超微孔膨体聚四氟乙烯人工心脏瓣膜体外流体力学的评价

目的采用新型高分子材料制备人工心脏瓣膜,并对其体外流体力学特征作出评价。方法将片状超微孔膨体聚四氟乙烯材料缝制于弹性支架上做成人工心脏瓣膜,以Baxter人工双叶机械瓣作对照,对新型瓣膜进行了静态泄漏和定常流测试。结果两种瓣膜静态泄漏率无显著差异(P>0.05),定常流下高分子瓣膜跨瓣压差更低,两组间存在显著差异(P<0.001)。结论新型高分子人工心脏瓣膜体外流体动力学性能优于Baxter机械瓣。     

罗格列酮对多囊肾囊肿衬里上皮细胞p38促分裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

Objective To investigate the effect of rosiglitazone on p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) pathway in polycystic kidney cyst-lining epithelial cells. Methods The cyst-lining epithelial cells (PKD cells) from human polycystic kidney were treated with rosiglitazone (10 μmol/L), peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) inhibitor GW9662 (10 μmol/L), rosiglitazone (10 μmol/L) +GW9662 (10 μmol/L), p38MAPK specific inhibitor SB203580 (10 μmol/L), SB203580 (10 μmol/L)+ rosiglitazone(10 μmol/L) for 2 hours followed by epidermal growth factor (EGF) stimulation. Protein expressions of p38, phuspho-p38 (p-p38) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected by Western blot. p38 mRNA was examined by RT-PCR. Expression of c-fos and c-jun was observed by immunocytochemistry. Results (1) EGF markedly up-regulated the expressions of p38, p-p38, PCNA, c-fos anti c-jun compared with control group (P<0.01). (2) Compared with EGF treated group, rosiglitazone significantly reduced p38 activation and mRNA expression (P<0.01, respectively). Rosiglitazone, rosiglitazone+SB203580 could significantly down-regulated p-p38, PCNA, c-fos and c-jun expression (P<0.01, respectively) with no significant difference between these two groups. (3) GW9662 partially reversed the reduction effect of rosiglitazone. Conclusions Rosiglitazone can inhibit proliferation of autosomal dominant polycystic kidney disease cyst-lining epithelial cells partially through down-regulating p38 activation and reducing c-fos, c-jun and PCNA expression. The above effect of rosiglitazone is in part PPARγ-independcnt.     

人resistin基因原核表达载体构建和表达

[目的]构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础.[方法]酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒.重组表达质粒转化大肠杆菌JM109,经1 mmol/LIPTG在32℃诱导表达2 h,裂解细菌,进行PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达.[结果]RT-PCR扩增产物分子大小为327 bp,序列分析表明为人resistin基因完整编码区.PCR产物与T载体连接、转化大肠杆菌后,从细菌质粒中酶切回收了目的片段.重组表达质粒经EcoRI和KpnI双酶切后能产生出327 bp、4 980 bp大小的两个片段,序列分析表明重组表达质粒包含人resistin基因完整编码区,基因编码无移位,PAGE凝胶电泳表明在细菌裂解上清有分子质量为39.5 kD的融合蛋白.[结论]成功构建了人resistin基因原核表达载体,且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白,为下一步研究打下了实验基础.     

左旋精氨酸与维生素B6对低密度脂蛋白抑制兔胸主动脉内皮舒张功能的影响

目的观察正常人的低密度脂蛋白(native low density lipoprotein,nLDL),人工氧化的低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)及非胰岛素依赖型糖尿病(Non-insulin dependent diabetes mellitus,MDDM)患者的低密度脂蛋白(diabetic low density lipoprotein,dLDL)对兔胸主动脉环内皮的损伤作用及左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg),维生素B6(pyridoxine,VB6)的拮抗效应.方法采用离体动脉环灌流的方法,观察兔胸主动脉环对乙酰胆碱(acetycholine,Ach),钙离子载体A23187的舒张反应.结果3种LDL均抑制动脉环对Ach及A23187的舒张,损伤强度为ox-LDL＞dLDL＞nLDL,并具有浓度依赖性;L-Arg、VB6能明显拮抗LDL的抑制作用,但并不能完全逆转.以SOD作为保护药对照,250 U/ml的浓度能够显著抑制dLDL对内皮的损伤.结论3种低密度脂蛋白主要可能通过降低NO生物活性损伤内皮,L-Arg、VB6具有内皮保护作用.     

