核糖核酸的酶消化方法直接顺序分析

应用硷基特异性核酸内切酶进行RNA的顺序分析。以~(32)P标记RNA分子的5′或3′末端的四种硷基能被酶试剂部分裂解。放射性的水解产物经胶电泳按其大小而分离。放射自显影后它的核苷酸顺序从带谱上可以直接读出。核糖核酸酶(RNasc)T_1(G特异性)、U_2(A特异性)、Phy M(U+A特异性)和B.cereus(C+U特异性)是最常用于顺序RNA的四种酶。     

牙根发育不良疾病的研究进展

牙根发育不良疾病是牙齿根部生理性发育出现障碍的疾病。其发病率为1%~10%,乳、恒牙列均可发生,其结果可导致牙根缺如或短根,严重者可造成牙齿过早脱落。国外学者将该疾病统称为短根异常疾病。其发病因素有遗传性疾病、全身性疾病、外源性因素和医源性因素等。     

Synergistic effects of Nell-1 and BMP-2 on the osteogenic differentiation of myoblasts.

Osteogenesis is synergistically enhanced by the combined effect of complimentary factors. This study showed that Nell-1 and BMP-2 synergistically enhanced osteogenic differentiation of myoblasts and phosphorylated the JNK MAPK pathway. The findings are important because of the osteochondral specificity of Nell-1 signaling and the potential therapeutic effects of coordinated BMP-2 and Nell-1 delivery. INTRODUCTION: BMPs play an important role in the migration and proliferation of mesenchymal cells and have a unique ability to alter the differentiation of mesenchymal cells toward chondrogenic and osteogenic lineages. Signaling upstream of Cbfa1/Runx2, BMPs effects are not limited to cells of the osteoblast lineage. Thus, additional osteoblast-specific factors that could synergize with BMP-2 would be advantageous for bone regeneration procedures. NELL-1 (NEL-like molecule-1; NEL [a protein strongly expressed in neural tissue encoding epidermal growth factor like domain]) is a novel growth factor believed to preferentially target cells committed to the osteochondral lineage. MATERIALS AND METHODS: C2C12 myoblasts were transduced with AdLacZ, AdNell-1, AdBMP-2, or AdNell-1+AdBMP-2 overexpression viruses. Effects were studied by cell morphology, alkaline phosphatase activity, osteopontin production, and MAPK signaling. Additionally, in a nude mouse model, viruses were injected into leg muscles, and new bone formation was examined after 2 and 8 wk. RESULTS: C2C12 myoblasts co-transduced with AdNell-1+AdBMP-2 showed a synergistic effect on osteogenic differentiation as detected by alkaline phosphatase activity and osteopontin production. Nell-1 stimulation on AdNell-1 + AdBMP-2 preconditioned C2C12 cells revealed significant activation of the non-BMP-2 associated c-Jun N-terminal kinase (JNK) MAPK signaling pathway, but not the p38 or extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2) MAPK pathways. Importantly Nell-1 alone did not induce osteogenic differentiation of myoblasts. In a nude mouse model, injection of AdNell-1 alone stimulated no bone formation within muscle; however, injection of AdNell-1+AdBMP-2 stimulated a synergistic increase in bone formation compared with AdBMP-2 alone. CONCLUSIONS: These findings are important because of the confirmed osteochondral specificity of Nell-1 signaling and the potential therapeutic effects of enhanced BMP-2 action with coordinated Nell-1 delivery.     

股骨头骨坏死样本空间结构的Micro-CT评估

目的以股骨头骨坏死样本的Micro-CT断层图像为基础，对其进行空间结构评估。方法2003年11月～2005年6月，收集股骨头骨坏死患者行全髋关节置换术时取出的股骨头样本6个，对样本进行Micro-CT断层扫描，获取股骨头骨坏死样本的计算机三维图像，图像空间分辨率为36μm×36μm×36μm。手工选取兴趣区，随后采用骨体积分数（BV／TV）、骨小梁间隙（Tb．Sp）、骨小梁厚度（Tb，Th）、骨小梁数目（Tb．N）、骨表面积体积比（BS／BV）、结构模型指数（SMI）、骨小梁模型因子（Tb．Pf）等三维空间参数分别对股骨头骨坏死标本的正常区域、硬化带和塌陷区进行评价。结果晚期股骨头骨坏死硬化区和塌陷区的骨小梁空间结构明显改变：硬化区Bv／Tv明显增加，Tb．Th明显增厚，Tb，Sp变窄，SMI与正常区域的骨小梁无差别；而塌陷区Bv／Tv明显减少，BS／BV增大，Tb．N和Tb．Pf增加，Tb，Th改变不明显。结论Micro-CT作为一种新的检测手段，能够在不损伤样本的条件下快速获取股骨头骨坏死样本断层图像，具有精度高、检测快、可进行三维重建分析的优点。晚期股骨头骨坏死不同区域的骨三维结构呈现出不同的空间结构特征。     

余甘子功能食品的开发及其类SOD活力测定

余甘子是一种具有较高的食用和药用价值的野生植物资源，风味独特，含有丰富的类SOD活性物质和其他多种具有生物活性的物质，具有清除自由基、抗肿瘤、抗衰老等保健作用。作者提出了余甘予保健口服液的生产工艺流程及配方，并采用改良的Marklund方法测定了类SOD的活力，结果较为满意。     

