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91.
RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究 总被引:4,自引:4,他引:0
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE.1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干涉效果。结果:重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠定了基础。 相似文献
92.
积极开展客户管理 努力提高健康体检客户满意度 总被引:8,自引:0,他引:8
健康体检有利润高、风险小的特征,具有非常好的市场前景。广州新海医院积极进行市场营销,开展客户管理,正确区分客户类型,建立客户资料数据库,合理确定客户组合,整合医院人力资源、业务流程及专业技术,对不同需求和消费层次的客户,采取不同的服务和管理策略,提供个性化、人性化的优质服务,主动搜集客户意见,认真处理客户投诉,不断改进医院健康体检工作方法,完善客户管理工作机制,使客户满意度不断提高,产生了良好的经营业绩,提高了医院的市场竞争力和品牌形象。 相似文献
93.
脂肪抽吸术对胰岛素敏感性及脂质代谢的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
目的了解脂肪抽吸术对胰岛素抵抗与脂质代谢的影响,并探讨其临床意义。方法对20例接受腹部脂肪抽吸术者术前及术后2个月的血清三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,胰岛素敏感性进行测量并进行比较。结果术后与脂肪抽吸术前比较,术后胰岛素敏感性增强(P〈0.01),血清总胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇水平下降。结论腹部脂肪抽吸术在去除大量皮下脂肪的同时,对胰岛素抵抗、脂质代谢等心脑血管危险因素也有非常有益的影响。 相似文献
94.
BACKGROUND: As a non-invasive technique which can provide comprehensive biological information, 1H-magnetic resonance spectroscopy (1H-MRS) may provide valuable reference data for irreversible recovery or reversible changes in ischemic tissue after stroke.
OBJECTIVE: To monitor and evaluate the effect of the urokinase thrombolytic therapy after experimental acute cerebral ischemia by 1H-MRS technology and investigate its adaptability.
DESIGN: Randomly controlled animal study.
SETTINGS: Shenzhen Hospital of Peking University and National Key Laboratory of Pattern and Atom & Molecular Physics, Wuhan Physics and Mathematics Institute, Chinese Academy of Science.
MATERIALS: Eleven healthy adult Sprague-Dawley (SD) rats, weighing 260–300 g and of both genders, were supplied by Experimental Animal Center of Tongji Medical Collage, Huazhong University of Science and Technology [SCXK (e) 2004-007]. 4.7T superconducting nuclear magnetic resonance meter was provided by Brucker Company.
METHODS: The experiment was carried out in Shenzhen Hospital of Peking University and National Key Laboratory of Pattern and Atom & Molecular Physics, Wuhan Physics and Mathematics Institute, Chinese Academy of Science from August 2003 to December 2005. ① The rats were randomly divided into 30-minute self-thrombo-embolism group (n =6) and 60-minute self-thrombo-embolism group (n =5). Six rats in 30-minute self-thrombo-embolism group were occluded with clot embolus for 30 minutes and 5 rats in 60-minute self-thrombo-embolism group were occluded for 60 minutes. 10 000 U/kg urokinase was dissolved in 2 mL saline and the operation lasted for 5 minutes. ② 1H-MRS was performed before thrombolysis and at 3 hours and 24 hours after successful embolization. The metabolic changes of N-acetyl-L-aspartic acid (NAA)/phosphocreatine (PCr) + creatine (Cr), choline phosphate (Cho)/PCr+Cr and lactic acid (Lac)/PCr+Cr in the region of interests were analyzed. ③ The T2W image was conducted 24 hours after the thrombolytic therapy with TR=500 ms and TE=25 ms. ④ The subjects were sacrificed immediately after 1H-MRS and the brain tissues were cut into pieces and stained with HE method; in addition, pathological changes were observed under optic microscope.
MAIN OUTCOME MEASURES: ① Metabolic changes of NAA/PCr+Cr, Cho/PCr+Cr and Lac/PCr+Cr in the region of interests; ② T2W image at 24 hours after the thrombolysis; ③ pathological observation of brain tissue.
