实时荧光定量聚合酶链反应测定表皮生长因子Ⅲ突变体表达的方法构建及其应用

目的 构建含有表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variantⅢ,EGFRv Ⅲ)的重组质粒,建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术测定EGFRv Ⅲ的标准曲线,以定量检测喉鳞癌组织中EGFRv Ⅲ的表达水平.方法以重叠延伸PCR法构建含EGFR第1外显子及第8至部分第9外显子的融合序列.再以融合序列为模板,以高特异性的引物扩增EGFRv Ⅲ的目的片段,构建含有EGFRv Ⅲ的重组质粒,进行测序鉴定.将此质粒作为标准品进行梯度稀释,以TaqMan探针实时荧光定量PCR进行检测,建立标准曲线.并以此技术对32例喉鳞癌组织中EGFRvⅢ mRNA表达水平进行测定.结果 经测序鉴定,含EGFRv Ⅲ的重组质粒标准品构建成功,以不同稀释水平的标准品质粒进行荧光定量PCR扩增所得的标准曲线,可用于EGFRv Ⅲ定量分析.32例喉鳞癌组织中共有5例检测到EGFRv Ⅲ的表达,阳性率为15.6%.除1例癌旁组织中存在极少量的EGFRv Ⅲ表达外,EGFRv Ⅲ均在肿瘤组织中表达.结论 用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术定量研究EGFRv Ⅲ的方法已构建成功,在喉癌组织中的成功运用已证明该方法切实可行,并且较为准确可靠.EGFRv Ⅲ在喉癌组织中有表达,但是阳性率及含量不高,是否能成为喉癌生物治疗的特异性攻击靶点尚待进一步探索.     

四川达州市中小学生贫血率定点调查

目的了解中小学生的贫血状况。方法采用WHO推荐的氰化高铁血红蛋白法测定中小学生血红蛋白,对结果进行分析。结果1995、2000、2005年分别调查2446、4135和5012人,检出贫血人数1236、1103和1559人,贫血率分别为50.53%、26.67%和31.10%,中度贫血者逐次减少,7岁组和14～17岁组贫血率较高、女生贫血率高于男生、乡村学生贫血率高于城市学生。结论达州市中小学生贫血患病率呈下降趋势,但仍处于全国平均水平。     

数据挖掘技术在职业卫生工程分析中的应用研究

目的利用数据挖掘技术将历史数据和专家经验合理应用于职业卫生工程分析，弥补传统分析方法的缺陷。方法用历史数据建立数据仓库，用联机分析处理（OLAP）和基于贝叶斯信念网络与神经网络集成的风险评估模型，分别挖掘泛化特征和风险评估规则。结果该方法能充分应用历史数据的隐含规则与专家经验来提高工程分析的准确度。结论数据挖掘技术的应用，为工程分析方法的改进提供了一种新的途径。     

乐果90 d染毒对大鼠大脑皮质GABA系统的影响

[目的]研究乐果[O,O-二甲基-S-(N-甲基氨基甲酰甲基)二硫化磷酸酯]90d染毒对大鼠大脑皮质γ-氨基丁酸(GABA)系统的影响。[方法]48只健康雄性SD大鼠分成4组,剂量分别为O(生理盐水)、5、10、20mg/kg,灌胃给药,每周染毒5d(次),实验周期90d,每天称重1次,每3天记录动物饲料消耗量,定期测定全血乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,实验结束时全部动物断头处死,测定延髓AChE活性,反相高效液相色谱荧光法测定大脑皮质GABA含量,放射性配体受体结合法测定大脑皮质GABA_A受体的活性。[结果]实验期间,各染毒组动物全血AChE活性明显抑制,实验后期有所恢复。实验结束时,低、中、高染毒组延髓AChE活性分别约为对照组的78%、63%、42%。与对照组相比,中、高剂量组大脑皮质GABA含量明显降低(P<0.01);GABA_A受体的最大结合容量(maximum binding capacity,Bmax)低剂量组升高(P<0.05),中剂量组降低(P<0.05);各剂量组GABA_A受体的平衡解离常数(equilibrium dissociation constant,Kd)比对照组均有降低,但仅低、中剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]乐果90d染毒过程中大脑皮质GABA含量、GABA_A受体功能都有所改变,可能参与了乐果慢性中毒过程中的非胆碱能机制。     

