几种具有抗疲劳、抗缺氧作用的藏药植物资源

由于藏民族主要生活在高海拔地区,因此在藏药中有许多著名的抗疲劳、抗缺氧药用植物资源,如红景天、沙棘等。本文整理了沙棘、冬虫夏草、蕨麻和红景天等几种(类)具有抗疲劳、抗缺氧作用藏药植物资源及其目前有关这些植物资源的开发利用研究状况,以期为开发运动员专用保健饮料和保健食品提供参考。     

UHRF1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及作用机制

目的 了解基因UHRF1的不同表达水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制。方法 利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V试剂盒测定细胞凋亡;Western blot 测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变(着丝粒环和双着丝粒)。 结果 与对照相比较,UHRF1转染可将D₀值由2.08 Gy提高至3.17 Gy,即降低MDA-MB-231细胞对X射线的辐射敏感性。利用siRNA抑制UHRF1的表达,可将X射线照射后细胞的生存率由41%降低至17%,即增强了细胞的辐射敏感性。UHRF1的高表达,可诱导G₂/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和 Ku80的表达水平,而且,抑制X射线诱导的染色体畸变。结论 UHRF1的高表达可以抑制细胞凋亡,促进DNA损伤修复。因此,通过抑制UHRF1的表达,可作为临床提高乳腺癌放疗疗效的新靶标。     

震后6个月都江堰地区青少年创伤后应激症状及相关因素

目的:了解汶川地震6个月后都江堰地区青少年创伤后应激症状(Posttramatic Stress Symptoms,PTSS)的检出率及人群特征,并分析其相关因素。方法:采用便利取样,选取都江堰市区内学校规模较大、学生生源来自城镇和农村的一所初中和一所高中,抽取学生2004人,其中初中7～9年级777人(年龄11～14岁),高中10年级1227人(年龄15～17岁),用心理创伤后应激障碍自评量表(Post-Trau-matic Stress Disorder Self-rating Scale,PTSD-SS)、青少年自评生活事件量表(Adolescent Self-rating Life E-vent Checklist,ASLEC)、儿童简易应付方式问卷(Children Simple Coping Style Questionnaire,CSCSQ)、自编一般人口学及地震暴露情况调查表评估创伤后应激症状及其相关因素。结果:(1)PTSS的检出率为15.9%,女生检出率高于男生(19.0%vs.12.2%,P0.05),15～17岁年龄组检出率高于11～14岁年龄组(19.4%vs.10.4%,P0.05);(2)使用协方差分析后,女生PTSD-SS总分仍高于男生,15～17岁组仍高于11～14岁组,农村学生仍高于城镇学生[(39.0±14.0)vs.(35.6±13.6),(39.2±15.1)vs.(34.8±11.4),(40.0±15.7)vs.(36.7±13.3),Ps0.05],但非独生子女与独生子女间PTSS-SS总分差异无统计学意义(P=0.260);(3)较多的震后负性生活事件(β=0.387)、消极应对方式(β=0.258)、有家人伤亡(β=0.184)、其他财产损失(β=0.059)和目睹经历(β=0.136)是PTSS的危险因素(Ps0.05),而积极应对对PTSS有保护作用(β=-0.178,P0.001)。结论:震后6个月都江堰地区青少年创伤后应激症状的检出率依然较高;减少灾后负性生活事件的发生并引导学生采用积极的应对方式,对促进其心理康复有重要作用。     

慢性乙型肝炎高胆红素血症患者氧化损伤的研究

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）高胆红素血症患者氧化损伤的情况。方法75例血清总胆红素（TBIL）高于正常上限值（ULN）的CHB患者,按TBIL为ULN的倍数分为A、B、C、D、E五组。测定患者血清丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、维生素C（VC）、维生素E（VE）浓度,并做出统计分析。11例健康志愿者为正常对照组,16例乙肝表面抗原（HBsAg）携带者为携带者组。结果各患者组与正常对照组比较：MDA、XOD浓度升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,VCVE浓度降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;携带者组与正常对照组比较：XOD浓度升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,MDA、VC、VE浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。在CHB高胆红素血症患者中,MDA、XOD浓度与TBIL水平呈正相关（r=0．670,P〈0．01;r=0．737,P〈0．01）;VC、VE浓度与TBIL水平呈负相关（r=-0．463,P〈0．01;r=-0．247,P〈0．05）。各患者组间的比较：除A、B组间外,其余各组间MDA浓度差异有统计学意义（P〈0．05）;A、B、C组与D、E组间XOD浓度差异有统计学意义（P〈0．05）;A组与D、E组,B、C、D组与E组间VC浓度差异有统计学意义（P〈0．05）;A、B组与E组间VE浓度差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CHB高胆红素血症患者体内存在氧化-抗氧化功能障碍,血清TBIL水平升高时氧化损伤程度加重。HBsAg携带者体内氧化损伤程度不高。抗氧化损伤可能有助于CHB高胆红素血症患者的治疗。     