RESULTS: Eleven rats were all involved in the final analysis. ① Metabolic changes in the region of interests : In 30-minute self-thrombo-embolism group, the Lac peak emerged immediately after the embolism, but the ischemic zone decreased 3 hours after the thrombolytic therapy (0.252±0.01, 0.603±0.01, P < 0.01). Lac/(PCr+Cr) ratio was 0.290±0.01 at 24 hours after thrombolysis, which was higher than that at 3 hours after thrombolysis (P < 0.01). The NAA/ (PCr+Cr) ratio decreased significantly at 3 hours after the thrombolysis as compared with that before thrombolysis (0.922±0.16, 1.196±0.01, P < 0.05). In 60-minute self-thrombo-embolism group, the Lac/(PCr+Cr) ratio was higher at 3 hours after thrombolysis than that before thrombolysis (0.846±0.12, 0.601±0.11, P < 0.05) and the NAA/(PCr+Cr) decreased at 3 hours after the embolism. Fluctuation of NAA/ (PCr+Cr) ranged from 0.68 to 0.75 before thrombolysis and from 0.71 to 0.75 at 3 hours after thrombolysis. ② T2W image: T2W image showed that 2 subjects in 30-minute self-thrombo-embolism group whose Lac/NAA was higher than 0.7 suffered from intracranial hemorrhage. This meant that the subjects with Lac/NAA > 0.7 were more likely to suffer from intracranial hemorrhage. ③ Histological and morphological examinations: Optic microscope demonstrated that interspace surrounding nerve cells was widened at ischemic center; neurons were swelling; nucleus was stained lightly; pyknosis and mesenchymal edema were mainly observed in lateral cortex of brow and vertex and in lateral part of corpus striatum.
CONCLUSION: ①Compound parameters in ischemic area before thrombolysis should be regarded as an important predicting marker for thrombolytic therapy, effect evaluation and termination. ② 1H-MRS combining with other imaging technique is a detecting way for screening cases who are suitable for thrombolytic therapy. 相似文献
95.
目的:探讨甲壳素作为骨骼肌组织工程支架材料的可行性。
方法:实验于2002-06/12在南方医科大学应用解剖学研究所完成。大鼠成肌细胞株L6与甲壳素医用缝合线体外复合培养。倒置相差显微镜下观察细胞的形态和排列情况。并分别在体外复合培养的第1,2,3,4,5,6天,取出细胞支架复合体,扫描电镜观察成肌细胞的形态和排列情况。
结果:①扫描电子显微镜观察显示,甲壳素医用可吸收缝线的表面比较粗糙。②倒置相差显微镜下可见大鼠L6细胞与甲壳素制备的医用可吸收缝合线间黏附良好,细胞沿缝线排列呈现串珠样,并可以见到细胞聚集现象。③扫描电子显微镜观察,接种24h后,细胞主要为圆球形,随后细胞迁移、伸展、并见突起;第3天,成肌细胞主要为梭形,并见融合趋势;4d后,细胞沿材料纵轴排列并相互融合,并见肌小管样结构形成及细胞外基质分泌。
结论:甲壳素具有作为支架以构建组织工程化骨骼肌的潜能,支架的平行排列有助于工程化骨骼肌纤维良好方向性的形成。 相似文献
96.
547例垂体腺瘤延迟诊断原因及影像诊断分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:提高垂体腺瘤特别是微腺瘤早期影像诊断率。方法:通过对所搜集病史资料完整,经医学影像学确诊和手术病理证实的547例垂体腺瘤(内有251例微腺瘤)延迟诊断原因的分析,找到影响垂体腺瘤早期诊断的因素。结果:296例垂体大腺瘤蝶鞍X线平片、CT、MR常规检查即可诊断。CT骨窗蝶鞍片有助于垂体微腺瘤的诊断,251例微腺瘤经高分辨力CT薄层冠状强化扫描和高场强MR薄层强化扫描得以明确诊断。结论:熟悉垂体腺瘤的首发症状,及时行CT、MR常规扫描可明确大腺瘤的诊断,CT骨窗片可发现垂体微腺瘤的佐证。高场强MR薄层强化扫描是目前诊断垂体微腺瘤的最佳方法,高分辨力CT冠状薄层强化扫描次之,结合神经内分泌学检查是提高垂体腺瘤影像学早期诊断率的主要措施。 相似文献
97.
目的 探讨腮腺手术中耳大神经后支保留的可行性、方法及临床价值。方法 我们对48例腮腺肿瘤患者,按常规隐蔽切口腮腺手术方法进行治疗,保留或不保留耳大神经后支。分别于术后10d及1、6、12个月进行随访,检测耳廓上部、耳垂、耳下区、耳前区和耳后区的触觉、痛觉,并观察其感觉变化情况。结果 48例中35例耳大神经后支保留,耳廓上部及耳后区感觉无减退。术后早期耳前、耳垂及耳下区感觉有不同程度的减退,以耳前区最明显,随着时间延长症状逐步好转,6个月时感觉接近正常。另13例耳大神经切断患者感觉减退症状更加明显,恢复时间延长。结论 腮腺手术中耳大神经后支保留是可行的,所采用的方法可靠,可减轻局部麻木感,提高患者术后早期生活质量,降低神经切断后产生局部永久性麻木的可能性。 相似文献
98.