高强度聚焦超声对晚期胰腺癌镇痛疗效观察

目的了解高强度聚焦超声(HIFU)对晚期胰腺癌镇痛疗效是否存在显著意义。方法应用FEP-BYO2高强度聚焦超声热疗机对21例晚期胰腺癌患者进行HIFU治疗。结果治疗后疼痛消失6例,疼痛减轻10例,疼痛无变化3例,治疗前后均无疼痛2例。治疗后患者未发生皮肤烧伤。根据统计学评分差异显著。结论高强度聚焦超声对晚期胰腺癌镇痛有较好的镇痛效果。     

1344例初治涂阳肺结核病人治愈影响因素分析

目的分析初治涂阳肺结核病人治愈的影响因素,提高治愈率。方法对高唐县结核病防治所1995~2004年登记的初治涂阳肺结核病例的管治情况进行汇总回顾性分析。结果10年共登记初治涂阳患者1344例,治愈1161例,治愈率86.4%,因各种原因未能完成疗程86例,中断治疗率6.4%,初治失败55例,治疗失败率4.1%,住院治疗12例,入院率0.9%,其他如迁出、死亡、合并其他疾病30例,占2.2%。结论结核病人的不规则治疗、药物副反应及感染菌的耐药性是影响初治涂阳肺结核病人治愈的主要因素。     

米非司酮配伍米索前列醇终止早孕598例临床效果及相关因素的分析

<正>米非司酮联合米索前列醇用于药物流产,近年来已经广泛应用于临床,此药用于流产是一种安全、简便、有效的终止早孕的方法。我所门诊妇产科在2005年7月至2006年7月,应用米非司酮与米索前列醇进行598例药物流产,取得令人满意的效果,现将资料报告如下。1对象和方法     

吴茱萸碱和盐酸小檗碱对HT29细胞生长抑制及凋亡的影响

目的探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞的生长抑制及其诱导细胞凋亡的作用。为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法采用活细胞计数试剂盒（CCK-8），AnnexinV—FITC／PI双染色流式细胞术，检测不同浓度的盐酸小檗碱和吴茱萸碱作用后HT29细胞增殖活性和细胞凋亡的变化。结果吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后，增殖明显受到抑制，呈剂量和时间依赖性；流式细胞仪检测表明吴茱萸碱和盐酸小檗碱能够诱导细胞凋亡，呈剂量依赖性。倒置显微镜观察细胞呈现缩小、变圆、皱缩、脱壁等增殖变慢的形态学特征。结论吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用。该抑制作用与诱导细胞凋亡相关。     

不同剂量生脉注射液多次静点对心力衰竭患者内源性洋地黄样物质血浓度的影响

目的:观察不同剂量生脉注射液(红参、麦冬、五味子)多次静点对心力衰竭患者不同时点内源性洋地黄样物质(EDLS)血浓度的影响。方法:40例心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组(生脉注射液低、中、高3个剂量组),每组10例。对照组予5葡萄糖液100mL 胰岛素1单位(R-I1U) KCL0.25g/iv.dripqd×7;治疗组分别予5葡萄糖液100mL R-I1U KCL0.25g 生脉注射液20、40、60mL,iv.dripqd×7。采用放免法测定第1天给药前和第1天给药后1h、12h、第2天给药前、第2天给药后12h、第4天给药前、第4天给药后1h、第7天给药前、第7天给药后1h共9个时点的EDLS血浓度,比较不同剂量生脉注射液静点后4组患者不同时点EDLS血浓度是否存在差别。结果:(1)连续多次给予生脉注射液后,EDLS血浓度基线升高;(2)随着生脉注射液剂量的增加,EDLS血浓度的升高更明显。结论:生脉注射液有提高EDLS血浓度的作用,多次给药后,随着给药次数的增加呈现一定的累积效应,同时使EDLS血浓度升高的作用有剂量依赖性,多次给药后,这种作用趋势变得更加明显。     

温阳活血中药复方对冠心病阳虚血瘀证大鼠血小板 GPⅡb-Ⅲa的影响

目的：研究温阳活血中药复方对冠心病阴虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa的影响。方法：建立冠心病阴虚血瘀证大鼠模型；同时观察温阳活血中药复方对冠心病阴虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa的影响。结果：温阳活血中药复方治疗组与模型组比较，能够显著降低血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa（Ⅱb-Ⅲa）分子数，与对照组比较效果尤佳且有明显的量效关系。结论：温阳活血中药复方能够降低GPⅡb/Ⅲa受体的含量，阻断“外一内”信号转导途径，减少GPⅡb/Ⅲa与Fg的结合量，达到抑制血小板聚集的作用。