血浆脂蛋白相关磷脂酶A2与急性心肌梗死患者心功能的相关性研究

目的：研究急性心肌梗死患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp?PLA2）浓度变化情况及其与心肌梗死后心功能的相关性。方法：连续入选急性心肌梗死患者90例,测定患者入院即刻（T0）、入院次日（T1）、入院第3天（T2）和入院第7天（T3）血浆Lp?PLA2及心梗后1个月（T4）N端前体脑钠肽（NT?proBNP）水平,并采用二维心脏超声测定T1和T4患者左室射血分数（LVEF）,Pearson相关分析Lp?PLA2与LVEF及NT?proBNP的相关性。以43例同期入院稳定性心绞痛患者和48例健康体检者作为对照。结果：急性心肌梗死患者血浆Lp?PLA2水平呈动态改变,心梗发作时显著增高,而入院第7天后基本降至对照组水平［（61.42±36.99）mg/L vs.（49.83±27.17）mg/L,P > 0.05］。相关性分析显示入院即刻（T0）血浆Lp?PLA2水平与C反应蛋白水平（r=0.06,P > 0.05）及血浆肌钙蛋白T水平（r=-0.07,P > 0.05）均无显著相关性。进一步研究发现入院时（T0）血浆Lp?PLA2水平与T4血浆NT?proBNP水平（P=0.16,P > 0.05）、左室射血分数（LVEF）（r=-0.09,P > 0.05）及T4与T1 LVEF差值（ΔLVEF）（r=0.04,P > 0.05）均无显著相关性。结论：血浆Lp?PLA2水平反映了急性心肌梗死动脉斑块不稳定状态,但与急性心肌梗死患者梗死后心功能恢复情况无关。     

Mmp-2重组真核表达载体的构建及MMP-2蛋白对肝癌细胞的作用机制探讨

目的：构建人基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2,MMP-2）基因重组真核表达载体,探讨MMP-2蛋白对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法：以肝癌SMMC-7721细胞为研究模型,以基因重组技术构建pEYFP-Mmp-2重组真核表达载体,pEYFP-Mmp-2一过性转染模型细胞过表达MMP-2-YFP,siRNA转染沉默模型细胞内源性MMP-2表达,设立空白对照、MMP-2沉默对照组、MMP-2沉默组、过表达MMP-2融合蛋白对照组、过表达MMP-2融合蛋白组,划痕实验检测细胞迁移能力,侵袭小室实验检测细胞侵袭能力,钙蛋白酶（calcium-activated neutral protease,Calpain）特异性抑制剂Calpeptin抑制Calpain活性,蛋白印记实验检测MMP-2、MMP-2-YFP、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vi－mentin）表达变化。结果：成功构建人Mmp-2重组真核表达载体pEYFP-Mmp-2。pEYFP-Mmp-2转染过表达MMP-2融合蛋白组细胞高表达MMP-2-YFP。与MMP-2沉默对照组相比,MMP-2沉默组内源性MMP-2表达明显下调（P=0.000）,细胞12 h、24 h及48 h迁移率明显降低（P=0.000或P=0.001）,48 h侵袭率明显降低（P=0.004）,E-cadherin表达明显上调,N-cadherin及Vimentin表达明显下调（P=0.000）。与过表达MMP-2融合蛋白对照组相比,过表达MMP-2融合蛋白组12 h、24 h及48 h迁移率明显增强（P=0.015或P=0.001）,48 h侵袭率明显升高（P=0.011）,细胞E-cadherin表达明显下调,N-cadherin及Vimentin表达明显上调（P=0.003或P=0.001）。Calpeptin预处理明显降低过表达MMP-2融合蛋白组细胞迁移率和侵袭率（P=0.000）,上调E-cadherin,下调N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平（P=0.000）。结论：本实验通过基因重组技术成功构建人Mmp-2重组真核表达载体pEYFP-Mmp-2,成功表达MMP-2-YFP 融合蛋白;并发现MMP-2通过调节Calpain介导肝癌SMMC-7721细胞迁移、侵袭及EMT。     

