miR-126-5p通过靶向 Peli2影响糖尿病肾病肾小管上皮细胞上皮 -间质转化发生

目的 探讨微小RNA-126-5p(miR-126-5p)通过靶向pellino E3泛素蛋白连接酶家族成员2(Peli2)影响糖尿病肾病肾小管上皮细胞上皮-间质转化(EMT)发生的分子机制.方法 本研究起止时间为2018年12月至2019年12月.体外培养人肾小管上皮细胞HK-2(美国ATCC),分别使用5 mmol/L、30 mmol/L的D-葡萄糖处理细胞48 h,分别记作对照组、模型组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-126-5p、Peli2的表达水平.利用脂质体转染法分别将miR-126-5p寡核苷酸模拟物(miR-126-5p mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、Peli2小分子干扰RNA(si-Peli2)及其阴性对照(si-NC)转染至HK-2细胞,使用30 mmol/L的D-葡萄糖处理细胞48 h.Western blot检测上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指蛋白(Snail)表达量;双荧光素酶报告实验验证miR-126-5p与Peli2的靶向关系.结果 与对照组相比,模型组miR-126-5p[(1.00±0.10)比(0.32±0.03)]、E-Cadherin[(0.86±0.09)比(0.35±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05),Peli2[(0.42±0.04)比(1.05±0.11)]、N-Cadherin[(0.45±0.05)比(0.99±0.10)]、Vi?mentin[(0.32±0.03)比(0.92±0.09)]、Snail[(0.22±0.02)比(0.75±0.08)]的表达水平显著升高(P<0.05);转染miR-126-5p mimics,与转染miR-NC相比,E-Cadherin[(0.34±0.03)比(0.75±0.08)]的表达水平显著升高(P<0.05),N-Cadherin[(1.02±0.11)比(0.53±0.05)]、Vimentin[(0.95±0.10)比(0.48±0.05)]、Snail[(0.72±0.07)比(0.36±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05);转染si-Peli2后,与转染si-NC相比,E-Cadherin[(0.24±0.03)比(0.70±0.07)]的表达水平显著升高(P<0.05),N-Cadherin[(1.05±0.12)比(0.50±0.05)]、Vimentin[(0.96±0.10)比(0.38±0.04)]、Snail[(0.74±0.07)比(0.40±0.04)]的表达水平显著降低(P<0.05);miR-126-5p能够特异性结合Peli2,Peli2是miR-126-5p的靶基因;Peli2过表达后可明显逆转miR-126-5p过表达对高糖诱导的HK-2细胞EMT的影响.结论 miR-126-5p通过靶向Peli2抑制糖尿病肾病肾小管上皮细胞EMT发生.     

HPLC法测定盐酸左西替利嗪口腔崩解片的含量

目的建立高效液相色谱法测定盐酸左西替利嗪口腔崩解片含量的方法。方法采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,3μm),流动相为庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠0.5 g,加水1 000 mL使溶解,用稀硫酸调节pH值至3.0)-乙腈(70∶30),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为230 nm,柱温为30℃。结果盐酸左西替利嗪在60.38～140.90μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为99.64%,RSD为0.59%。结论本方法简便、快速、准确,可用于盐酸左西替利嗪口腔崩解片的质量控制。     

新药投资价值评估中实物期权的应用研究

新药研发投资存在着巨大的不确定性,而实物期权法则是近年来发展起来的研究不确定性和投资风险的一种评估工具。本文运用这一最新技术对新药研发领域中的专利技术和新药研发实例进行了投资价值评估,并与传统的净现值法结果进行比较。研究分析表明,实物期权法能够更好地解决新药研发的不确定性,能对新药研发的风险价值进行更准确的评估。     

