中国92例HIV/AIDS患者HIV-1 gp41 2F5和4E10中和抗体表位变异研究

目的 探讨92例HIV/AIDS患者HIV-1病毒近膜端(membrane proximal external re-gion,MPER)中和抗体2F5和4E10保守表位ELDKWA、NWFDIT氨基酸变异特点,为中国HIV/AIDS患者免疫治疗以及疫苗设计提供数据.方法 Nest-PCR扩增HIV-1 env区gp41段基因,核酸序列测定,翻译为氨基酸与HIV-1 Sequence Database HXB Ⅱ参考株中和抗体表位数据比对,分析2F5、4E10中和表位氨基酸变异情况.结果 92例HIV/AIDS患者HIV-1外膜蛋白env gp41段中和抗体2F5、4E10保守表位氨基酸均存在突变;2F5中和抗体表位主要有E662A(14.1%)、K665S(17.4%)、A667K(16.3%)突变;4E10中和抗体表位主要有N671S(13.0%)、D674S(3.3%)、T676S(16.3%)突变;CRF_B'C亚型与B'亚型的2F5和4E10表位氨基酸突变差异具有统计学意义(P<0-05);CRF_B'C与CRF01_AE亚型2F5表位突变差异具有统计学意义(P<0.05);B'亚型缓慢进展者、HIV感染者和AIDS患者的4E10表位氨基酸突变差异具有统计学意义(P<0.05).结论 92例HIV/AIDS患者HIV.1包膜蛋白env gp41段中和抗体2F5、4E10中和表位氨基酸存在突变,且变异多样化;不同亚型中和抗体保守表位氨基酸位点变异有差异;B'亚型4E10中和抗体表位变异可能与疾病进展有一定联系.     

HA/PDLLA复合材料的体内成骨过程研究

目的研究HA／PDLLA复合材料植入体内后与细胞、组织的相互作用，探讨HA／PDLLA复合材料在体内的成骨过程，为其临床应用及设计具有生物功能的人工骨替换材料和骨组织工程支架材料提供依据。方法采用液相吸附法制备了HA／PDLLA复合材料，以纯PDLLA和空白组进行对照，进行体内植入实验，通过组织学观察和四环素标记考察其成骨过程。结果HA／PDLLA复合材料植入机体后，体内的无菌性炎症轻微，新骨形成速率高于PDLLA材料。HA微粒的存在，加强了复合材料的机械强度，使之可以避免过早的丧失力学强度。第24w时，材料被组织分隔包裹，新生骨组织长入材料，骨愈合情况良好。结论HA／PDLLA复合材料具有良好的生物相容性、生物降解性能、生物学活性和骨传导性能。     

1049例育龄妇女下生殖道感染情况调查

目的了解育龄妇女下生殖道感染情况,为育龄女性生殖健康提供进一步的数据资料。方法对1049例来自健康体检中心的21~40岁育龄妇女的阴道后穹窿及宫颈分泌物标本进行检测,阴道清洁度、滴虫采用显微镜镜检法,淋球菌、解脲支原体、人型支原体、真菌采用培养法,沙眼衣原体则采用免疫层析法。检测结果进行统计学分析。结果女性生殖道感染的感染率为53.3%,其中混合感染率为9.8%,而清洁度异常率仅为28.4%;前三位病原体感染依次为解脲支原体(35.9%)、衣原体(18.1%)、真菌(6.7%)。结论女性生殖道感染情况严重,具有隐匿性,应加强对无症状感染的育龄妇女的监测。     

