游离指固有动脉背侧支皮瓣修复指腹缺损

目的 报告应用指固有动脉背侧支皮瓣游离移植修复指腹缺损的手术方法和临床效果.方法 对6例6指指腹缺损的患者,采用指固有动脉背侧支皮瓣游离移植修复,皮瓣切取面积为1.0cm×1.0cm～2.0 6m×2.5 cm,供区为患指或邻指的近节桡背或尺背侧,供区全部采用全厚皮片植皮.结果 术后6例皮瓣全部存活,随访时间6～18个月,平均12个月,皮瓣质地、外形满意,手指功能恢复优良,远指间关节活动度为0°～60°,皮瓣两点分辨觉为6～11mm.皮瓣供区创面Ⅰ期愈合,远期随访植皮区耐磨,无破溃发生,供区指体活动未受影响.结论 应用游离指固有动脉背侧支皮瓣修复指腹缺损,手术操作相对简单,修复后指腹饱满、外形逼真并具有感觉,是一种理想的手术方法.     

EZH2和Bmi-1基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义

目的 观察EZH2和Bmi-1基因在膀胱正常组织和癌组织中的表达及在膀胱肿瘤发生和发展中的作用.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量PCR的方法 ,检测EZH2和Bmi-1基因在膀胱正常黏膜(共15例)和膀胱癌中(共70例)的相对表达量,以膀胱癌T24细胞株作为阳性对照.结果 在膀胱正常黏膜中,EZH2和Bmi-1基因的mRNA不表达或低表达.而在膀胱癌组织中,两者的表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).EZH2基因在低度恶性倾向尿路上皮乳头状肿瘤(PUNLMP)组、低分级组和高分级组的表达量分别为:0.1082±0.1880、0.0740±0.0984、0.1885±0.2144,与对照组(0.0158±0.0208)比较,P值分别为＞0.05、＜0.01和＜0.01;在浸润性膀胱癌的表达(0.2069±0.2241)高于表浅性膀胱癌(0.0868±0.1233),其差异有统计学意义(P＜0.01).Bmi-1基因在PUNLMP组、低分级组和高分级组的表达量分别为:0.6654±0.7668、0.4955±0.4553、0.7986±0.9259与对照组(0.1745±0.0973)比较,P值分别为＞0.05、＞0.05和＜0.01;在浸润性膀胱癌组(0.8368±1.0041)的表达高于表浅性膀胱癌组(0.5505±0.4992),但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EZH2和Bmi-1基因在膀胱癌的发生中起重要作用,并且EZH2与膀胱癌的发生、进展相关.     

靶向人肝素酶短发卡状RNA表达载体的构建及其沉默作用

目的 构建靶向人肝素酶(HPSE)的短发卡状RNA(shRNA)表达载体,探讨其基因沉默作用.方法 根据人肝素酶mRNA序列设计shRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pGenesil-1载体,转化扩增后进行测序鉴定;重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine 2000的介导下,瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901、人前列腺癌细胞株PC-3、人膀胱癌细胞株EJ,每种细胞分别设空白对照组、空载体pGenesil-Negative转染组、pGenesil-HPSE shRNA转染组3组,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测各种细胞中肝素酶基因表达水平,黏附实验和transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力.结果 所构建的shRNA载体插入基因片段与设计序列完全匹配,载体构建成功;重组质粒转染SGC-7901、PC-3、EJ细胞后,肝素酶mRNA表达分别下调78.6%(P<0.01)、82.6%(P<0.01)、81.9%(P<0.01),肝素酶蛋白表达分别下调76.4%(P<0.01)、85.9%(P<0.01)、83.3%(P<0.01),细胞黏附能力分别下降37.7%(P<0.01)、44.6%(P<0.01)、43.8%(P<0.01),细胞侵袭能力分别下降66.8%(P<0.01)、76.6%(P<0.01)、80.5%(P<0.01).结论 成功构建了靶向人肝素酶的shRNA表达载体,沉默肝素酶基因表达后,能抑制多种癌细胞的游走和侵袭能力.     

