多重PCR归化法平行检测HBV和HCV的研究

目的：建立一种多重PCR归化法并应用于对HBV、HCV平行检测。方法：利用PCR反应5′端允许添加非互补序列的原理，运用内外两对引物，经过2轮扩增，使目的产物均带上共有序列，再以共有序列为引物进行扩增，实现多重扩增。比较和筛选四种核酸提取方法。运用正交优化法，优化并确定最佳扩增条件。对28份血标本进行对比试验，并进行质量评价。结果：归化多重PCR方法对于HBV、HCV病毒合并感染患者的诊断敏感性为83.5%，诊断特异性为70.0%，诊断指数为153．3％，诊断效率为72．2％；对HBsAg阳性患者的HBV DNA的诊断敏感性为78．6％，诊断特异性为80．0％，诊断指数为158．6％，诊断效率为79．2％。对抗－HCV阳性患者的HCV RNA的诊断敏感性为75．0％，诊断特异性为90．0％，诊断指数为165．0％，诊断效率为83．3％。结论：多重PCR归化法在多基因扩增或多种病原体的同时平行检测领域具有较大应用潜力。该方法实用、准确、可靠，对HBV HCV的防治具有实际意义。     

肩锁钩板治疗不稳定性锁骨外侧段骨折的临床研究

目的：比较肩锁钩板和传统克氏针内固定治疗不稳定性锁骨外侧段骨折的疗效。方法：54例不稳定性锁骨外侧段骨折的患者接受了手术治疗，内固定分别是锁骨钩板或克氏针，根据国外的锁骨外侧段骨折肩部功能评价标准进行6－12个月的术后随访，随访结果运用统计学方法进行分析处理，结果：克氏针内固定组的手术优良率为77．3％，并发症发生率为27．3％，骨折愈合率为81．8％；锁骨钩板内固定组的手术优良率为100％，并发症发生率为3．1％，骨折愈合率100％。两组数据统计学差异有显著性，结论：在不稳定性锁骨外侧段骨折的手术治疗中，锁骨钩板较传统克氏针内固定有较高的手术优良率和骨折愈合率，且并发症的发生率较低，因此，它是一种疗效满意的内固定方法。     

负压对缺血肢体血流动力学影响的实验研究

目的：观察负压对肢体动脉闭塞犬患肢血流动力学的影响。方法：犬15只，随机分治疗组10只和对照组5只。两组均采用切断犬后肢股动脉分支、动脉腔内置入螺旋状金属丝的方法，制作肢体缺血模型。在模型制作后2wk，治疗组行患肢负压治疗10d，对照组不做负压治疗。两组均于模型前、模型后2wk及治疗结束后，用彩色多普勒观察患肢股动脉血流动力学指标：收缩期最大流速(Vmax)、平均流速(Vmean)、阻力指数(R1)、搏动指数(P1)的变化。结果：治疗组在治疗后患肢股动脉Vmax、Vmean显著增加(P＜0．001)，RI、PI显著降低(P＜0.01)；对照组各指标无明显变化(P＞0．05)。结论：负压对缺血肢体血流动力学表现为流速增加，阻力下降。     

自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的设想

自杀基因疗法是一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施。但如何有效提高疗效是目前仍须解决的关键性问题。由于免疫机制在自杀基因疗法旁杀伤效应中的重要作用，激活荷瘤机体的免疫功能，改善自杀基因抗肿瘤作用的炎症免疫微环境，是提高肿瘤自杀基因疗法疗效的主要策略。中医中药在调节机体免疫状态方面具有肯定的作用，与其他方法比较具有明显优势。因而，将自杀基因疗法与中医中药联合应用，有可能起到提高肿瘤自杀基因疗法疗效，防止肿瘤复发的作用。提出了自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的新设想，为肿瘤基因治疗提供了一种新的思路和模式。     

腺病毒载体介导CTLA4Ig基因治疗小鼠变应性鼻炎

目的 检测CTLA4Ig-重组腺病毒载体（Ad-CTLA4Ig）在变应性鼻炎治疗中的作用。方法 采用卵清蛋白（OVA）致敏和激发诱导小鼠变应性鼻炎。实验组在OVA激发前30min予以Ad-CTA4Ig腹腔注射。未转CTLA4IgcDNA的腺病毒载体（Adv）作对照。比较各组动物鼻部症状和鼻粘膜形态学改变，并采用ELISA法测定血清中OVA－特异性IgE水平。结果 CTLA4Ig重组腺病毒实验组小鼠鼻部症状和鼻粘膜病理改变不明显，并且血清中OVA－特异性IgE水平明显低于对照组（P＜0.05）。结论 Ad-CTLA4Ig可防治小鼠应变性鼻炎的发生，提示CTLA4Ig-重组腺病毒载体有可能运用于临床变应性鼻炎的治疗。     

Combination therapy: lonidamine, hyperthermia, and chemotherapy against the RIF-1 tumor in vivo.