阻塞性黄疸大鼠肾脏自分泌内皮素的变化及其与肾功能损害的关系

目的　探讨阻塞性黄疸时肾脏自分泌内皮素 (ET)的变化及其与肾功能损害的关系。方法　结扎胆总管(BDL)制备阻塞性黄疸大鼠模型 ,作为实验组 ,对照组鼠仅行假手术。分别于术后 5、1 0及 1 5d ,两组各取 1 0只大鼠检测其肾脏对氨基马尿酸清除率 (CPAH)、菊粉清除率 (CIN)和钠排泄分数 (FENa+) ,并用鲎试剂法测定血浆内毒素 (EX)水平 ,放射免疫法测定肾动、静脉血浆及肾组织中ET 1含量。结果　①实验组术后 5d仅FENa+明显高于对照组 (P<0 .0 1 ) ,术后 1 0d起 ,CPAH、CIN及FENa+呈进行性下降 ,术后 1 5dFENa+已较对照组低 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ;②实验组术后血浆EX水平呈进行性升高 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ;③实验组术后肾动脉血浆ET 1水平呈持续性降低 ,而肾静脉血浆及肾组织中ET 1含量呈持续性升高 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ;④血浆EX水平与肾组织ET 1含量呈正相关 (r =0 .762 4 ,P<0 .0 1 ) ,肾组织ET 1含量与CPAH和CIN呈负相关 (r=- 0 .883 2 ,P<0 .0 1 ;r =- 0 .945 2 ,P<0 .0 1 )、与FENa+呈正相关 (r=0 .873 4 ,P<0 .0 1 )。结论　内毒素血症及其诱导的肾内ET分泌增加在阻塞性黄疸所致大鼠肾损害中可能具有重要作用     

细胞内游离Ca2+在发育中大鼠皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用

目的: 观察细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)在培养的不同发育阶段皮层神经元无镁诱导惊厥性损伤中的作用,探讨惊厥性脑损伤年龄依赖性的可能机制.方法:体外培养6 d、17 d的胚胎大鼠皮层神经元用无镁细胞外液处理3 h,或于无镁处理前用NMDA(N-甲基-D-门冬氨酸)受体拮抗剂或Ca2+通道阻滞剂预处理,用MTT代谢率测定的方法检测神经元损伤,以Fluo-3作标记用激光共聚焦显微镜扫描的方法检测[Ca2+]i.结果:体外培养6 d、17 d的神经元单纯无镁组MTT代谢率较同期对照组降低.应用MK-801 10 μmol*L-1、AP-5 50 μmol*L-1、尼莫地平10 μmol*L-1预处理后再给无镁处理,培养6 d、17 d的神经元MTT代谢率均不同程度高于同期单纯无镁组.培养6 d、17 d的神经元相对荧光强度之间差异有显著性,两者与基线荧光强度比较差异亦有显著性.应用上述各种拮抗剂后,[Ca2+]i改变的峰值均明显低于同期单纯无镁组.结论: 在体外不同发育阶段的神经元,短暂无镁处理诱导惊厥样放电所引起的神经元线粒体功能损伤以及[Ca2+]i改变程度不同.这种[Ca2+]i改变的年龄依赖性可能是惊厥导致神经元损伤的年龄依赖性的机制之一.NMDA受体-Ca2+通道激活是导致这种[Ca2+]i改变及神经元损伤的关键环节.     

闭合性肾损伤的诊断和治疗

目的探讨闭合性肾损伤的诊断与治疗方法。方法对205例闭合性肾损伤的临床资料进行回顾性分析。结果205例闭合性肾损伤中,肾挫伤113例,肾裂伤67例,肾碎裂伤31例,肾蒂血管伤12例,合并伤81例(39.5%)。血尿18例(91.7%),血尿是主要的临床症状。B 超检查199例,其中165例(82.9%)有异常表现;CT 检查80例,均显示肾损伤(100%)。保守治疗153例(74.6%);手术治疗52例,死亡5例(3.5%);超选择性肾动脉栓塞术29例。结论 B 超和 CT 检查是诊断肾损伤的有效方法。严格掌握手术时机是治疗闭合性肾损伤的关键。     

霍奇金淋巴瘤组织中H／RS细胞与其背景细胞的微切割及其IgH基因重排检测

目的 从基因水平探讨霍奇金淋巴瘤(HL)组织中H／RS细胞(Hodgkin and Reed-Sternberg cells)是否起源于B细胞、H／RS细胞的克隆性以及与背景淋巴细胞的相互关系。方法 对33例经典霍奇金淋巴瘤(cHL)石蜡刮片组织进行IgH基因重排分析，并对其中6例重排阳性的病例经B细胞特异性激活蛋白(BSAP)免疫标记，将标记阳性的H／RS细胞和背景淋巴细胞进行微切割后进一步行IgH基因重排分析。结果 16例石蜡刮片组织IgH基因重排阳性。对6例经BSAP标记的cHL成功进行了微切割，其中19管H／RS细胞中，有14管出现重排阳性，细胞数目不同的各管阳性率无显著性差异(P=0．290)；12管背景淋巴细胞有2管出现重排阳性，H／RS细胞与背景淋巴细胞的阳性率有显著性差异(P=0．002)。结论 支持H／RS细胞来源于B细胞的理论，认为部分背景淋巴细胞可能具有瘤性增生活性，参与H／RS细胞的前体细胞组成。