黏膜免疫壳聚糖-多胺转运蛋白D(PotD)DNA纳米微粒对小鼠鼻咽部肺炎链球菌定植的保护作用研究

目的 探讨以壳聚糖包裹的PotD DNA(Chitosan-potD)纳米微粒经鼻黏膜免疫小鼠对肺炎链球菌鼻咽部定植的保护作用.方法 将制备的Chitosan-potD微粒、裸pVAX1-potD重组质粒(裸potD)及pVAX1分别鼻腔免疫小鼠,收集黏膜和血清标本用以检测特异性抗体水平;分离并培养脾淋巴细胞,检测IL-17A、IL-4及IFN-γ的分泌水平;于免疫小鼠鼻腔进行肺炎链球菌攻击,通过菌落计数评估各免疫组对小鼠肺炎链球菌鼻咽部定植的保护作用.结果 Chilosan-potD纳米微粒在小鼠体内诱导产生的抗PotD特异性血清IgG、IgG1、IgG2a、黏膜IgA抗体水平及IL-17A、IL-4、IFN-γ水平与裸potD组及pVAX1组相比均明显升高,且差异具有统计学意义(P<0.05);菌落计数结果 显示,Chitosan-potD微粒组在鼻咽部定植的肺炎链球菌数量显著减少(P<0.05).结论 壳聚糖包裹PotD DNA微粒对肺炎链球菌鼻咽部定植具有免疫保护作用.     

PBL教学法在八年制医学免疫学理论教学中的实践

PBL教学法是我国教学发展改革的方向之一,为了探索八年制医学免疫学理论课教学的新方法,从2007年起我们将传统教学与PBL教学法相结合的新模式应用于我院2004和2005级八年制医学免疫学的理论教学中。先以传统教学方法课堂讲授基础知识,然后安排PBL讨论课,学生进行自由讨论和发言,教师从旁引导;通过课堂反应和问卷调查评估教学效果。结果表明,这种新的教学模式受到了学生的欢迎和认可,教学效果良好。     

不同类型冠心病患者血清炎性标志物的检测水平及意义

目的探讨重要炎症因子白细胞介素IL-6、IL-10、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间粘附分子-1（sICAM-1）在冠心病发病过程中的作用及其临床意义。方法采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）检测各冠心病组及对照组上述炎症因子水平并进行比较分析。结果冠心病组IL-6、IL-10、CRP、TNF-α、sICAM-1水平与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）,不稳定型心绞痛（UAP）组CRP、TNF-α、sICAM-1水平高于稳定型心绞痛（SAP）组（P〈0.05）,而两者间IL-6、IL-10差异无统计学意义（P〉0.05）;急性心肌梗死（AMI）组IL-6、IL-10、CRP、TNF-α、sICAM-1水平均高于SAP组及UAP组,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论 IL-6、IL-10、CRP、TNF-α、sICAM-1参与了冠心病的发生发展,其水平与冠心病病情严重程度密切相关,可能是冠状动脉粥样硬化的标志。     

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达。结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48h后细胞凋亡比例增加(P<0.01)。NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高。结论利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值。     

JNK信号通路调控大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡

目的 从基因转录水平了解JNK信号通路在大鼠再生肝8种细胞中的作用。方法 用密度梯度离心和免疫磁珠等方法分离肝细胞（HC）、胆管上皮细胞（BEC）、卵圆细胞（OC）、肝星形细胞（HSC）、窦内皮细胞（SEC）、库普弗细胞（KC）、陷窝细胞（PC）、树突状细胞（DC）等8种肝脏细胞,用大鼠Genome 230 2.0芯片检测大鼠再生肝8种细胞的基因表达谱,用生物信息学和系统生物学等方法分析基因表达变化预示的JNK信号通路在调控大鼠再生肝8种细胞增殖、凋亡中的作用。用实时荧光定量PCR方法验证了芯片结果的可靠性。结果 JNK信号通路涉及240个基因和42条途径,其中,225个基因与大鼠肝再生相关。基因协同作用分析显示,在大鼠肝再生启动阶段,JNK信号通路启动HC和KC增殖,促进OC凋亡,启动部分PC和SEC增殖和促进部分PC和SEC凋亡;在进展阶段,JNK信号通路促进HC、BEC、KC和DC增殖,促进部分PC增殖、部分PC凋亡。在终止阶段,JNK信号通路促进HC、OC和PC凋亡,促进部分KC增殖、部分KC凋亡。结论 大鼠肝再生中JNK信号通路的42条途径和225个基因参与调控大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡。     

Let-7维持乳腺癌干细胞的特性及机制的研究

目的:研究let-7在乳腺癌干细胞中的表达,探索let-7影响乳腺癌干细胞的特性及机制。方法:采用SP分选法,分选乳腺癌细胞系MCF-7中的SP及NSP细胞亚群;运用实时定量PCR法检测MCF-7细胞系中SP、NSP亚群let-7a/b/c的表达;通过Western blot法检测Ras、ERK蛋白在MCF-7细胞系中SP、NSP亚群中的表达,探索let-7维持乳腺癌干细胞特性的机制。结果:SP侧群细胞占MCF-7细胞的3.3%,加入维拉帕米抑制干细胞外排荧光染料Hoechst33342的功能后,SP侧群细胞占乳腺癌MCF-7细胞的比例下降至0.4%。Let-7miRNA在SP细胞中的表达低于NSP细胞,其中let-7b/c在SP及NSP亚群中表达差异最大;p-Ras、p-ERK在SP细胞中的表达高于NSP细胞,t-Ras及t-ERK的表达无明显差异。结论:SP法是一种可有效分离干细胞的方法,乳腺癌细胞系MCF-7中存在肿瘤干细胞亚群;let-7在乳腺癌干细胞中的表达低于普通肿瘤细胞,而p-Ras、p-ERK在乳腺癌干细胞中的表达高于普通肿瘤细胞,let-7的低表达失去了对Ras mRNA的抑制,使Ras信号转导通路激活,进而磷酸化的p-Ras和p-ERK表达升高,维持乳腺癌干细胞的功能。