萝卜硫素通过TGF-β/Smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响

【摘要】 目的 探讨萝卜硫素通过转化生长因子（TGF-β）/smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用2μM TGF-β诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）增生,将细胞分为对照组、TGF-β刺激组、TGF β联合20 μM萝卜硫素组及TGF-β联合40 μM萝卜硫素组。5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,不同剂量萝卜硫素处理HBZY-1细胞及肾病综合征大鼠,将大鼠分为空白对照组、阿霉素刺激组、阿霉素联合30 mg/kg萝卜硫素组及阿霉素联合60 mg/kg萝卜硫素组,每组各8只;采用CCK8法检测HBZY-1细胞增殖,HE染色分析肾病综合征大鼠肾组织系膜基质沉积,Western Blotting方法检测粘连蛋白（FN）、Ⅳ胶原蛋白（Col4）、TGF-β及p Smad3蛋白表达水平。结果 TGF-β刺激组能明显诱导HBZY-1细胞增生及HBZY-1细胞FN和Col4蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;TGF-β联合20、40 μM萝卜硫组与TGF-β刺激组相比能明显抑制TGF-β诱导的HBZY-1细胞增殖和明显抑制TGF β诱导的FN和Col4蛋白表达（P＜0.05）。阿霉素诱导肾病综合症大鼠肾脏系膜基质沉积增多（P＜0.05）,而不同剂量萝卜硫素治疗后,能显著降低肾脏系膜基质沉积（P＜0.05）。阿霉素刺激组能明显诱导大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平升高和大鼠肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;与阿霉素刺激组相比,不同剂量萝卜硫素能明显降低大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平、降低肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 萝卜硫素可通过下调TGF-β/Smad3信号传导抑制基质合成相关蛋白表达,进而降低了肾病综合征大鼠肾小球系膜细胞增生。     

重组rPA基因在毕赤酵母细胞中的胞内表达研究

目的构建含rPA全长基因的重组酵母胞内表达质粒pPIC9K rPA ,并在毕赤酵母中进行表达。方法用限制性内切酶BamHI和NotI将含有rPA全长基因的质粒pJZ1 6双酶切后 ,克隆至酵母表达载体pPIC9K中 ,构建酵母重组表达质粒。rPA基因经DNA序列测定准确无误。通过电穿孔法转染毕赤酵母菌GS1 1 5 ,PCR鉴定阳性酵母转化子 ,将rPA基因整合入酵母基因组DNA ,在毕赤酵母中实现了胞内非融合表达。表达产物进行SDS PAGE、Western blots以及溶纤维蛋白活性检测。结果表达产物以胞内包涵体的形式存在 ,未糖基化。SDS PAGE结果显示表达蛋白质的相对分子量约为 39kD。Western blots检测表明表达蛋白质能与单克隆抗体发生特异性反应。包涵体经 8mol L脲溶液溶解后 ,有明显的溶纤维蛋白活性。结论在毕赤酵母中成功地实现了rPA重组蛋白的胞内表达     

氟乙酰胺急性中毒的护理体会

目的探讨氟乙酰胺急性中毒的护理问题和护理体会.方法对5例氟乙酰胺急性中毒患者的临床资料进行回顾性分析.结果 5例中2人病情较重,昏迷 8～12h.经过我们的精心治疗和护理,5例痊愈出院.结论氟乙酰胺急性中毒抢救和护理的重点是尽快清除被服入的毒物,最好的办法是早期的彻底洗胃.     

长链非编码RNA与精神分裂症相关性的研究进展

精神分裂症(schizophrenia,SZ)是一种环境和基因共同作用的遗传性疾病,长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)在精神分裂症的发生发展中起到了关键作用,可作为精神分裂症临床诊疗的潜在靶点,就lncRNA与精神分裂症的相关研究进展综述如下。     

复方α-酮酸联合羟苯磺酸钙治疗糖尿病肾病患者肾间质纤维化的疗效

目的 观察复方α-酮酸联合羟苯磺酸钙对糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）患者肾间质纤维化指标及血清超敏C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)的影响。方法 选取94例DKD患者,用随机数字表法均分为2组,对照组予以羟苯磺酸钙,观察组在对照组治疗的基础上联合使用复方α-酮酸,检测治疗前后血糖指标[餐后2 h血糖（2-hour postprandial plasma glucose,2 hPG）及空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）]、肾间质纤维化指标[肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）]、hs-CRP、SAA水平和肾功能指标[血肌酐...     

微生物检验分析前的质量保证

微生物检验分析前的质量保证是微生物检验全部过程中最重要的环节之一,直接影响到检验结果的正确与否,其主要内容是患者标本的正确采集、输送及处置。不合格的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现,对临床产生误导,延误对患者的及时诊治。因此微生物检验分析前的各个环节都要规范操作,严格控制,确保分析前的质量控制。     

维持性血液透析患者动静脉内瘘术的围手术期护理

报告了16例维持性血液透析患者前臂动静脉内瘘术的围手术期护理。术前进行心理护理,告知患者术前应该配合的具体事项,做好术前准备,术后注意手术侧肢体体位,严密观察生命体征及内瘘通畅情况,做好术后宣教,做好术后常见并发症(出血、感染、血流量不足、血栓形成)的防治和护理,认真做好出院指导。本组均安全度过围手术期,随访1 a～5 a,16例患者的动静脉内瘘均能满足长期血液透析需求。     

萝卜硫素对肾病综合征大鼠肾脏损伤保护的机制研究

目的研究萝卜硫素对肾病综合征大鼠肾脏损伤的保护作用及其对一氧化氮合酶表达的影响。方法采用5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,将大鼠分为对照组、模型组、萝卜硫素组及阳性药物组,30 mg/kg萝卜硫素和6 mg/kg阳性药物贝那普利分别灌胃治疗大鼠6周,HE染色检测肾脏组织病理学变化,BCA法检测24 h尿蛋白量,ELISA法检测了血浆白蛋白水平,分光光度法测定尿液NO含量;Western blot法检测肾组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。结果相对于对照组大鼠,模型组大鼠24 h尿蛋白量明显升高(P<0.05),血浆白蛋白明显降低(P<0.05),肾脏病理损伤严重,尿液中NO含量显著降低(P<0.05),eNOS、iNOS及nNOS酶表达水平亦显著降低(P<0.05);相比于模型组大鼠,萝卜硫素和阳性药物治疗组大鼠24 h尿蛋白量明显降低(P<0.05),血浆白蛋白明显升高(P<0.05),肾脏病理损伤明显改善,尿液中NO含量显著升高(P<0.05),eNOS、iNOS及nNOS酶表达水平亦显著增高(P<0.05)。结论萝卜硫素能够诱导肾病综合征大鼠eNOS、iNOS及nNOS的表达,提升大鼠体内NO水平,降低尿蛋白含量,改善肾脏损伤程度。