后腹腔镜联合经尿道电切镜治疗上尿路移行细胞癌(附83例报告) 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 探讨后腹腔镜联合经尿道电切镜治疗上尿路移行细胞癌的效果和安全性. 方法 2003年3月~2006年7月,我院采用后腹腔镜联合经尿道电切镜治疗83例上尿路移行细胞癌.经尿道袖状电切患侧输尿管口周围1.5 cm范围膀胱壁达膀胱外脂肪组织,采用后腹腔镜切除肾及全长输尿管.术后留置导尿管7 d.11例术后辅助放疗. 结果 83例手术均成功.手术时间115~205 min,平均156 min.术中出血50~150 ml,平均80 ml.无术中并发症.术后住院7~11 d,平均8.5 d.病理报告:82例上尿路移行细胞癌,1例肾盂上皮中~重度不典型增生.术后随访3~38个月,平均10.8月.术后12个月内行膀胱镜检查发现膀胱肿瘤6例,其中5例行经尿道膀胱肿瘤电切,1例行腹腔镜根治性膀胱全切术、左侧输尿管皮肤造口术.2例肾盂肿瘤(pT3 G3和pT2 G3)于术后3个月肝转移.2例输尿管中段肿瘤(pT3 G3和pT3 G2~3)术后6个月原位复发并肺转移.1例输尿管下段肿瘤(pT3 G3)术后6个月骨转移.失访1例.其余71例均未发现肿瘤复发、切口转移及远处转移. 结论 对于上尿路移行细胞癌,采用后腹腔镜联合经尿道电切镜行肾、输尿管全切及膀胱袖套状切除具有创伤小、安全、恢复快等优点,值得临床推广应用. 相似文献
99.
目的:检测胰腺癌及癌旁组织中Pin1和周期素D1基因的表达,探讨Pin1在胰腺癌发病中所起的作用。方法:收集27例胰腺肿瘤组织及其相应的肿瘤旁组织标本,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(RQ RT-PCR)检测胰腺良恶性肿瘤及肿瘤旁组织中Pin1和周期素D1 mRNA 的表达,运用Fisher精确概率分析两者之间的相关性及其与肿瘤临床分期和病理特征的关系。结果:7例胰腺囊腺瘤中周期素D1和Pin1的表达与肿瘤旁组织之间无显著性差异;而20例胰腺癌中周期素D1和Pin1的表达明显高于肿瘤旁组织[(2.78±1.02)vs.(4.36±1.27)和(5.48±1.69) vs. (9.97±1.86),P<0.05)]。Pin1和周期素D1与肿瘤的临床分期和病理分化程度无明显的相关(组间差异均为P>0.05),但Pin1与周期素D1的表达有关(P<0.01)。 结论:胰腺癌中Pin1的过表达可促进周期素D1表达,由此诱导了肿瘤的发生;Pin1可能在胰腺癌中起着重要作用。 相似文献
100.
目的 研究兔角膜基质细胞在体外长期培养传代过程中,细胞增殖能力和胞外基质表达水平的改变。方法 取体外培养兔角膜基质细胞,由光镜对各代细胞的形态学变化进行观测。通过对各代细胞生长曲线的绘制,得出其各自的群体倍增时间;MTT法比较各代细胞增殖能力的改变。RT-PCR和Western杂交检测各代细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平的改变;爱茜蓝法检测糖胺聚糖(GAG)的含量。结果 体外培养兔角膜基质细胞随着传代的进程,逐渐显现衰老的形态特征。细胞群体倍增时间由第7代起显著延长(P<0.01);MTT比色法的结果亦显示,第7代细胞的增殖能力开始大幅下降(P<0.01)。第9-11代时,Ⅰ、Ⅲ型胶原在mRNA和蛋白水平的表达都有明显减少(P<0.01),降至第1代细胞的30%左右;GAG的含量也降至40%左右。结论 兔角膜基质细胞经历长期体外培养后,细胞增殖能力和胞外基质表达水平显著下降,逐渐丧失原有的功能。但作为构建组织工程化角膜的种子细胞,在它的生物学特性未发生改变之前,经3次传代培养,获取的细胞量达到组织块消化所得细胞的240倍左右,已足以用于构建之用。 相似文献