骨形成蛋白-7对人肾小管上皮细胞株HK-2凋亡的影响

研究不同浓度的骨成形蛋白 7(BMP 7)对人近曲小管上皮细胞株HK 2凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。应用Hoechst 332 5 8荧光染色、DNA电泳检测凋亡细胞的形态学和生化改变 ,流式细胞仪定量检测细胞的凋亡率 ,并观察凋亡特异性蛋白酶Caspase 3活性变化的情况。结果显示 ,HK 2细胞加入 1 0ng/mlTGF β处理 2 4h后 ,可明显抑制细胞生长并诱导细胞凋亡 ,呈现明显的凋亡形态学改变 ,胞核或核质内可见浓度致密的颗粒状荧光 ,DNA电泳呈现典型的“梯形条带” ,而预先加入 5 0ng/ml、 1 0 0ng/mlBMP 7共处理 2 4h后 ,可减轻TGF β对细胞的抑制作用 ,凋亡细胞亦减少 ,Caspase 3蛋白酶活性明显下降 ,细胞凋亡率下降。提示BMP 7对人肾小管上皮细胞凋亡的具有抑制作用 ,可能是通过抑制Caspase蛋白酶活性而实现的     

慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞的表达

目的：探讨慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞表达水平及意义。方法：采用流式细胞术测定40例慢性肾功能不全患者外周血CD4’T细胞占淋巴细胞（CD45^＋细胞）的比例及CD4^＋CD127^-Treg、CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果：慢性肾功能不全各组患者外周血CD4^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例显著低于健康对照组，而CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例较健康对照组无显著性差异，代偿期患者CD4^＋T占淋巴细胞的比例跟健康对照组相比，没有统计学差异，其余各期均显著高于健康对照组。患者CD4^＋T细胞占淋巴细胞的比例，CD4^＋CD127^-Treg、CD4＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例与血清BUN和Cr值之间没有相关性。结论：慢性肾功能不全患者外周血CD4^＋T细胞数量增高，CD4^＋CD127^＋Treg数量降低，免疫功能异常。     

1型糖尿病及肥胖儿童血清瘦素水平及与其它常用指标相关性分析

目的比较1型糖尿病及肥胖儿童血清瘦素水平。方法以EL1SA方法测定35例1型糖尿病、32例肥胖及35例健康儿童的血清瘦素水平。35例1型糖尿病患者中 ,7例为新患糖尿病伴酮症酸中毒的患者。通过测定C -肽水平来评估胰岛素的分泌。C -肽、血糖、糖化血红蛋白按常规方法测定。结果糖尿病患者血清瘦素水平低于对照组 (P<0.001)。肥胖儿童血清瘦素及C -肽水平高于糖尿病组及对照组。在糖尿病新患者中 ,经1个月的胰岛素治疗后 ,血清瘦素水平未有任何变化 (P>0.05)。在联合组中 ,瘦素与体重指数 (bodymassindex,BMI)及C -肽呈正相关(P<0.001) ,而与血糖及糖化血红蛋白呈负相关(P<0.05)。结论1型糖尿病患儿血清瘦素水平低可能与代谢控制有关的慢性胰岛素缺乏引起的。瘦素及胰岛素在保持身体体重稳定的过程中可能起着补充作用。     

