肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达的影响

[目的]观察中药复方肾消康对糖尿病。肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病（DN）的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机制,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。[方法]本实验采用链脲佐菌素（STZ）加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT—PCR法做验证实验研究。[结果]鸟嘌呤核苷酸结合蛋白cd2（Gna12）,在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康中剂量组表达上调。[结论]应用Aflymetrix Rat2302．0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,Gna12是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT—PCR测序分析。基因功能分析表明,在糖尿病状态下,Gna12表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gna12表达上调,可见肾消康对Gna12基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究。     

髋臼骨折手术疗效影响因素分析

目的探讨影响髋臼骨折手术疗效的相关因素及其防治措施。方法分析1998年1月至2006年1月手术治疗的资料完整的髋臼骨折患者122例,按Letournel分类法研究骨折类型、移位程度、方向,了解合并损伤、手术时间、术后并发症、髋臼功能及手术入路的选择。按Matta提出的X线评定标准和临床评分标准进行评定。结果全部病例获得1年～8年10个月的随访,平均51.8个月。Matta X线评定:解剖复位71例,满意复位34例,不满意复位17例,复位优良率为86.1%。临床评定:3周内手术者103例,优66例,良23例,可12例,差2例,优良率86.4%;3周后手术者19例,优3例,良4例,可5例,差7例,优良率36.8%。并发异位骨化27例,创伤性关节炎19例,髋臼坏死1例,股骨头坏死3例,术后脂肪液化3例,浅表感染1例。术前3例合并坐骨神经损伤的患者中有2例有不同程度的恢复。结论髋臼骨折的复位质量是决定手术疗效的关键,但其影响因素较多。术前综合分析、把握手术时机、正确选择手术入路、避免并发症发生是提高临床疗效的保证。     

雌激素对NMDA诱导离体大鼠海马神经元凋亡的作用

目的观察雌激素对NMDA诱导离体海马神经元凋亡的作用,探讨雌激素的神经保护作用机制。方法用形态学鉴定和细胞死亡率的测定以及Western blot方法分析雌激素对NMDA诱导神经元凋亡的作用。结果培养的神经细胞经形态学鉴定绝大多数是神经元,占总细胞数目的81·3%,凋亡细胞百分数为15·1%,NMDA(300μmol·L-1+甘氨酸5μmol·L-1)能明显诱导神经元凋亡,凋亡发生数为31·6%(与对照组相比P<0·05),雌激素(300μmol·L-1)能明显拮抗NMDA的凋亡毒性作用,凋亡发生数为18·2%(与对照组相比P>0·05)。MTT实验测定细胞生存率:NMDA组为70·2%(与对照组相比P<0·05),NMDA+雌激素组为89·7%(与对照组相比P>0·05)。蛋白印迹也显示,caspase-3的活性能被雌激素所抑制。结论雌激素具有神经保护作用,作用机制可能通过抑制凋亡相关酶的活性来实现。实验结果为开发雌激素的临床应用和寻找神经保护作用药物提供实验参考依据。     

微小 RNA?204?3p通过靶向调控 Krüppel样因子 6对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