体外膜肺氧合辅助后高胆红素血症的临床意义

目的 探讨体外膜肺氧合(ECMO)辅助病人高胆红素血症的发病率及其对住院死亡的影响.方法 收集2005年至2008年65例应用ECMO辅助的成年病人资料,记录血流动力学、血牛化指标等以及临床转归.结果 51例成功脱离ECMO,脱机率为78.5%,33例生存出院,总病死率49.2%.55.4%的ECMO辅助病人发生高胆红素血症,其病死率明显高于非高胆红素血症组(P<0.01).Logis-tic回归分析显示,高胆红素血症明显增加病人住院死亡风险(OR=3.895,P<0.01).结论 高胆红素血症在ECMO辅助病人中的发病率较高,是增加术后病死率的影响因素之一,应及时处理,以改善病人的临床转归.     

游离股前外侧穿支皮瓣修复胫前皮肤软组织缺损

目的探讨应用游离股前外侧穿支皮瓣移植修复胫前皮肤、软组织缺损的临床效果。方法对14例胫前皮肤、软组织缺损伴骨外露患者,应用游离股前外侧穿支皮瓣移植修复,皮瓣切取面积14cm×6cm～23cm×12cm,供区直接缝合或以全厚皮片植皮修复。结果术后14例皮瓣全部存活,创面一期愈合,术后随访3～24个月(平均8个月),皮瓣质地优良,无溃疡发生,8例获保护性感觉,骨折愈合后下肢可负重行走。结论股前外侧穿支皮瓣是修复胫前皮肤、软组织缺损的有效方法。     

依托咪酯对猪肾上腺皮质细胞的毒性作用及依托咪酯预处理对其的影响

目的 探讨依托咪酯对猪肾上腺皮质细胞的毒性作用及依托咪酯预处理对其的影响.方法 实验分两部分,第一部分为细胞毒性实验,猪肾上腺皮质细胞随机分为8组,每组3皿,对照组加入0.5%二甲基亚砜(DMSO),其他7组分别加入50、100、200、300、400、500、1000 μmol/L依托咪酯,每组分别作用6、12、24 h,进行下述指标检测.第二部分为预处理实验,猪肾上腺皮质细胞随机分为3组,每组3皿,对照组加入0.5%DMSO,损伤组加入325 μmol/L依托咪酯作用24 h,预处理组先加入0.6 μmol/L依托咪酯作用1 h,洗脱后在培养基中孵育4 h,再加入325 μmol/L依托咪酯作用24 h.采用CCK-8法检测细胞活力,计算24 h时依托咪酯半数抑制浓度(IC50),采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 依托咪酯可抑制猪肾上腺皮质细胞活力,诱导细胞凋亡,呈浓度和时间依赖性,24 h时IC50为325μmol/L.0.6 μmol/L依托咪酯预处理1 h可抑制325μmol/L依托咪酯诱发的细胞凋亡具有抑制作用.结论 依托咪酯通过诱发猪肾上腺皮质细胞凋亡对其功能产生抑制作用;依托咪酯预处理可减轻药物自身引起的这种抑制作用.     

缺血预处理和缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注时糖原合酶激酶-3β活性的影响

目的 探讨缺血预处理和缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注时糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)活性的影响.方法 雄性Wistar大鼠40只,体重200～230 g.随机分为4组(n=10),假手术组(S组)仅分离双侧颈总动脉;缺血再灌注组(I/R组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 min后恢复灌注;缺血预处理组(IPR组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 s,开放30 s,反复3次,最后夹闭10min后恢复灌注;缺血后处理组(IPO组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 min,开放30s,夹闭10 s,反复3次后恢复灌注.于术后2 d时取脑组织,计数大脑皮质凋亡神经元,测定脑梗死体积、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达.对神经元凋亡数、脑梗死体积与p-GSK-3β水平做直线相关分析.结果 与S组比较,I/R组、IPR组和IPO组凋亡神经元、脑梗死体积增加,p-GSK-3β水平降低,Bcl-2表达下调,Bax和Caspase-3表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,IPR组和IPO组凋亡神经元和脑梗死体积降低,p-GSK-3β水平升高,Bcl-2表达上调,Bax和Caspase-3表达下调(P＜0.05);IPR组和IPO组间上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).凋亡神经元、脑梗死体积与p-GSK-3β水平呈负相关(P＜0.05).结论 缺血预处理和缺血后处理通过抑制GSK-3β活性而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤.     

