别、年龄、体力活动、喝酒、体质指数、腰围、总能量、总脂肪和钠盐摄入量呈正相关,与教育水平呈负相关.白裤瑶族和汉族人群高血压的知晓率为11.81%比21.76%(P＜0.05),治疗率为5.51%比12.95%(P＜0.05),控制率为2.36%比8.29%(P＜0.05). 结论 广西白裤瑶族人群高血压患病率显著低于汉族人群,可能与其特殊的饮食习惯、低盐摄入、生活方式以及遗传因素等有关.     

载体法筛选乙型肝炎病毒S基因小干扰RNA靶位体系的建立

目的 构建4个针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因序列的小发央RNA(shRNA)表达载体，作用于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBV S基因融合表达载体，观察shRNA对融合蛋白的抑制作用，筛选出有效靶位。方法 利用pAVU6 27质粒，设计并掏建4个shRNA表达载体，与融合表达载体共转染AD293细胞，荧光显做镜下观察融合蛋白的荧光表达情况并通过流式细胞仪分析shRNA对融合蛋白的抑制作用。同时，逆转录聚合酶链反应法验证其筛选的有效性。结果 成功掏建shRNA表达载体和HBs-EGFP融合表达载体；4组shRNA表达载体均可不同程度抑制融合基因的表达，其中以579位点最有效，荧光表达抑制率为69．8％，RNA水平抑制率为74．6％。结论 筛选出有效抑制HBV S基因的siRNA靶位。     

应用噬菌体十二肽库筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位

目的　从噬菌体 12肽库中筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。　方法　将卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白 (Ig )作为靶分子筛选噬菌体随机 12肽库。经过 5轮淘筛 ,随机挑取 2 4个蓝色噬菌斑进行扩增 ,以ELISA检测其免疫活性并分析其诊断并殖吸虫病的价值。　结果　 2 4个克隆中有 12个可以被卫氏并殖吸虫病患者血清Ig所识别 ,其中有 2个克隆 (P5、P6)具有较好的特异性和敏感性 ,可能为特异性的卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。　结论　应用噬菌体肽库筛选可以获得卫氏并殖吸虫抗原模拟表位 ,为并殖吸虫病诊断抗原和短肽疫苗的研究提供了新的方法学依据。     

专用肠内营养制剂对急性坏死性胰腺炎大鼠蛋白质代谢的影响

目的 观察专用肠内营养制剂(EN-S)对ANP大鼠蛋白质代谢的调节作用.方法 应用3.8%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备32只ANP模型大鼠,分为对照组、EN-S 组、EN组和PN 组4组,各8只.营养各组于造模后12 h分别给予EN-S、EN和PN制剂.检测各组制模后12 h、24 h、48 h的血淀粉酶,观察胰腺组织的病理改变,以及第7天大鼠体重、血浆氨基酸谱和血清白蛋白含量.结果 制模后第7天,EN-S组大鼠体重、血清白蛋白、血浆天门冬氨酸(Asp)、蛋氨酸(Met)和赖氨酸(Lys)显著高于普通EN组(P＜0.05).EN-S组与PN组的体重、血清白蛋白、氨基酸谱整体构成无显著性差异.结论 EN-S制剂能够改善ANP大鼠的蛋白质代谢,有助于整体情况的改善.     

低分子肝素对老年重症肺炎患者预后的影响

目的探讨低分子肝素抗凝治疗对老年重症肺炎预后的影响。方法选取2018年1月至2019年1月入住北京世纪坛医院呼吸与危重症医学科重症监护病房(RICU)的年龄≥65岁的重症肺炎患者100例,利用随机数字表分为两组,对照组给予常规治疗,试验组在常规治疗基础上加用低分子肝素4000 U皮下注射,每日1次,治疗14 d。分别于治疗前及治疗第3、7、14天比较两组患者急性生理和慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分、血气分析、凝血指标、D二聚体、血常规、C反应蛋白、降钙素原,以及28天死亡率、出血率、深静脉血栓形成率。结果治疗前,两组患者的基本资料和APACHEⅡ评分差异无统计学差异(P>0.05)。治疗第3天,两组患者的APACHEⅡ评分、D二聚体、白细胞、中性粒细胞百分比和C反应蛋白水平无显著差异。治疗第7天、14天,试验组的上述指标显著低于对照组(P<0.05)。血气分析显示,仅在治疗第14天,试验组乳酸水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗期间,两组患者凝血指标和降钙素原差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组的28天平均死亡率为8%,显著低于对照组(24%,P<0.05)。两组患者出血发生率无显著差异(P>0.05)。试验组深静脉血栓形成率显著低于对照组(P<0.05)。结论临床上对老年重症肺炎患者应用低分子肝素辅助治疗,可减少APACHEⅡ评分,降低28天死亡率,减少医院内深静脉血栓的发生。     

钙化血管平滑肌细胞肾上腺髓质素及其受体系统的基因表达上调

探讨钙化的血管平滑肌细胞肾上腺髓质素生成和肾上腺髓质素受体系统一降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白基因表达的改变及其病理意义。采用β-甘油磷酸盐诱导培养的大鼠血管平滑肌细胞钙化;放射免疫法测定血管平滑肌细胞分泌的肾上腺髓质素含量;半定量逆转录聚合酶链反应测定细胞肾上腺髓质素、降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白的mRNA水平;原子吸收分光光度计测定细胞钙含量;碱性磷酸酶试剂盒测定血管平滑肌细胞碱性磷酸酶活性;β液体闪烁计数仪测定45Ca2+放射活性。结果发现,与非钙化血管平滑肌细胞比较,钙化血管平滑肌细胞内钙含量、45Ca2+摄入及碱性磷酸酶活性分别增加118％、174％和7倍(P<0.01);钙化细胞肾上腺髓质素分泌量增高99％(P<0.01),肾上腺髓质素、降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和3的mRNA水平分别增加78％、93.7％、91.8％和109.5％(P均<0.01)。肾上腺髓质素与降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和3的mRNA水平呈正相关,其相关系数分别为0.83、0.92和0.93(P均<0.01)。结果提示,血管平滑肌细胞肾上腺髓质素 旁/自分泌功能改变可能参与血管钙化的调节过程。