中性粒细胞凋亡在系统性红斑狼疮发病机制的研究进展

【摘要】 系统性红斑狼疮是临床表现复杂、发病率较高的自身免疫性疾病。本病基本特征是自身抗原耐受性降低及自身抗体的产生。由于中性粒细胞死亡途径的改变,包括凋亡、继发坏死(SNECs)、中性粒细胞胞外捕获网（NETs）形成,凋亡细胞清除受损、含核DNA的NETs降解不全,继发坏死细胞（SNECs）释放出自身抗原。而修饰后的自身抗原经由滤泡树突状细胞（FDC）提呈给自身反应性B细胞,导致自身免疫耐受突破和自身抗体产生。自身抗体和未被清除的细胞碎片形成的免疫复合物（IC）沉积在循环组织,合并机体清除IC过程中产生的大量促炎因子导致系统性红斑狼疮（SLE）持续不断的炎症反应和组织损伤。本文就中性粒细胞凋亡形成、凋亡清除及清除受损在SLE发病机制中的研究进展做一综述。     

EMA-CO方案治疗21例耐药滋养细胞肿瘤的疗效分析

目的了解EMA-CO方案治疗耐药妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)的疗效。方法回顾性总结在我院2005年10月至2015年10月期间收治的21例应用EMA-CO方案治疗对一线5-FU单药化疗方案耐药GTN患者的临床疗效及不良反应。结果 EMA-CO方案对于耐药GTN的治愈率可达90.48%,不良反应主要是骨髓抑制、消化道反应和肝功轻度损害,其中Ⅲ度骨髓抑制占9.57%,Ⅳ度骨髓抑制占3.19%,Ⅰ~Ⅱ度消化道反应占39.36%,Ⅰ~Ⅱ度肝功能损害占13.83%,其余未发生严重并发症。结论 EMA-CO方案的疗效肯定,不良反应轻,患者易于接受,可作为耐药GTN的首选化疗方案。     

大鼠少突胶质前体细胞纯化及原代培养的新方法

【摘要】目的 建立简单、高效的少突胶质前体细胞（OPCs）分离培养方法。方法 取出生2天的SD大鼠大脑皮层,分离消化皮层细胞为单细胞悬液,采用A2B5免疫磁珠提纯OPCs进行体外培养,倒置显微镜观察细胞生长状况,并在第7天采用免疫荧光检测OPCs特异性标志A2B5和O4;培养7天后换为OPCs分化培养基诱导OPCs分化,分化培养7天后,免疫荧光法检测成熟少突胶质细胞特异性标志骨髓碱性蛋白（MBP）。结果 培养过程中观察发现,95%以上的细胞具有双极或三级突起的典型形态,免疫荧光显示纯化培养的OPCs 95%以上表达A2B5和O4;分化培养后95%以上的细胞为MBP阳性的少突胶质细胞。结论 采用磁珠法可以获得高纯度的OPCs,并且细胞具有分化为成熟少突胶质细胞的能力。     

玛咖提取物对大鼠运动耐力和血液激素水平的影响

目的 探讨玛咖提取物对运动耐力和血激素水平的影响。方法 采用循环水流自由游泳,给予Wistar大鼠2.0、4.0和8.0 g/（kg·bw）玛咖提取物,连续给药15 d。第16天,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血去甲肾上腺素（NA）、雌二醇（E₂）、睾酮（T）水平。结果 给予玛咖提取物2.0、4.0和8.0 g/（kg·bw）15 d,下沉前游泳时间和游泳总时间比单纯游泳组分别延长了32.51%、60.04%、106.52%和16.99%、56.50%、101.73%（P<0.01）,下沉次数比单纯游泳组分别减少了18.89%、35.89%、58.06%（P<0.01）。大鼠血NA水平比对照组分别增加了3.30%、6.60%、16.50%,比单纯游泳组分别增加了42.49%、47.05%、60.70%;血E₂水平比对照组增加了132.83%、102.72%、62.26%（P<0.01）,比单纯游泳组降低了23.88%、33.72%、46.95%;血T水平比对照组分别增加了5.11%、37.65%、123.16%,比单纯游泳组分别增加了28.98%、68.92%、173.85%（P<0.01）。结论 玛咖提取物具有缓减疲劳、增强运动能力的作用。其机制与升高血NA和T水平,降低E₂水平有关。     