地佐辛与酮咯酸氨丁三醇在颈髓过伸伤的镇痛效果比较

目的 回顾性分析比较地佐辛与酮咯酸氨丁三醇在颈髓过伸伤中不同疼痛程度的患者的镇痛效果,指导合理选择镇痛药物. 方法 回顾性分析2012年12月至2015年12月解放军第98医院80例颈髓过伸伤出现痛觉过敏患者的病历资料,以长海痛尺评分评定患者疼痛程度,长海痛尺评分≥3分为用药指征,随机分为观察组和对照组,观察组给于地佐辛7.5mg肌注,对照组给于酮咯酸氨丁三醇60mg肌注,比较2组对于不同疼痛程度患者用药后疼痛评分情况,3分以下为有效,≥3分为无效镇痛,并观察2组用药后发生的不良反应情况. 结果 从镇痛有效率比较,2组用药30min后,中重度疼痛,观察组有效率100.0%,对照组有效率94.7%,差异无统计学意义(P>0.05),均为有效镇痛.剧烈以上疼痛,观察组镇痛有效率95.0%,对照组有效率仅为42.9%,差异有统计学意义(P<0.01),地佐辛镇痛效果优于酮咯酸氨丁三醇.从镇痛前后疼痛评分比较,2组在中重度疼痛镇痛后评分差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照组剧烈以上疼痛镇痛后评分分别为(1.32±0.99)、(3.40±2.20),差异有统计学意义(P<0.05).观察组药品不良反应发生率(20.0%)高于对照组(7.5%),差异有统计学意义(P<0.05). 结论 在颈髓过伸伤的镇痛治疗中,中重度疼痛可选择地佐辛或酮咯酸氨丁三醇,剧烈以上疼痛地佐辛镇痛效果明显优于酮咯酸氨丁三醇,但地佐辛不良反应率较高,因此临床用药上建议根据疼痛评分来合理选择镇痛药.     

超高效液相色谱串联质谱法分析磺苄西林钠原料中的杂质

目的建立超高效液相色谱串联质谱法分析磺苄西林钠原料中的杂质,并初步确定杂质的结构。方法采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以10 mmol.L-1乙酸铵溶液-甲醇(90∶10)为流动相,以电喷雾电离源负离子模式进行质谱数据采集。结果获得磺苄西林和磺苄西林杂质的色谱图以及液相色谱图对应的质谱图,对谱图进行分析归纳,推测磺苄西林样品中2个未知杂质的结构分别为磺苄西林噻唑酸和磺苄西林噻唑酸甲酯化产物。结论本方法快速、灵敏、专属性高,对磺苄西林钠的生产和质量控制具有指导意义。     

药品“零差率”销售对某三级医院门诊西药房用药的影响

目的:调查分析实施药品"零差率"销售后,某三级医院门诊西药房用药变化情况,分析新的药物政策的利与弊,为政策进一步推广提供借鉴。方法:选取该院的门诊西药房为调查对象,统计政策实施前(2012年1-6月)与政策实施后(2013年1-6月)的数据,运用Excel软件进行统计,分析"零差率"销售前后药品使用情况的变化。分别从2012年5月和2013年5月的处方中随机抽取200张,共400张处方,点评处方的合理用药问题。结果:实施药品"零差率"销售政策后,各类药品销售金额有所增加。该院门诊西药房使用量居前的10大类药品中,2013年5月的总销售金额比2012年5月增加了702 533.84元(上升22.32%);销售金额排序列前10位的药品有一定变化;门诊月处方量、门诊销售金额均较2012年5月有增长,但平均单张处方金额略有下降;抽查处方的平均每张处方使用药品数减少,使用抗菌药物的处方数增加,处方点评的合理率有所提高。结论:实行药品"零差率"销售政策后,规范了用药,吸引了更多患者到医院就诊,对门诊合理用药有一定促进作用。     

2012-2017年西充县人民医院药品不良反应报告分析

目的 分析西充县人民医院2012-2017年药品不良反应（ADR）发生的规律和特点,为进一步加强该院ADR监测水平和临床安全用药提供参考。方法 对西充县人民医院2012-2017年ADR报告进行整理汇总,对患者性别组成、年龄分布、给药途径,ADR类型以及药品种类等进行统计分析。结果 2012-2017年ADR报告例数逐年上升,共纳入843例ADR报告进行分析,其中男性占50.42%,女性占49.58%;老年患者ADR发生率占比最高;抗感染药物类、消化系统类药物、心血管系统类药物以及电解质和营养药ADR发生率较高,但抗感染药物ADR发生风险呈现逐年下降的趋势。结论 近6年来西充县人民医院ADR报告质量逐年提升,但仍需持续提高药品管理水平,规范医疗用药的合理性和安全性,减少患者用药的不适感和安全风险,以期促进该院不良反应监测工作上升到一个新台阶。     