慢性前列腺炎患者血清和前列腺按摩液中铜锌超氧化物歧化酶水平的临床研究

目的:慢性前列腺炎(CP)是成年男性、男科门诊最常见的疾病之一。近年来有研究表明氧化应激反应异常是其病因之一。本文通过对CP患者和健康男性的血清和前列腺按摩液(EPS)中铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量测定,探讨其在CP诊断和治疗中的意义。方法:从门诊中确诊的CP患者中选取120例,分为Ⅱ型组(40例)、ⅢA型组(40例)、ⅢB型组(40例),以40例健康男性为对照组,分别测定血清和EPS中CuZn-SOD及MDA含量,并比较其在各组间的差异。结果:各组间血清CuZn-SOD活力相互比较,均无显著性差异(P>0.05)。CP各组血清MDA含量均高于对照组,有显著性差异(P<0.01);CP各组之间血清MDA含量相互比较无显著性差异(P>0.05)。Ⅱ型组、ⅢA型组EPS中CuZn-SOD的活力均低于ⅢB型组及对照组,有显著性差异(P<0.01);Ⅱ型组与ⅢA型组比较无显著性差异,ⅢB型组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。Ⅱ型组、ⅢA型组EPS中MDA的含量明显高于ⅢB型组、对照组,有显著性差异(P<0.01);Ⅱ型组与ⅢA型组比较无显著性差异(P>0.05),ⅢB型组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:Ⅱ型组、ⅢA型组CP患者前列腺氧化应激水平高于健康男性,ⅢB型患者前列腺氧化应激水平与健康男性无明显差异;血清及EPS中CuZn-SOD、MDA水平可作为CP诊断和判断疗效的辅助指标。     

PDE5基因siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的:观察PDE5基因小干扰RNA(siRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为阴茎勃起功能障碍(ED)的基因治疗提供实验依据。方法:使用美国Amb ion公司提供的设计软件设计并合成人PDE5基因的siRNA序列,合成3对PDE5 siRNA和1对阴性对照siRNA,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设定空白转染组为对照组。以酶联免疫法分别检测转染后不同时间(24、48、72、96 h)点海绵体平滑肌细胞内cGMP浓度变化,观察PDE5 siRNA对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:siRNA1、siRNA2和siRNA3转染后人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平显著高于阴性对照siRNA组和空白对照组(P<0.05),在转染后72 h最为显著,siRNA1、siRNA2、siRNA3、阴性对照siRNA和空白对照组cGMP测定值分别为:5.89±0.19、3.52±0.16、2.88±0.08、0.72±0.12、0.60±0.16 pmol/m l,siRNA1组明显高于siRNA2、siRNA3组(P<0.05)。结论:体外化学合成的PDE5 siRNA能有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,不同序列siRNA增加cGMP水平的能力不同,为ED的基因治疗提供了新思路。     

老年退行性腰椎管狭窄症的手术疗效分析

目的:探讨老年退行性腰椎管狭窄症患者减压手术的疗效。方法:1997年1月～2003年12月收治的70岁以上且获得2～6年随访的退行性腰椎管狭窄症患者106例,男49例,女57例;年龄70～82岁,平均76.3岁;病史4～10年,平均6.7年。42例并存1种内科疾病,55例并存两种或以上的内科疾病。均经过正规保守治疗无效。术前联合内科诊治并存的内科疾病。95例行单纯全椎板切除减压术;11例采用椎板减压、椎弓根固定、椎间植骨融合术,对手术疗效进行回顾性分析。结果:无围手术期死亡病例。出现并发症22例次,经对症及内科联合处理后好转。单纯减压组术后3周配戴腰围下床活动;内固定组术后3～5d下床活动。平均随访3年10个月,Oswestry评分从术前59.64±11.07分改善至16.81±7.36分。所有患者连续行走从术前不足15min改善到至少30min。95.2%患者自诉生活质量明显提高。结论:老年退行性腰椎管狭窄症患者在积极控制并存内科疾病的基础上,手术减压治疗对神经功能的恢复有重要作用,可获得较满意的临床疗效。