Lonidamine enhances the cytotoxicity in vitro of several conventional antitumor drugs as well as that of hyperthermia (HT). We have investigated the possibility that such enhancement can also be demonstrated in vivo against the RIF-1 tumor system. Two assays were used to examine antitumor activity: tumor growth delay and clonogenicity of cells obtained from tumors from treated animals. We used drug (and HT) doses that by themselves did not achieve significant cell killing. The drugs whose interaction with lonidamine was tested were: cis-diamminedichloroplatinum (CDDP), mitomycin C (MMC), bleomycin, 5-fluorouracil, and nitrosourea. Of these only CDDP and MMC yielded positive data. Both assays gave essentially the same results, showing that antitumor activity reflected direct cell killing. CDDP and MCC activity was also enhanced by HT. When we combined all three modalities, however, the results of the trimodality therapies were no better than that of individual bimodality treatments. These last results suggest that lonidamine and HT have similar mechanisms, most likely inhibition of repair of DNA damage. Our data do suggest that lonidamine may have a role in multidrug therapies that include either CDDP or MMC as a component of the treatments.     

内镜鼻胆管引流术在腹腔镜和开腹胆总管探查术中的应用

目的　评价内镜鼻胆管引流术 (Endoscopicnasobiliarydrainage ,ENBD)配合腹腔镜和常规开腹手术治疗胆总管结石的疗效。　方法　回顾分析 1997年 1月～ 2 0 0 1年 7月应用ENBD配合完成腹腔镜胆总管探查、I期缝合术 4 4例及开腹胆总管探查、I期缝合术 34例。　结果　 78例均手术成功 ,术后无胆漏、胆道出血、胆管炎等并发症。术中结石取净率 10 0 % (78 78)。术后住院时间 :腹腔镜组为 (6 2±1 3)d ,开腹组为 (7 4± 2 1)d。随访 5 7例 ,时间 (1～ 4 5 )年 ,平均 2 6年 ,腹部彩色B超检查无胆管狭窄及结石复发。　结论　ENBD配合腹腔镜和开腹胆总管探查取石、胆总管I期缝合术安全、可靠。     

缺失型DMD／BMD患者PCR快速检测的可行性与意义

应用对应于Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失热区的二对ＰＣＲ引物和一对内对照无关引物，在同一反应体系中扩增，检测６６例ＤＭＤ／ＢＭＤ患者。发现其中２５例存在１７号或４９号外显子缺失，与同时采用ｃＤＮＡ探针杂交检测出的３５例基因缺失相比．检出率达７１．４％。说明该扩增系统能够作为快速筛查缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ患者的有效手段。这对指导合理选用探针，尤其在产前诊断方面，具有重要意义。     

山东产四种菟丝子免疫增强作用的比较研究

目的 比较山东产四种菟丝子对小鼠免疫功能、抗疲劳、耐缺氧等方面的作用。方法 选用昆明种小鼠，用山东产四种菟丝子的水、醇提取物灌胃，观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、免疫器官重量的变化、游泳实验和耐缺氧等指标。结果 山东产四种菟丝子均可增加小鼠吞噬百分率，使幼龄小鼠的胸腺和脾脏增重，并可显著延长小鼠的游泳及缺氧存活时间。其中以菟丝子和南方菟丝子的作用较好，水提取物的作用优于醇提取物。结论 山东产四种菟丝子具有增强机体免疫功能、抗疲劳、耐缺氧作用。菟丝子中的多糖是其提高机体免疫力，增强体质的有效物质之一。     

CpG ODN增强乙肝疫苗在老年小鼠中的免疫应答

目的：探讨CpG ODN对老年小鼠的体液和细胞免疫应答的增强作用。方法：选用老年C57BL／6小鼠，将乙肝疫苗和10μg、20μg CpG ODN同时或单独肌注到小鼠体内，两周后以同样剂量加强免疫一次，再过3周后摘除眼球取血，用EILSA方法检测抗HBs16；抗体和IL-12；无菌取脾脏作HE染色，观察脾脏淋巴细胞变化。结果：10μg和20μg CpG ODN与疫苗同时注射组产生的抗体绝对量分别是单独注射疫苗组的3倍和4倍；产生的IL-12水平较对照组有明显升高，且20μg比10μCpG组产生的IL-12水平更高。光镜下各组的脾脏淋巴细胞的变化如下：正常老年鼠组脾脏淋巴细胞较正常青年鼠组明显稀少；老年鼠 10μgCpG组脾脏淋巴细胞较正常老年鼠组有了明显增加，且细胞核也明显增大；20μgCpG组增加的更加明显。结论：CpG ODN能增强乙肝疫苗在老年小鼠中的体液和细胞免疫应答。