超声造影技术在腹腔镜T1期肝细胞癌切除术中的应用价值

目的：探讨超声造影(CEUS)技术在腹腔镜T1期肝细胞癌(HCC)切除术中的应用价值。方法：选择2018年1月—2020年12月于天津医科大学第二医院行腹腔镜T1期HCC切除术的患者80例,根据是否行术前CEUS将患者分为造影组和对照组(每组40例)。均在距肿瘤边缘0.5 cm处切开患者肝脏实质并完整切除肿瘤,然后在切缘3个不同位置取组织活检。采用免疫组化检测癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。记录患者手术时间、术中出血量、住院时间、肿瘤直径、切缘长度、术后进食时间、拔除引流管时间、术后最高丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)及其恢复正常时间。术后均行规律随访观察。结果：与对照组相比,造影组手术时间(t=11.69,P<0.001)及住院时间更短(t=9.40,P<0.001),术中出血量更少(t=14.86,P<0.001);而两组患者在肿瘤直径(t=0.28,P=0.78)、切缘长度(t=0.18,P=0.86)、术后进食时间(t=0.44,P=0.66)及拔除引流管时间(t=1.16,P=0.25)方面差异均...     

心房颤动治疗的未来发展方向——混合消融

心房颤动是临床常见的心律失常,已有研究证明其与严重不良心脑血管事件(心力衰竭、脑卒中和心肌梗死)有关,目前全球心房颤动的患病人数超过了3 300万,预计未来40年内其患病率将增加1倍以上。多年来,医学相关人员在探究心房颤动的病理生理机制及开创改进其治疗方法等方面付出了大量努力。目前心房颤动的治疗管理仍是临床医学上的一个难题,尽管心房颤动治疗的手术消融和导管消融技术已逐渐趋于成熟,但对于心房颤动最佳的治疗方式、消融能量的选择尚无统一定论。导管消融通常需要多次手术且成功率低,而手术消融术后不良事件发生率较高。近年来,鉴于心脏外科医生和电生理学家之间的密切合作,结合导管及微创手术消融诞生了一种治疗心房颤动的新型策略——混合消融模式。混合消融克服了导管消融和微创手术消融的缺点,减少了不良结局,在治疗持续性心房颤动,尤其是长期持续性心房颤动上取得了可观的成效。本文主要通过回顾心房颤动消融的研究进展,对比分析目前混合消融模式治疗心房颤动的现有研究成果,归纳总结这种新型心房颤动治疗策略的优势与挑战,以期为临床心房颤动的治疗提供更多选择。     

上调Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平,CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。 结果 与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,且PPM1F蛋白表达量明显增加,细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）,迁移细胞数明显减少（P<0.05）。 结论 上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移,其机制可能与细胞间的黏附作用有关。     

唾液酸糖表位类人源化N-糖基化修饰治疗性重组蛋白的研究进展

唾液酸化N-糖基化修饰重组蛋白能提高治疗性蛋白的理化性质,如延长半衰期、增强组织穿透性以及抑制炎症反应等。但迄今为止糖蛋白的N-糖基化修饰效率和唾液酸化效率都很难达到100%,这导致了唾液酸修饰糖基化重组蛋白的均质化、规模化生产非常困难。因而提高类人源化N-糖基化修饰治疗性重组蛋白的均质性仍是目前糖蛋白药物研发任务之一。该文围绕提高唾液酸糖表位N-糖基化修饰治疗性重组蛋白效率的方法及均质化类人源化唾液酸糖表位治疗性重组蛋白的生产途径展开综述。     