基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌相关疾病机制及实验验证

目的 基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌（Hp）相关疾病机制,研究三七中有效活性成分人参皂苷Rb₃对Hp造成的胃上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法 使用Herb数据库收集“三七”的相关预测靶点,使用Gene Cards数据库收集Hp相关疾病的靶点;使用Draw Venn Diagram网站绘制Venn图,得到靶点交集;进行蛋白互作（PPI）网络分析、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。将GES-1细胞分为对照组、模型组及人参皂苷Rb₃低、中和高浓度（1、5、10 μ mol· L^-1）组,人参皂苷Rb₃组使用相应浓度的人参皂苷Rb₃预处理,培养过夜12 h至融合度为70%～80%。Hp悉尼株1 （SS1）按感染复数（MOI） 100加入细胞中制备损伤模型,人参皂苷Rb₃继续给药,共培养48 h。对照组不加SS1,对照组和模型组不加药。改良吉姆萨染色后通过光学显微镜观察细胞形态;结合Hoechst 33342荧光染色和Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒法检测活性氧（ROS）水平;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测凋亡相关基因TP53、Bax、Bcl-2表达量;Western blotting法检测P53、p-Akt、cleaved/pro-Caspase 9、Bcl-2、Bax、cleaved/pro-Caspase 3的蛋白表达情况。结果 网络药理学结果表明三七治疗Hp相关疾病的靶点共16个,其PPI网络分析得到按度值大小排名前6位靶点为TP53、CASP3、PTGS2、IL6、TNF、IL1β。GO富集分析与KEGG富集分析结果均显示与凋亡相关。与模型组比较,经人参皂苷Rb₃处理后,GES-1细胞的细胞核染色质致密深染,破裂的细胞逐渐减少;Hoechst 33342荧光染色细胞核强荧光数目明显减少;细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;ROS水平显著降低（P＜0.05）;TP53与Bax的mRNA水平显著降低,Bcl-2 mRNA水平显著升高（P＜0.05）; p-Akt、Bcl-2蛋白表达显著升高（P＜0.05）,P53、Bax、cleaved/pro-Caspase 9与cleaved/pro-Caspase 3蛋白表达显著降低（P＜0.05）。结论 三七可能通过包括炎症及凋亡在内的多种途径治疗Hp相关疾病,人参皂苷Rb₃对Hp诱导的胃上皮细胞凋亡发挥显著改善作用,其可能机制是降低氧化应激水平,并调节Akt的磷酸化和P53的表达。     

H_2O_2预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用

目的　探讨H2 O2 预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用及与脑源性神经营养因子 (brain de rivedneurotrophicfactor,BDNF)的关系。 方法　采用MTT法检测细胞活力 ,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡 ,间接免疫荧光流式细胞术检测细胞BDNF的表达。结果　PC12细胞经 10 μmol·L-1H2 O2 预处理 90min后 ,2 0～ 6 0 μmol·L-1H2 O2 对PC12细胞生长的抑制程度明显下降 ,H2 O2 (2 0、30μmol·L-1)对PC12细胞凋亡的诱导作用明显受到抑制 ,BD NF的表达强度增强。结论　H2 O2 预处理对PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用 ,其作用机制可能与增加脑源性神经营养因子表达有关     

针灸治疗腰痛的国内外研究评述

本研究回顾2005年至今国内外针灸治疗腰痛的研究,发现国内外研究的侧重点不同。国内研究侧重于某个穴位或某种针刺方法治疗腰痛效果,而国外学者研究的重点是针刺是否有效。通过对国内外研究的分析,提出增加样本量、明确纳入标准、采用适当和充足的针刺治疗方法、延长随访时间等建议,希望对今后的针灸治疗腰痛研究有所帮助。