供体血钠、供受体血钠差值对肝移植患者术后的影响

目的：探讨肝移植供体血钠、供受体血钠差值对肝移植患者术后的影响。方法：回顾性分析2016年7月至2018年5月我院行供体器官维护并行肝移植术的供体及肝移植患者分别20例,记录临床资料进行分析。结果：①供体最高血钠Na>155 mmol/L与Na<155 mmol/L两组肝移植患者术后最高总胆红素、最高丙氨酸氨基转移酶（alanine transaminase,ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、肝功能恢复时间、重症监护病房（intensive care unit,ICU）住院时间、总住院时间差异无统计学意义。②供体移植时血钠分为Na>155 mmol/L与Na<155 mmol/L 2组,其中Na<155 mmol/L组术后最高ALT更高[（747.17±375.34） U/L vs. （357.00±190.50） U/L,t=-2.700,P=0.015]。③供受体血钠差值ΔNa<10 mmol/L、ΔNa=10~20 mmol/L、ΔNa>20 mmol/L 3组肝移植患者术后最高ALT有差异[（805.00±332.90） U/L、（329.75±237.43） U/L、（329.60±186.21） U/L,F=6.714,P=0.007];两两分析示ΔNa<10 mmol/L组肝移植术后最高ALT比其他2组更高（P=0.012,P=0.007）,ΔNa=10~20 mmol/L与ΔNa >20 mmol/L组无统计学差异（P=0.999）。④供受体血钠差值ΔNa与肝移植患者术后最高ALT两者存在线性负相关（相关系数R=-0.579,P=0.007）,ΔNa越小,术后最高ALT越大。⑤回归分析示肝移植患者术前终末期肝病模型评分（model for end-stage liver disease,MELD）是移植术后感染并发症发生独立危险因素。结论：供体移植时血钠低于155 mmol/L肝移植患者术后最高ALT更高;供受体血钠差值ΔNa越小,术后最高ALT更高;MELD评分是肝移植患者术后感染并发症的独立危险因素。     

Next-generation Sequencing Study of Pathogens in Serum from Patients with Febrile Jaundice in Sierra Leone

Objective People in Western Africa suffer greatly from febrile jaundice, which is caused by a variety of pathogens. However, yellow fever virus(YFV) is the only pathogen under surveillance in Sierra Leone owing to the undeveloped medical and public health system there. Most of the results of YFV identification are negative. Elucidation of the pathogen spectrum is required to reduce the prevalence of febrile jaundice. Methods In the present study, we used Ion Torrent semiconductor sequencing to profile the pathogen spectrum in archived YFV‐negative sera from 96 patients in Sierra Leone who presented with unexplained febrile jaundice. Results The most frequently identified sequencing reads belonged to the following pathogens: cytomegalovirus(89.58%), Epstein‐Barr virus(55.21%), hepatitis C virus(34.38%), rhinovirus(28.13%), hepatitis A virus(20.83%), coxsackievirus(10.42%), Ebola virus(8.33%), hepatitis E virus(8.33%), lyssavirus(4.17%), leptospirosis(4.17%), chikungunya virus(2.08%), Crimean‐Congo hemorrhagic fever virus(1.04%), and hepatitis B virus(1.04%). Conclusion The distribution of sequencing reads suggests a broader spectrum of pathogens for consideration in clinical diagnostics and epidemiological surveillance in Sierra Leone.     