肿瘤坏死因子新型免疫抑制剂的构建、表达和鉴定

目的 用鸡卵清溶菌酶(Hen egg-white lysozyme，HEL)T辅助细胞表位序列替换hTNF-α3^ 末端序列，构建和表达hTNF-α新型免疫抑制剂。方法 将重组的hTNF-α HEL克隆、表达、纯化后进行初步的生物学活性鉴定。结果 DNA测序分析表明，重组的hTNF-α HEL3^ 末端序列与设计序列完全相同。将其插入pBV220表达载体中，重组菌经42℃诱导4h做SDS-PAGE分析，结果 显示该免疫抑制剂获得了表达，Mt为17000，其表达量为菌体总蛋白量的30％。Western blot结果证实，该表达蛋白可与抗TNF-α抗体产生免疫反应。对该表达蛋白进行了阴离子交换柱纯化，获得的重组蛋白的纯度可达95％以上。对该蛋白的体外杀伤活性检测表明，该蛋白已完全丧失了TNF-α的体外杀伤活性。结论 上述实验结果证明，TNF-α免疫抑制剂的构建获得了成功，该免疫抑制剂既保持了与TNF-α抗体结合的能力又失去了TNF-α的杀伤活性，为其下一步治疗作用的研究奠定了基础。     

基于图像的微阵列生物芯片分析

利用生物芯片的高通量特性，系统地研究生物体基因和蛋白质表达及其相互作用，在最近十几年迅速发展。以图像为基础的生物芯片分析是生物芯片技术的重要组成部分，对其方法进行研究已成为当前的热点之一。目前很多针对生物芯片的分析方法不断涌现，这些方法涉及网格定位、靶点分割、数据提取和表达、几何校正、噪声消除等生物芯片分析子过程。本研究对以上各类分析方法进行了综述，分析了各类方法的不同应用，比较了多种算法的分析结果，并提出当前在生物芯片分析研究领域需要解决的关键问题。     

人胎盘CD133+细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性

目的 通过对人胎盘CD133⁺细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析，证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞（HSPC）。 方法 采用机械法制备人胎盘组织（PT）单细胞悬液，用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC)，经磁式分选（MACS）富集CD133⁺细胞，培养28 d后观察HPP-CFC集落形成能力，用流式细胞仪（FCM）对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析，实验全程用脐带血（UCB）作平行比较分析。 结果 培养28 d后，PT-CD133⁺与UCB-CD133⁺细胞组份分别扩增了266和362倍，前者低于后者（P<0.01）；PT-CD133⁺与UCB-CD133⁺细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×10³、(17. 7±5.7)/5×10³，前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者（P<0.01）；PT-CD133⁺、UCB-CD133⁺细胞培养至28 d时，除UCB-CD133⁺组的CD133⁺CD34^-亚群比例无明显改变外，CD133⁺CD34⁺、CD133^-CD34⁺和CD133⁺CD34^-（PT-CD133⁺组）亚型均比培养前减少。 结论 人胎盘组织CD133⁺细胞中存在HPP-CFC，说明胎盘CD133⁺细胞群中存在早期HSPC。     

基于MSP430F149的血氧饱和度检测仪

本文根据红光和红外光透过手指动脉血管后的相对最大光强和光强的最大变化量之比来计算血氧饱和度的一般原理推导出实用的计算方法,并结合MSP430F149微处理器低功耗优势,以及丰富的外围资源研制设计的可控增益放大器等,有效地克服了由于个人生理差异而引起的测量信号基线漂移,满足了仪器便携化设计的需求.     

Human ORFeome Version 1.1: A Platform for Reverse Proteomics

The advent of systems biology necessitates the cloning of nearly entire sets of protein-encoding open reading frames (ORFs), or ORFeomes, to allow functional studies of the corresponding proteomes. Here, we describe the generation of a first version of the human ORFeome using a newly improved Gateway recombinational cloning approach. Using the Mammalian Gene Collection (MGC) resource as a starting point, we report the successful cloning of 8076 human ORFs, representing at least 7263 human genes, as mini-pools of PCR-amplified products. These were assembled into the human ORFeome version 1.1 (hORFeome v1.1) collection. After assessing the overall quality of this version, we describe the use of hORFeome v1.1 for heterologous protein expression in two different expression systems at proteome scale. The hORFeome v1.1 represents a central resource for the cloning of large sets of human ORFs in various settings for functional proteomics of many types, and will serve as the foundation for subsequent improved versions of the human ORFeome.