目的探讨微小 RNA?204?3p(miR?204?3p)对高糖诱导小鼠足细胞 MPC5损伤的保护作用及其分子机制。方法采用高糖(30 mmol/L D?葡萄糖)处理 MPC5细胞。实时定量 PCR(qPCR)检测细胞中 miR?204?3p与锌指蛋白 Krüppel样因子 6(KLF6) mRNA水平。 MPC5细胞分为 NG组(正常对照)HG组(高糖刺激)HG+miR?204?3p组、 HG+miR?NC组、 HG+si?KLF6组、 HG+si? NC组, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组和HG+m,iR?204?3p+pcDNA组,。蛋白质印迹法(Western Blot)检测肌动蛋白微丝偶联蛋白(synaptopodin)、结蛋白(desmin)、 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白(Bax)与活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(cleaved?caspase?3)蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡,生物学信息预测和双荧光素酶报告基因分析 miR?204? 3p和 KLF6的靶向关系。结果与正常对照相比,高糖可显著降低 MPC5细胞中 miR?204?3p表达量［(0.41±0.04)比(1.02± 0.08)］上调 KLF6 mRNA［(2.86±0.27)比(1.03±0.08)］和蛋白［(0.89±0.08)比(0.46±0.04)］水平,还可上调 KLF6、desmin［(0.81± 0.07)比(,0.34±0.03)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白表达及细胞凋亡率［(22.46±2.08)%比(5.26±0.64)%］下调 synaptopodin蛋白［(0.34±0.03)比(0.76±0.07)］及 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。与 HG+miR?NC组比较, HG+miR?204?3p组明,显提高 synaptopodin［(0.67±0.06)比(0.32±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.41±0.04)比(0.83±0.08)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白水平及细胞凋亡率［(11.25±1.65)%比(24.58±2.47)%］(P＜0.05)。与 HG+si?NC组比较, HG+si?KLF6组明显提高 synaptopodin［(0.62±0.06)比(0.28±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.49±0.05)比(0.86±0.08)］、 Bax蛋白水平及细胞凋亡率［(14.69±1.87)%比(25.47±2.68)%］(P＜0.05)。 miR?204?3p直接靶向 KLF6。与 HG+miR?204?3p+pcDNA组比较, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组显著增加高糖刺激小鼠肾脏足 MPC5细胞中 KLF6、desmin［(0.68±0.06)比(0.36±0.04)］、 Bax蛋白表达量和细胞凋亡率［(18.41±1.67)%比(11.05±1.02)%］,显著减少 synaptopodin蛋白［(0.38±0.03)比(0.69±0.07)］和 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。结论 miR?204?3p通过直接靶向 KLF6抑制高糖刺激的足细胞凋亡,保护细胞损伤。     

复方必清片的提取工艺优选

目的: 优选复方必清片的提取工艺。 方法: 在单因素试验基础上,以薯蓣皂苷元、秋水仙碱含量和浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验优选菝葜等7味药材的乙醇提取工艺;以总多酚含量和浸膏得率为综合评价指标,通过正交试验优选余甘子等5味药材的水提取工艺。采用HPLC测定薯蓣皂苷元和秋水仙碱的含量,色谱条件为Cosmosil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温35 ℃,流速1.0 mL·min^-1,进样量10 μL,检测波长分别为203,350 nm,流动相分别为甲醇-水(90:10),甲醇-水(37:63);采用紫外分光光度法测定总多酚含量。 结果: 菝葜等7味药材的最佳提取工艺为加10倍量70%乙醇提取2次,每次1.0 h;余甘子等5味药材的最佳提取工艺为加10倍量水提取3次,每次1.0 h。 结论: 优选的提取工艺稳定可行,为复方必清片的质量控制提供实验依据。     

酒萸肉提取物中莫诺苷、马钱苷含量变化的影响因素研究

目的 研究酒萸肉提取物中影响莫诺苷、马钱苷变化的因素.方法 以莫诺苷、马钱苷为指标,考察溶液pH、加热温度、加热时间、溶液中甲醇量对酒萸肉提取物中莫诺苷、马钱苷变化的影响.结果 溶液pH为1～4、加热温度大于80℃的条件下,加热时间越长莫诺苷增加越多,莫诺苷最多增加45%,溶液中甲醇质量分数小于20%时,莫诺苷的量随甲醇的减少而增多,马钱苷在上述条件下无明显变化.结论 酒萸肉中含有可转化成莫诺苷的物质,溶液pH、加热温度、加热时间为促进此转化的主要影响因素,经过一定的条件转化后可使莫诺苷增加.     

