RNAi沉默MCM7基因对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤影响研究

目的探讨微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenanceprotein7,MCM7)基因RNAi(RNA interference)的重组慢病毒载体,对人肝癌细胞SMMC-7721 MCM7基因表达和裸鼠移植瘤生长的影响。方法构建重组逆转录慢病毒载体MCM7-shRNA,以MCM7基因沉默重组慢病毒颗粒(LV-shRNA-MCM7)感染SMMC-7721细胞,作为实验组;以对照慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染SMMC-7721细胞,作为阴性对照组;空白对照组常规培养,不做任何处理。通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。3组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立人肝癌裸鼠移植瘤模型。观察裸鼠成瘤情况、移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线;4周后测定肿瘤体积和质量,并用RT-PCR、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测移植瘤中MCM7的表达情况。结果 MCM7-shRNA慢病毒载体构建成功。裸鼠接种癌细胞后第6天均有肿瘤形成,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢,实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均体积分别为(27.72±7.80)、(81.86±10.91)和(79.75±16.61)mm3,差异有统计学意义,F=61.949,P<0.05;实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均质量分别为(0.19±0.06)、(0.501±0.14)和(0.509±0.18)g,差异有统计学意义,F=18.41,P<0.05。实验组MCM7mRNA的相对表达量为0.253±0.198,阴性对照组1.213±0.548,空白对照组1.201±0.744,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=4.091,P<0.05;实验组MCM7蛋白相对表达量为0.207±0.015,阴性对照组1.116±0.062,空白对照组1.088±0.040,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=292.778,P<0.05。MCM7蛋白在阴性对照组和空白对照组中阳性表达率均为100%(10/10),在实验组中为30%(3/10),实验组明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义,χ2=18.261,P<0.001。结论慢病毒沉默SMMC-7721细胞MCM7基因表达能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,MCM7基因可能成为肝癌基因治疗的有效靶点。     

抗癌活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期的调控

目的:探讨抗癌活性肽(anti-cancer bioactive peptide,ACBP)对人胃癌细胞BGC-823细胞周期的影响及其作用机制。方法:体外培养BGC-823细胞,将不同浓度的ACBP作用于细胞,MTT法测定不同浓度的ACBP对BGC-823细胞的生长抑制率;HE染色观察形态学变化;半定量RT-PCR检测细胞周期负性调控分子p27基因mRNA表达的变化。结果:不同浓度(10.0～25.0mg/L)ACBP均能抑制BGC-823细胞的生长,细胞出现明显的凋亡特征性改变,且具有浓度和时间依赖性,25.0mg/LACBP作用72h抑制率为(84.4±2)%,中效浓度(IC50)为7.86mg/L。RT-PCR发现经ACBP处理后,BGC-823细胞的p27mRNA表达明显增加。结论:ACBP对BGC-823细胞的生长有明显的抑制作用,并可诱导细胞凋亡,其抑癌机制可能与其调控细胞周期有关,使p27mRNA重获表达,从而发挥抗BGC-823细胞增殖的作用。     

p27kip1蛋白表达与胃癌的关系

[目的]探讨p27kip1蛋白表达与胃癌的关系。[方法]用免疫组化SP法检测69例胃癌中p27kip1蛋白表达。[结果]p27kip1蛋白表达率在胃癌中为46.38%(32/69),而正常胃组织中为96.43%(27/28),差异有显著性(P<0.01)。p27kip1蛋白阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、部位无关(P>0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴转移及临床分期有关(P<0.05)。[结论]p27kip1蛋白缺失与胃癌的发生发展有关,其蛋白检测可为胃癌的临床诊断及预后判断提供参考。     

硝普钠控制性降压用于脊柱手术的临床研究

目的:探讨硝普钠控制性降压在脊柱手术中的临床应用。方法:72例拟在全麻下行脊柱手术患者随机分成两组:观察组(硝普钠组,n=36)与对照组(n=36)。所有患者均静脉注射咪唑安定0.1mg.kg-1、丙泊酚2mg.kg-1、芬太尼2μg.kg-1和采用预注给药的阿曲库铵进行气管内插管,以异氟醚或氨氟醚、阿曲库铵和芬太尼维持麻醉。观察组在手术进入椎体前3～5min由输液泵输入0.01%硝普钠,控制速度使收缩压维持于60～80mmHg的范围。记录两组出血量、输血量、输液量、手术时间,术后1h血红蛋白与术前血红蛋白等。结果:两组患者基本情况、手术类型、晶体液、胶体液输入量无统计学差异;观察组术中失血量和输血量均明显少于对照组,且手术时间明显缩短;两组术后1h血红蛋白与术前比较均有所下降,但差异无显著性。结论:脊柱手术中采用硝普钠控制性降压效果安全、可靠,可明显减少术中出血量及输血量,缩短手术时间。     

