腹腔镜脾切除术的经验总结

目的:探讨腹腔镜脾脏切除术的手术技巧和临床效果。方法:回顾分析我院2001年7月至2007年1月问33例腹腔镜脾脏切除术的手术时间、术中失血量、术后并发症等。结果:33例病人中有2例因为睥脏明显肿大,直接行腹腔镜下手助脾脏切除;1例因术中脾静脉出血转手助操作完成手术:余30例行完全腹腔镜下脾脏切除术;无中转开腹术。手术平均时间为(86．54±30．43)min(50～200 min),术中平均失血量为(110±171．24)ml(25～800 ml)。术后拔除引流管的平均天数为4．73(2～21)d。术后平均住院天数为8．76(4～55)d。无死亡病例。手术后有1例并发少量胰漏,引流3周后愈合。结论:腹腔镜脾脏切除术安全可行,必要时可以手助下完成手术。     

单甲氧聚乙二醇化学修饰药物酶的研究进展

用单甲氧基聚乙二醉(1)化学修饰药物酶是生化药物研究开发的重要手段之一。本文综述了1化学修饰药物酶的一般方法及修饰后酶在生物和理化性质方面的变化，同时对1研究前景进行展望，并指出了尚待解决的问题。     

乳腺癌患者血中角蛋白mRNA基因的表达

目的 分析乳腺癌患者外周血液中角蛋白（CK19）mRNA基因的表达。方法 取20例经病理证实的乳腺癌患者外周血，用Tirizol法提取总RNA，然后进行RT－PCR荧光定量检测，并与正常人群进行对照。结果 正常人群外周血中无CK19表达，20例乳腺癌中有6例阳性表达，总阳性率为29．65％，其中单纯癌阳性率为30．7％（4／13），浸润性导管癌阳性率为28．6％（2／7）。结论 CK19可作为检测外周血循环癌细胞的标志物。     

莪术油治疗毛细支气管炎60例疗效观察

目的　评价莪术油治疗毛细支气管炎的疗效。方法　毛细支气管炎患儿 110例 ,随机分为治疗组 6 0例和对照组 5 0例 ,6d为 1疗程 ,比较两组治愈率 ,临床指标对比观察 (咳喘 ,肺部罗音消失时间 ,住院时间 )。结果　总治愈率治疗组 96 .7% ,对照组 80 % ,两组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　莪术油治疗毛细支气管炎疗效满意。     

即时二次隆乳术的探讨

目的:探索处理隆乳术后并发症同时行二次隆乳术适应证,选择适合手术切口,放置适当组织间隙。方法:36例隆乳并发症患者(其中硅胶假体隆乳13例,聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳23例)行即时二次隆乳,采用乳房下皱襞切口或乳晕切口,隆乳材料均选用硅胶假体。结果:该方法具有安全、易操作、痛苦小,出血少的优点,经随访3个月至3年取得满意效果。结论:严格掌握手术适应证,聚丙烯酰胺水凝胶(PAHG)尽可能洗净,选择硅胶假体置入胸大肌下间隙,是即时二次手术隆乳术的最佳方法。     

北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平调查

目的了解北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平,为控制先天性风疹综合征(CRS)提供科学依据。方法2006年6~8月随机抽取北京和重庆市各1个区作为调查点,对20~39岁育龄期妇女623人(北京市311人,重庆市312人)进行血清流行病学调查。结果北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体阳性率分别为85.21%和78.53%,自然感染获得抗体阳性率分别为85.08%和77.89%;风疹抗体分布与年龄、地区有关,随着年龄的增长抗体阳性率和几何平均浓度有下降的趋势。结论制定科学的风疹疫苗使用策略和免疫程序,提高育龄期妇女的免疫力,是减少CRS发病的有效手段。     

玄胡索散通过下调粒细胞集落刺激因子抑制脾脏髓源抑制细胞分化发挥抗乳腺癌作用

目的:探讨玄胡索散抑制乳腺癌小鼠脾脏髓源抑制细胞(MDSC)分化的作用机制。方法:4～5周龄BALB/c雌性小鼠48只,其中6只为正常对照组,其他42只采用小鼠左侧第二对乳腺皮下脂肪垫接种4T1细胞构建乳腺癌荷瘤小鼠模型,分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对照组、G-CSF敲减组、模型对照组、玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组和环磷酰胺组,每组6只。其中G-CSF对照组和G-CSF敲减组分别采用shRNA慢病毒转染联合嘌呤霉素构建相应4T1稳转细胞模型。各组造模48 h后,玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组分别按2、4、8 g·kg^-1·d^-1玄胡索散灌胃,每天一次;环磷酰胺组按30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺,隔天一次;其他组给予等体积0.5%羟甲基纤维素纳。各组连续给药25 d。苏木精-伊红染色观察脾脏组织病理学改变,流式细胞术测定脾脏MDSC亚群比例,免疫荧光法检测脾脏CD11b、Ly6G共表达,酶联免疫吸附测定外周血G-CSF浓度。在体外,建立荷瘤小鼠脾脏与4T1稳转株共培养体系,玄胡索散(30μ...     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定

目的　在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法　利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果　PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论　成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达 ,其表达产物具有良好的特异性及活性     

三种蚊唾腺蛋白IgE亲和成分的初步分析

从我国分布较广的三种蚊中华按蚊、淡色库蚊和白纹伊蚊中分离出唾液腺 ,制成唾腺蛋白粗提物 ,再应用ELISA、竞争抑制ELISA和免疫印迹试验分析其与IgE结合的组分。结果显示三种蚊唾腺蛋白含能与IgE结合的成分 ,以白纹伊蚊反应所呈现的A值最高 ;免疫印迹在三种蚊均显示 4条阳性带 ,中华按蚊和淡色库蚊相似 ,白纹伊蚊有 3条带差异 ,但其相对分子质量为 30 0 0 0～ 310 0 0组分阳性条带均出现于三种蚊唾腺蛋白