构建住院医师规范化培训“精析病例教学”探索

精析病例教学是我院在住院医师规范化培训中构建的一种新教学方式,由医教部统一组织,选择医院当年有代表性的疑难病例,各学科专家通过多媒体全程再现疾病治疗的诊疗过程、 介绍疾病相关的知识链接,并在疾病诊疗的关键节点设置问题,让学生思考和回答。该教学方式在改进和提高传统CBL的基础上,引入PBL教学元素以及新技术新方法等前沿进展,期望达到开拓学生视野、激发学习兴趣、使学生获得解决临床问题的思维能力。     

肾移植术后感染新型冠状病毒1例

The novel coronavirus is a newly discovered pathogen in late December 2019, and its source is currently unknown, which can lead to asymptomatic infection, new coronavirus pneumonia or serious complications, such as acute respiratory failure. Corona virus disease 2019 (COVID-19) is a new type of respiratory disease that is currently spreading all over the world and caused by this coronavirus. Its common symptoms are highly similar to those of other viruses, such as fever, cough and dyspnea. There is currently no vaccine or treatment for COVID-19. Everyone is susceptible to infection with this disease, and owing to the long-term use of immunosuppressants, the immunity of kidney transplant recipients is suppressed, and it is more likely to be infected with the disease. At present, its impact on kidney transplant recipients is unclear. This article reports the clinical features and therapeutic course of novel coronavirus infection in a patient after renal transplantation. A 37-year-old female patient who received a kidney transplant 6 months before was diagnosed with novel coronavirus pneumonia. The patient’s symptoms (such as fever, chills, dry cough, muscle aches), laboratory tests (such as decreased white blood cell count, elevated liver enzymes and D-dimer, positive viral nucleic acid test), and chest CT (multiple left lower lung plaque ground glass shadow) were similar to those of non-transplanted novel coronavirus pneumonia patients. In terms of treatment, because the immunity of kidney transplant recipients has been suppressed for a long time, it is a very common strategy to suspend the use of immunosuppressive agents. Therefore, the patient immediately discontinued the immunosuppressive agent after admission, so that she could restore immunity against infection in a short time. At the same time, the use of glucocorticoids was also very important. Its immunosuppressive and anti-inflammatory effects played a large role in the treatment process.In addition, prophylactic antibiotics was needed, and nephrotoxic drugs should be used with caution. Finally, following discounting the use of immunosuppressant and a low-dose glucocorticoid-based treatment regimen, COVID-19 in this renal transplant recipient was successfully cured. The cure of this case was of great significance, and this adjuvant nonspecific antiviral therapy could provide a template for the treatment of other such patients.     

基于荧光共振能量转移技术的快速检测CA16型手足口病病原体新方法的建立及其评价

目的：基于荧光共振能量转移（FRET）技术建立一种柯萨奇病毒A组16型（CA16）手足口病病原体快速检测的新方法,并对检测效果进行评价,使其达到疾病爆发流行期间大样本量检测的要求。方法：采用SDS-PAGE凝胶电脉技术和蛋白浓度定量试剂盒测定CA16鸡卵黄抗体（CA16-IgY）纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测抗体效价及特异性,采用紫外可见光谱（UV-Vis）、红外光谱（FTIR）和透射电子显微镜（TEM）等方法对所制备的金纳米粒子（AuNPs）及其生物探针（IgY-AuNPs）的尺寸、形貌和性能进行表征;基于FRET技术构建CA16检测体系,通过优化检测体系中IgY-AuNPs浓度、氯化钠（NaCl）用量和荧光恢复时间等指标,对检测方法的灵敏度、特异度和临床样本检测进行评价。结果：CA16-IgY纯度较高,抗体平均蛋白水平为12.15 mg·L^-1,抗体效价高达1：128 000,特异性良好;AuNPs及IgY-AuNPs的UV-Vis、FTIR和TEM观察结果,IgY已成功标记至AuNPs表面,提示已通过静电自组装成功制备了可以特异性识别CA16的IgY-AuNPs。基于FRET技术构建CA16检测体系,体系经优化后,确定IgY-AuNPs的最佳浓度为0.52×10^-3g·L^-1,NaCl的最佳用量为40 μL,荧光恢复最佳时间为90 min,建立的检测方法的标准曲线为I_525nm=15.452IgC-9.746,R²=0.993 2,检测限为1×10⁴ PFU·mL^-1,与临床检测金标准实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法比较,一致率可达93.75%。结论：成功建立了CA16型手足口病病原体的快速检测新方法,可用于实验室和临床检测。     