基于PACS的病例导入式教学在影像学见习教学中的应用

目的评价基于影像归档和通信系统（picture archiving and communication system,PACS）的病例导入式教学在影像学见习教学中的效果。方法选取中南大学湘雅医学院2009级五年制临床医学专业学生148人为研究对象,分成10组,随机抽取组号分为实验组（n=73）和对照组（n=75）。对照组采用传统教学方法（应用胶片教学）;实验组利用PACS资源,采用病例导入式教学,分为3个步骤。实验组和对照组采用调查表和测验成绩评价教学效果。采用χ^2检验比较2组学生的理论成绩,检验水准α=0．05。结果与对照组比较,更多的实验组学生认为,基于PACS资源的病例导入式教学可以达到教学目的,提高学习兴趣,加强了对知识的掌握。测试成绩显示：实验组测试成绩90～100分及80-89分的学生百分比（14％、75％）明显高于对照组（5％、66％）（χ^2=17．932,P= 0．000）。结论基于PACS的病例导入式教学提高了学生的学习主动性及临床能力,也让教师及时补漏订讹,使影像学见习教学收到更大的实效,值得推广。     

上海市真如镇居民肿瘤KAP调查分析

目的:了解上海市真如镇居民关于肿瘤的知识、态度和行为(knowledge,attitudesand practices,KAP),为进一步开展社区肿瘤防治工作提供参考。方法:采用整群抽样方法,以真如镇2个居委30~70岁的常住居民为对象,由经过专业培训的医生,使用统一调查问卷进行入户调查。组间率的比较采用χ2检验。结果:本次研究共调查2695人,有效问卷2610份。男女比例为1∶1·06,平均年龄(53·04±8·70)岁。恶性肿瘤家族史阳性率为22·18%;吸烟率为26·62%;饮酒率为10·34%。居民的KAP水平与年龄、学历、肿瘤家族史和性别相关,差异具有统计学意义,χ2=24·91,P≤0·001。结论:在社区肿瘤防治过程中,针对不同KAP水平的人群有必要采用不同的方法,从而有效地普及防癌抗癌知识,降低癌症的发病率与死亡率,提高居民的生命质量。充分利用社区大众传媒,并争取各部门的协作也是非常重要的。此外,本调查结果显示恶性肿瘤家族史阳性率高达22·18%,可见恶性肿瘤已经和正在对社区居民健康与生命构成重大威胁,必须引起各级医务人员和全社会的高度关注。     

122株鲍曼不动杆菌的感染分布及耐药性分析

目的对鲍曼不动杆菌在医院感染的分布情况及耐药性进行分析,为临床合理使用抗生素提供参考。方法回顾性分析2007年鲍曼不动杆菌在各病区及标本中的分布,用纸片琼脂扩散法检测抗生素耐药性,并根据美国临床实验室标准化委员会的相关文件进行结果判断。结果122株鲍曼不动杆菌中,痰液分布率最高,为85．25％（104／122）,病室中呼吸内科检出率最高,为29．51％（36／122）。耐药率最高的抗生素是头孢西丁、头孢噻肟,分别为85．71％和72．73％。结论鲍曼不动杆菌已经成为呼吸道感染的重要病原菌,尤其是使用机械通气的患者应加强对鲍曼不动杆菌耐药性的连续监测,以便指导临床合理使用抗生素。     

宜昌夷陵地区儿童肥胖合并哮喘调查及影响因素

目的 探究宜昌市夷陵地区儿童肥胖合并哮喘患儿调查及影响因素.方法 采用分层随机整群抽样方法选取2018-2019年夷陵地区肥胖合并哮喘患儿379例,同期210例体检健康儿童作为对照组.通过问卷调查方式获取患儿一般资料,并进行单因素及多因素logistic分析.结果 肥胖伴哮喘患儿男性、居住在城市、存在哮喘家族史、二手烟...     

风热清口服液对免疫低下小鼠免疫调节作用的研究

目的:探究风热清口服液对免疫低下小鼠免疫调节的作用。方法:通过给小鼠腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺50 mg/kg,1次/d,连续3 d,建立免疫功能低下的动物模型。应用碳廓清实验、溶血素生成实验和迟发型变态反应,评价风热清口服液对免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫的调节作用。结果:风热清口服液低、中剂量组可不同程度提高环磷酰胺致免疫低下小鼠的廓清指数K值(P<0.05)和吞噬指数α值(P<0.05)。风热清口服液低、中、高剂量组可不同程度提高免疫低下小鼠血清溶血素水平(P<0.05)。风热清口服液低、中剂量组可不同程度促进免疫低下小鼠迟发型变态反应(P<0.05)。风热清口服液低剂量组可提高免疫低下小鼠脾脏中CD4+细胞数(P<0.01),并使CD4+/CD8+细胞比值上升(P<0.001),同时抑制免疫低下小鼠脾脏中CD8+细胞数(P<0.05);风热清口服液中、高剂量组可提高免疫低下小鼠脾脏中CD4+/CD8+细胞比值(P<0.01),同时抑制免疫低下小鼠脾脏中CD8+细胞数(P<0.05)。风热清口服液低、中剂量组可显著提高免疫低下小鼠脾指数(P<0.001),风热清口服液低、中、高剂量组均可提高免疫低下小鼠胸腺指数(P<0.05或P<0.01)。结论:风热清口服液通过提高免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫,进而增强免疫低下小鼠的免疫功能。