高频灰阶超声鉴别良恶性胸肌淋巴结

目的:评价灰阶超声在鉴别良、恶性胸肌淋巴结中的应用价值.材料和方法:研究对象为43枚乳癌患者的胸肌淋巴结,其中16枚为转移性胸肌淋巴结、27枚为非转移性胸肌淋巴结;另有19枚乳腺良性病变患者的胸肌淋巴结和22枚正常者的胸肌淋巴结作为对照组.使用仪器为HDI-3000型彩色多普勒超声诊断仪,配备5～12MHz宽频控头.运用超声测量胸肌淋巴结的长径、轮廓形态、长径-厚度比、髓皮质厚度比,作为鉴别良、恶性胸肌淋巴结的参数,比较良、恶性胸肌淋巴结在形态学上差异.结果:良、恶性胸肌淋巴结的长径、轮廓形态、髓皮质厚度比无显著性差异;恶性淋巴结长径-厚度比(1.7±0.4)明显低于良性淋巴结(2.0±0.5),P＜0.05.结论:灰阶超声在鉴别良、恶性胸肌淋巴结中具有一定的应用价值.     

肝脏缺血再灌注损伤大鼠嘌呤核苷磷酸酶活性的研究

目的:探讨大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注过程中,不同保存液中嘌呤核苷磷酸酶(PNP)活性的变化.方法:将大鼠肝脏在3种不同保存液中低温保存不同时限后,用37℃Krebs-Henseleit液连续循环灌注90min,分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性的变化.结果:经过8 h的低温保存,再灌注90min后,HTK保存的肝脏中PNP明显高于UW和Celsior;经过16 h的低温保存后,再灌注60min前,HTK保存的肝脏中PNP明显高于UW和Celsior;60min后HTK和Celsior保存的肝脏中PNP明显高于UW;经过24 h的低温保存后,再灌注15min后,HTK保存的肝脏中PNP明显高于Celsior,而Celsior又明显高于UW.结论:随着低温保存和再灌注时间的延长,大鼠肝脏中PNP逐渐增高且UW液的保存效果明显优于HTK和Celsior     

慢性乙肝患者血清细胞因子、乙肝病毒与肝纤维化的关系

目的：探讨慢性乙肝患血清细胞因子（TGF－β，TNF-α，IL-6，IL-8），乙肝病毒（HBV）对肝纤维化（HA，PCⅢ，C-Ⅳ，LN）的影响作用。方法：采用ELISA和RIA方法检测171例慢性乙肝患血清TGF－β，TNF-α，IL-6，IL-8，HLA，PCǚ，C-Ⅳ，LN的水平，HBV－DNA定量检测采用PCR方法。结果：慢性乙肝患血清TGF－β，TNF-α，IL-6，IL-8，HA，PCⅢ，C-Ⅳ，LN的含量均不同程度高于对照组，且随肝损害程度的加重而升高，与肝损害程度呈正相关关系（P＜0．05或P＜0．01）；须血清TGF－β1水平与血清HA，PCⅢ，C-Ⅳ，LN水平具有直线相关关系。HBV－DNA阳性组（Ⅱ组）均高于HBV－DNA阴性组（I组），且在慢性中，重度肝炎间差异显（P＜0．05）。结论：血清TGF－β，TNF-α，IL-6，IL-8参与慢性乙肝的发病机制及肝纤维化的形成，且与病毒复制的活跃程度相关。     

粘连性小瞳孔白内障超声乳化吸除及人工晶状体植入术

目的探讨粘连性小瞳孔白内障超声乳化吸除手术方法及技巧。方法对36例(42眼)粘连性小瞳孔白内障行超声乳化吸除及人工晶状体植入术,术中不分离虹膜后粘连,利用拦截劈裂法乳化晶状体核,通过4mm大小瞳孔完成手术。结果所有病例视力有不同程度提高,获得生理性圆或近圆瞳孔,主要并发症包括角膜内皮水肿,前房纤维素渗出。结论采用本方法治疗粘连性小瞳孔白内障操作相对简单,术后反应轻,并发症少。     

阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶eDNA克隆和序列分析

目的 近年研究表明Rab11鸟苷三磷酸酶在调节各种真核细胞的膜转运通道中发挥着重要作用。但是，对于原生动物毛滴虫膜转运系统的研究仍甚少。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rabll鸟苷三磷酸酶基因，以便进一步探讨其功能。方法 使用SMART cDNA文库构建试剂盒构建阴道毛滴虫cDNA表达文库，用生物信息学进行TvRab11同源分析，鉴定TvRab11基因，用PCR方法扩增基因组DNA，TA克隆TvRab11 cDNA、测序及序列分析。结果 在分离出的cDNA克隆中发现一个Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因。该cDNA序列长710bp，读码框含636bp，推测蛋白质序列具211个氨基酸。序列分析表明该基因系Rab11亚家族的同源基因，其推测肽链与拟南芥Rab11c的同源性晟高（一致性60％，相似性79％），与人类Rab11b次之（一致性58％，相似性78％）。该氨基酸序列拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域和特异性Rab结构域（RabF1-5）。进化树分析也表明该基因系Rab11的同源基因。序列分析还显示该基因的基因组DNA序列与cDNA序列完全一致．提示该基因无内含子。结论分析表明该基因是阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因，其功能有待进一步研究。