A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

尿毒症患者的性激素变化及其临床意义探讨

目的 :探讨女性尿毒症患者卵巢功能障碍的发病情况及其临床意义。方法 :应用酶免疫法 (EIA)测定了2 3例更年期前女性尿毒症非透析患者、15例透析患者及 2 9例健康献血者中促卵泡素 (FSH)、泌乳素 (PRL)、促黄体素 (LH)、雌二醇 (E2 )及孕酮 (P)的水平。结果 :尿毒症女患者PRL、FSH及LH均较健康对照组升高 ,而孕酮值显著降低 ,对此均有显著差异 ;且尿毒症女患者PRL升高、孕酮值降低与肾小球滤过率 (GFR)呈明显相关。透析患者较非透析患者PRL升高更为明显 ,孕酮值亦较非透析患者有所升高 ,但无显著意义。结论 :尿毒症女患者的排卵障碍及月经紊乱等都与尿毒症的严重程度相平行。透析并不能改善尿毒症女患者的卵巢功能障碍 ,只有纠正与改善肾功能 ,才能使尿毒症女患者的卵巢功能得以改善     

以人为本理念在全程护理服务中的实践

为了探索既符合中国国情又能满足病人需求的护理服务新模式，浙江省台州市中心医院自2002年开始试行全程护理服务。在实施护理中以病人为中心，从理念上、环境上、权益上、细节上为病人提供全面、全员、全程的人本服务；在管理实践中，提倡“尊、理、信、谐、通、创”六字理念，将管理视为服务，实行人本管理。通过3年的实践，整体护理质量、病人满意度、护士对工作满意度均有显著提高。     

SOME ANATOMICAL DATA RELATED TO THE TRANSNASO- SPHENOIDAL RESECTION OF PITUITARY FOSSA TUMORS

Since the beginning of this century, trans- naso-sphenoidal resection of the pituitary fossa tumors has been widely used clinically. It has more merits than other operative approaches used before. In China it has been adopted by both ENT doctors and neurosurgeons since 1959.1 In order to afford some relevant anatomical data, we measured 137 adult sagittal plane skulls with distinct landmarks.     

5种真空采血促凝管在生化检验中的应用及评价

目的 评价五种真空采血促凝管对常规生化检测项目的影响。方法 采集健康体检者及自愿者血液标本100例,选用5个不同厂家生产的真空采血促凝管,与美国BD公司生产的无添加剂的血清管进行采血质量和生化检测对比评价。结果 5个厂家生产的真空采血促凝管与BD公司生产的无添加剂血清管在多数生化检验项目上无明显差异(P>O.05),但有3个国内厂家生产的真空采血促凝管在标本采集质量、分离效果上存在明显不足,且在血清K、LDH、HBD、CK、CHOL、TG、HDL-c、LDL-c、APOA、APOB等检测上与对照组间存在着显著差异(P<0.05且r相似文献   

An intracellular self protein synthesized in macrophages is presented but fails to induce tolerance

Mice deficient for the fifth component of murine complement (C5), unlike normal mice, do not possess the secreted form of C5 in their body fluids and can be readily immunized to serum-derived normal C5. Although macrophages from C5-deficient mice do not secrete C5, they synthesize the precursor form (pro-C5). Therefore contact of T cells with autologous pro-C5 presented by macrophages is theoretically possible. We show that macrophages from C5-deficient mice can indeed stimulate a class II restricted C5-specific T cell clone without addition of exogenous C5. Immunization of C5-deficient mice with autologous pro-C5 induces vigorous C5-specific T cell proliferation and pro-C5 is recognized by C5-specific T cells in vitro, demonstrating that this protein fails to induce tolerance under physiological conditions. Thus, intracellular pro-C5 is processed and presented by C5-deficient macrophages and can activate T cell clones in vitro, yet is neither immunogenic nor tolerogenic for T cells in vivo.     

中药“附归参汤”修复混合菌所致小鼠输卵管炎性狭窄的病理改变

目的观察中药“附归参汤”灌胃给药后是否可改善混合菌导致的小鼠输卵管炎性狭窄的病理改变。为临床应用“附归参汤”治疗输卵管炎所致的不孕症提供实验依据。方法昆明小鼠随机分为对照组（n=10）、模型组（n=10）、模型组＋生理盐水处理组（n=10）、模型＋“附归参汤”处理组（n=20），输卵管炎性狭窄模型采用混合菌（溶血性链球菌、大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌2：1：1）输卵管接种法制作，处理组分别胃饲生理盐水和“附归参汤”30天。应用组织学方法观察各组的病理学改变，评判各处理组病理学转归情况。结果在使用混合菌接种后，小鼠输卵管管壁结构发生改变，主要包括黏膜层水肿、上皮细胞顶端纤毛变短或消失、固有层炎性细胞浸润、毛细血管充血、管腔狭窄甚至闭塞。“附归参汤”长期给药后明显使上述病理改变向正常组织转归。结论中药“附归参汤”能够修复混合菌导致的小鼠输卵管炎性狭窄的病理改变，为临床应用该药治疗输卵管炎所致的不孕症提供了实验依据。