钙调蛋白及其突变体与电压门控钠离子通道1.2异亮氨酸-谷氨酰胺基序的结合作用

目的: 探讨在不同钙离子浓度下电压门控钠离子通道（Na_V）1.2与钙调蛋白（CaM）的结合,并分析CaM的钙离子结合位点突变后与Na_V1.2结合能力的变化。方法: 应用PCR技术构建Na_V1.2蛋白片段异亮氨酸-谷胺酰胺（IQ）基序的cDNA,采用QIAGEN点突变技术构建CaM突变体（CaM₁₂、CaM₃₄、CaM₁₂₃₄）,应用牵出（pull-down）试验技术检测有钙（100 nmol/L钙离子浓度）和无钙条件下Na_V1.2 IQ与CaM及其突变体（CaM₁₂、CaM₃₄、CaM₁₂₃₄）的结合情况。结果: CaM与Na_V1.2 IQ在无钙和有钙情况下均可互相结合,而单独重组谷胱甘肽-S-转移酶（GST）不具有与CaM结合的能力。无钙条件下CaM与Na_V1.2 IQ的结合量大于有钙条件下两者的结合量（P < 0.05）;无钙条件下,CaM野生型与Na_V1.2 IQ结合量大于CaM突变体与Na_V1.2 IQ的结合量,其中CaM₁₂₃₄的结合能力在三个突变体中最弱（P < 0.05）。结论: CaM及其突变体对Na_V1.2 IQ的结合具有钙离子依赖性,这一CaM调控Na_V1.2新机制为离子通道疾病研究提供了一定依据。     

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎患者脑电图特点的研究进展

抗N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体脑炎是一种针对NMDA受体NR1亚基的自身免疫性疾病,早期以功能性损伤为主,脑电图检查通过记录脑电信号的变化,可以敏感地反映脑功能异常。抗NMDA受体脑炎较为常见的脑电图特点为慢波性异常、癫痫样放电、大量β活动、极度δ刷状波等。本文从上述脑电图模式的波形特点、起源部位、发生机制、临床价值等方面,综述抗NMDA受体脑炎患者的脑电图特点研究概貌。     

膝骨关节炎患者的三维运动解析

背景　膝骨关节炎（KOA）患者发生膝关节变形、活动受限、步态异常等改变,预示KOA是与运动学、动力学等生物力学因素关系密切的一种疾病。而目前临床上缺乏对这些运动学、动力学指标的客观定量评定指标。目的　应用VICON三维运动捕捉系统解析KOA患者的病情,为临床医生治疗、康复计划的制定和实施提供新的重要参考依据。方法　2010年10月-2017年6月,选择上海交通大学医学院附属瑞金医院门诊及住院的双KOA患者10例作为KOA组,另外招募无膝关节疼痛的健康中老年人10例作为对照组。采用英国VICON三维运动捕捉系统对两组受试者进行行走测试,并分析受试者的步行情况和膝关节的生物力学（运动学、动力学）特征。结果　与正常人比较,KOA患者存在明显的步态和生物力学特征：步频、跛行指数、步长、步幅、步速均缩短,双足支撑期、单足支撑期、一步时间、步行周期均延长（P<0.05）;膝关节屈曲角峰值,冠状面最初角度,矢状面、冠状面、水平面膝关节最大活动范围均减小（P<0.05）;膝关节角速度、膝关节角加速度峰值和平均值均减小（P<0.05）;膝关节伸展力矩峰值减小（P<0.05）;Y轴和Z轴方向地板反作用力峰值减小（P<0.05）。结论　KOA患者关节内及其周围生物力学环境发生了明显变化,同时下肢运动出现了异常。而采用VICON运动捕捉系统对KOA患者和正常人进行三维步态分析,有助于更好地了解膝关节运动学和动力学等指标,为KOA诊断、治疗及研究提供重要的参考依据。