rhGLP-1（7-36）联合他克莫司对人肝细胞Akt的作用研究*

目的 观察重组人胰高血糖素样肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]联合他克莫司作用于人肝细胞系HL7702细胞系后对Akt表达的影响。方法 选用处于对数生长期的人肝细胞系HL7702,分为4组：对照组、G组、F组及GF组。对照组用等量的培养基处理90?min;G组用含100?nmol/L的rhGLP-1（7-36）培养基处理90 min; F组用含5?mg/L的他克莫司处理90?min;GF组用含100?nmol/L的rhGLP-1（7-36）及5?mg/L的他克莫司处理90?min。Western blotting检测各组Akt蛋白表达水平。结果 各组p-AktThr308相对表达水平差异有统计学意义（P?< 0.05）;G组、F组及GF组p-AktThr308相对表达水平与对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,G组、F组及GF组均升高;各组p-AktSer473相对表达水平差异无统计学意义（P?>0.05）;G组、F组及GF组p-AktSer473相对表达水平与对照组比较,差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 rGLP-1（7-36）联合他克莫司能使Akt蛋白活化,提示GLP-1可能不依赖Akt蛋白改善他克莫司引起的肝脏脂质代谢紊乱。     

乙型丙型肝炎病毒合并感染细胞模型的建立

目的：本文拟利用慢病毒载体,在可感染丙型肝炎病毒（HCV）的Huh7.5.1细胞中过表达人肝细胞乙型肝炎病毒（HBV）受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白（sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP）编码基因,建立Huh7.5.1- hNTCP细胞模型,使其可以被HBV、HCV共同感染。方法：使用携带人NTCP编码基因、GFP（green fluorescent protein）基因、嘌呤霉素抗性基因的GV358重组慢病毒载体,以50的感染复数（MOI）感染Huh7.5.1细胞。经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达人NTCP基因的Huh7.5.1-hNTCP细胞株,并通过Western-blotting验证NTCP蛋白的表达。使用HepAD38细胞来源的HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞,通过ELISA及qPCR等方法检测HBV感染后不同时间点HBsAg、HBeAg的表达以及HBV DNA的复制。HBV感染后24小时予以HCV-JFH1感染,检测合并感染状态下HBV DNA以及HCV RNA的复制。结果：Western-blotting 结果表明Huh7.5.1-hNTCP细胞株可稳定表达HBV受体NTCP。HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后ELASA、qPCR结果显示：HBsAg、HBeAg、HBV DNA合成逐渐增加,并在第9天达峰。HBV/HCV合并感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后,qPCR检测结果显示不同时间点HBV DNA、HCV RNA复制逐渐增加。结论:建立了Huh7.5.1-hNTCP细胞模型,该模型可被HBV/HCV合并感染。     

针刺蝶腭神经节治疗变应性鼻炎的多中心病例系列研究

目的 初步评价针刺蝶腭神经节治疗变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的临床疗效。方法 采用病例系列研究设计,自2017年4月至2018年6月分别于7个分中心纳入222例过敏性鼻炎患者予针刺蝶腭神经节治疗,各分中心之间纳入患者的基线一致,每周1次,共4次。分别于治疗前、治疗第2、3、4、8周进行鼻炎症状量表（total nasal symptom score,TNSS）和鼻炎伴随症状量表（total nonnasal symptom score,TNNSS）评价,于治疗前、治疗第4、8周进行鼻结膜炎生活质量调查问卷标准版（rhinconjunctivitis quality of life questionnaire,RQLQ）评价。结果 222例患者中有1例失访,纳入统计的有效量表分别为221份TNSS、218份TNNSS、213份RQLQ。患者TNSS量表和TNNSS量表评分自针刺第2周开始持续下降至第8周（治疗结束后4周,观察结束时点）,RQLQ量表评分在第4周或此前即明显降低,并于第8周进一步下降,差异均具有统计学意义。1例患者出现面颊肿胀的轻微不良反应。在8周的观察期内,AR患者的控制率超过80%。结论 初步证明针刺蝶腭神经节治疗AR有效、安全、具备推广的可行性。进一步研究将增加客观指标评价、补充针刺即刻效应观察,细化可能的不良反应种类,延长随访时间,明确不同刺激方式对AR治疗效果的影响,规范针刺方案,优化患者就诊体验。     