长期体外反搏对冠状动脉闭塞犬的促血管新生作用研究

目的 探索长期体外反搏对冠状动脉闭塞犬心肌微血管和血管新生作用的影响以及对循环和心肌局部血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 雄性Beagle犬12只,随机分为对照组(n=6)和反搏组(n=6),均用心导管法建立定向冠状动脉闭塞模型3 d后,反搏组接受体外反搏处理,每日1 h,持续共6周(每只犬反搏总时间28～30 h).血管细胞成分免疫标记技术比较心肌微血管的差异和血管新生作用.双抗体夹心ELISA法测定犬血清VEGF水平动态变化.免疫组化SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色超敏法)测定心肌组织局部VEGF的表达.RT-PCR检测心肌组织局部VEGF Mrna的表达.结果 (1)图像分析证实,反搏组犬缺血心肌组织内的微血管的数量显著高于对照组[α-actin:(11.8±5.3)支/HP比(3.4 ±1.2)支/HP,P＜0.05 ;FⅧ-r-Ag :(15.2±6.3)支/HP比(4.9±2.1)支/HP, P＜0.05].(2)冠状动脉急性闭塞后,两组犬的血清VEGF水平开始升高,在24 h均达到一峰值水平,随后VEGF水平下降,约在1周时降至最低.之后两组犬的血清VEGF水平有轻微增加,但组间变化差异无统计学意义.(3)反搏组犬缺血心肌组织的VEGF表达范围较广泛,但绝大部分仍分布于心肌细胞,少数分布于血管内皮细胞和成纤维细胞.相反,在对照组,心肌VEGF阳性表达的范围和强度均不及反搏组.(4)免疫组化图像分析发现,反搏组犬心肌VEGF表达的面积[(0.0353±0.0090)mm2比(0.0036±0.0008)mm2,P＜0.01]、吸光度指数[(3.0391±0.5121)比(0.3473±0.0840),P＜0.01)]均高于对照组;对两组心肌组织VEGF Mrna的表达进行半定量分析,结果反搏组犬心肌VEGF Mrna的表达显著高于对照组(P＜0.01),增加73.5%.结论 长期体外反搏治疗促进冠状动脉侧支循环和新生血管形成,促进缺血心肌组织局部VEGF蛋白和Mrna水平的表达可能是体外反搏的治疗机制之一.     

抗蓖麻毒素A链人源化单域抗体的设计、原核表达及生物活性检测

目的 运用计算机辅助蛋白质分子设计的方法设计针对蓖麻毒素A链(RTA)的拮抗肽,实现在大肠杆菌B121中的可溶性表达,并对其生物学活性进行评价.方法 根据RTA的晶体结构、RTA-rRNA相互作用复合物模型,在CVFF(consistent-valence force field)、Amber力场下,对RTA的空间构象进行理论模拟,初步确定其生物活性功能域;然后针对该功能域设计小分子拮抗肽,并借助人抗体重链町变区骨架,在CDR3区对拮抗肽进行展示,用重叠延伸PCR全基因合成人源化的单域抗体并克隆至载体pET-32a(+);双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPrG诱导人源化的单域抗体表达,用镍离子亲和层析纯化,竞争ELISA和MTT法分别进行结合和中和活性检测.结果 从头搭建并设计合成了人源化的单域抗体,实现了其原核表达,并进行了牛物活性检测;建立了基于人源化的单域抗体的RTA和蓖麻毒素检测方法.结论 研究结果为新型蓖麻毒素小分子拮抗剂的研制奠定了理论和实验基础.     

三维超声测胎儿股容积估计胎重的价值

目的通过对57例妊娠分别使用二维、三维超声测量相关参数估计胎重，并作统计学比较，从而评价三维超声对于估测胎儿体重、诊断胎儿发育迟缓及巨大胎的优势和价值。方法对2005年10月至2006年3月间在我院分娩的57例妊娠，研究组用三维超声测胎儿股容积估计胎重，对照组用二维超声同步测量相关参数估计胎重。结果对两组估重结果与胎儿实际出生体重作相关统计学分析，研究组相关系数为0．983，对照组为0．906（P〈0．05），前者与实际体重关系更密切。结论三维超声测量胎儿股容积估测胎儿体重，较传统二维超声具有更大优势，对于发现胎儿发育迟缓（FGR）及巨大胎意义重大，有利于指导临床冶疗、选择分娩方式。     

基础护理操作课中主体性教学的运用

基础护理是一门实践性较强的学科,传统教学过分注重教师“教”的过程,没有真正发挥学生的主体作用。主体性教学强调以学生为本,调动学生学习的主动性、积极性,充分发挥学生的主体作用,学生是整个教学活动的主角,教师作为教学活动的设计者和组织者起主导作用[1]。我们在基础护理操作课中采取了主体性教学法,并与传统教学法进行了对比研究,现报告如下。1资料与方法1.1实验对象我校护理系2002级大专学生共144名(其中军护82名,高职62名),年龄18~22岁。教学前调查显示两组学生在一般情况、学习态度、表现和成绩方面无显著差异,具有同质性。1.2实…