筛选心肌缺血再灌注大鼠差异表达基因

目的：利用抑制性消减杂交技术，筛选出大鼠心肌缺血再灌注的差异表达基因，以期通过基因线索探讨其损伤机制。方法：实验于2006—03／10在中山大学中山医学院完成。①实验分组：Sprague-Dawley雄性大鼠40只，随机分为手术组，对照组，每组20只。②实验干预：手术组结扎左冠状动脉，心电图出现急性心肌梗死改变90min后，去除结扎线，再灌注60min，建立心肌缺血再灌注大鼠模型。对照组仅穿线不结扎，余同手术组。③取缺血区心肌，提取Total RNA，构建cDNA文库，利用抑制性消减杂交技术筛选差异表达基因，测序，登录Genbank寻找同源性基因。结果：共获得124个阳性结果，56个为高表达基因，68个为低表达基因，其中发现5个新的cDNA片段。其中能量代谢、物质运输、信号转导相关差异表达基因分别占所有差异表达基因的39．25％，15．89％，15．89％，并且主要变化为下调。结论：抑制性消减杂交技术是一种高效的筛选差异基因的方法。心肌缺血再灌注后基因变化涉及多种功能的基因，以能量代谢、物质运输、信号转导相关基因下调明显。