苦参碱对腺嘌呤致大鼠肾小管-间质纤维化的影响

 目的采用腺嘌呤诱导大鼠肾间质纤维化的模型,进一步了解苦参碱在肾小管-间质纤维化中的防治作用及其机制方法60只雄性大鼠随机分为3组:①正常对照组8只;②病理组28只;③治疗组24只按250 mg·kg^-1·d^-1给大鼠灌服腺嘌呤,连续21 d灌暇腺嘌呤1周后,治疗组每天还按20 mg·kg^-1·d^-1的剂量用苦参碱腹腔注射,分别观察治疗2,3,4周,3个不同时间点,正常对照、病理组和治疗组的血清肌酐、尿素氯、血清IL-6和肾小管间质的TGF-β₁表达和肾组织病理改变等指标的变化,用放射免疫法检测血清IL-6的水平,免疫组化SABC法检测肾小管间质中的TGF-β₁蛋白的表达和分布,采用HPIAS- 1000型全自动彩色图像分析系统,对免疫组化染色阳性信号进行扫描,半定量分析各组阳性表达面积百分比,肾组织HE染色丰定量分析各组肾小管-间质损伤指数结果苦参碱治疗组大鼠的血清肌酐、尿素氮与同期病理组比较,有明显的改善(P<0.05);血清IL-6水卓、肾小管间质的TGF-β₁蛋白表达显著低于同期病理组(P<0.05),但均高于正常对照组(P<0.01) 苦参碱治疗的各组肾小管间质损伤指数低于病理组(P<0.05)。结论在腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化过程中,苦参碱能降低其血清BUN,Scr,IL-6水平和TGF-β₁蛋白在肾小管间质中的表达,阻抑肾间质纤维化的进展,并有相应的时效关系。说明苦参碱对腺嘌呤导致肾间质纤维化大鼠模型的肾功能有一定保护作用,并可减轻肾间质纤维化的改变,其作用机制可能与降低IL-6水平和抑制TGF-β₁的蛋白表达有关     

电针金津玉液穴为主治疗假性延髓麻痹临床观察

目的 观察电针金津、玉液穴为主治疗假性延髓麻痹的临床疗效.方法 将64例假性延髓麻痹患者随机分成电针组32例和针刺组32例.主穴均取金津、玉液两穴,电针组留针通电,针刺组速刺不留针.均在4个疗程后评定疗效.结果 电针组疗效优于针刺组(P＜0.05);两组治疗后各项评分均有显著下降(P＜0.05),电针组在改善吞咽困难、构音障碍、舌体运动及总分方面优于针刺组(P＜0.05).结论 电针金津、玉液为主治疗假性延髓麻痹的疗效优于普通针刺.     

赤红活血退黄汤治疗病毒性肝炎高胆红素血症112例临床观察

目的:观察赤红活血退黄汤治疗病毒性肝炎高胆红素血症的临床疗效。方法:将221例患者随机分为治疗组112例与对照组109例,对照组予西药治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用赤红活血退黄汤治疗。2组患者治疗前后检测肝功能指标、血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),观察临床症状变化情况。结果:临床疗效总有效率治疗组为80.36%,对照组为66.97%,2组比较,差异有显著性意义(P0.05)。治疗后2组的TBil、DBil、ALT、AST均较治疗前显著改善,差异均有非常显著性意义(P0.01)。治疗后治疗组TBil、DBil改善较对照组明显,差异有显著性或非常显著性意义(P0.05,P0.01)。结论:赤红活血退黄汤有明显退黄、降酶作用,其疗效明显优于单纯使用西药治疗。     

益气养阴法对冠心病心绞痛气阴两虚型患者血脂和血清超敏-C反应蛋白的影响

目的 观察益气养阴法对气阴两虚型冠心病心绞痛患者血脂和血清超敏C反应蛋白(CRP)的影响.方法 将96例随机分成2组各48例,对照组采用常规对症治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用益气养阴方,疗程4周,观察用药前后患者血脂、C反应蛋白的变化.结果 治疗组治疗后GRP为(19 66±4 11)mg/L,对照组为(29....