同步辐射X线相衬成像对裸鼠胰腺癌的早期诊断

目的 通过建立裸鼠胰腺癌模型,结合磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）,探讨同步辐射X线相衬成像技术对胰腺癌的早期诊断。方法 32只nu/nu雌鼠,采用数字表法随机分为A、B两组：A组（n=24）为人胰腺癌细胞PANC-1胰腺原位移植瘤组,即于胰腺被膜下注射10⁸×2 μL单细胞悬浮液;B组（n=8）为空白对照组,即于胰腺被膜下注射2 μL 0.9%（质量浓度）氯化钠注射液。再根据术后1、2、3、4周处理时间的不同,将A、B两组分为4个亚组,即A1、A2、A3、A4（n=6）和B1、B2、B3、B4（n=2）。术后分别行MRI扫描、肿瘤标本相衬成像及病理学检查。结果 ①A组术后平均成瘤率73%（16/22）,术后4周成瘤率最高,达到100%,成瘤率随观察时间的延长而升高,二者之间存在线性趋势关系（χ_线性趋势²=4.718,P=0.030）;病理组织学检查为胰腺低分化腺癌。②同步辐射X线相衬成像可显示直径为0.5 mm的胰腺原位肿瘤,早期（两周）的灵敏度和特异度达到100%,明显高于MRI扫描（P=0.029）。结论 PANC-1细胞原位移植是建立裸鼠胰腺癌模型的可靠方法;与MRI相比,同步辐射X线相衬成像能发现胰腺癌微小病变,有可能为胰腺癌的早期诊断提供了一种全新的技术手段。     

睡眠功能失调性信念与态度量表中文版的信效度研究

目的 评估睡眠功能失调性信念与态度量表中文版（Dysfunctional Beliefs and Attitudes about Sleep Scale-Chinese Version,DBAS-CV）的心理测量学特征。方法 按照《精神疾病诊断与统计手册》第四版（Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,DSM-Ⅳ）诊断标准入组原发性失眠者、精神疾病共病失眠者共218例,招募健康被试34例。所有被试均完成睡眠功能失调信念与态度量表（Dysfunctional Beliefs and Attitudes About Sleep Scale,DBAS）、DBAS-16、匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI）。其中30名被试在2周后再次进行DBAS量表的评定。结果 探索性因素分析结果显示5个因子是可接受的。修订后量表的总分与DBAS-16、PSQI总分的相关系数分别为0.86、-0.48（均P<0.01）,并具有较好的区分效度（P<0.05）。总量表Cronbach α系数为0.83,各分量表Cronbach α系数为0.42~0.78;总量表重测信度为0.94,各分量表的重测信度为0.76~0.93。结论 修订后的中文版DBAS-CV具有较好的信度和效度,可用于评估失眠人群的功能性失调信念。     

软骨样脂肪瘤1例

正患者,女,28岁,因右前臂内侧软组织肿物2年入院。患者自述2年前无明显诱因出现右前臂内侧软组织肿物,当时肿物大小约4 cm×3 cm×2 cm,肿物呈进行性生长,且生长较慢。患者未予重视,也未行任何治疗。1个月前因右上肢剧烈活动后,出现肿物部位疼痛,疼痛为隐痛,休息后疼痛稍有缓解。现为进一步治疗,至我院就诊。入院查体:右前臂中1/3内侧处肿胀明显,皮肤无黄染、无瘢痕、肤色正常,右前臂内侧局部可触及肌间软组织包块,大小约5 cm×3 cm×2 cm,质韧,边界清晰,活动度较差,无压痛,桡动脉搏动良好,末梢血运良好,无肢体感觉及运动障碍。辅助检查:术前完善各项常规检查,前臂X线片未见骨质异常。超声提示前臂肌层内可见5.0 cm×2.4 cm低回声肿物,边界清,内部回声欠均