Her2/ECD-sf162/TM融合杆状病毒表达及鉴定

目的:获得融合表达的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒,为后续基于SIV Gag蛋白的Her2病毒样颗粒疫苗的制备奠定实验基础。方法:将Her2胞外段基因与猴免疫缺陷病毒（simian immunodeficiency virus,SIV）包膜蛋白sf162跨膜区基因融合的Her2/ECD-sf162/TM pFastBac重组表达载体,转座大肠杆菌E.coli DH10Bac菌株,获得重组杆粒,在昆虫细胞中表达获得重组杆状病毒,Western blot方法对该病毒进行鉴定。结果:构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒表达载体经PCR鉴定正确,转染昆虫细胞后获得了重组杆状病毒,该融合杆状病毒蛋白可与抗Her2抗体发生免疫反应。结论:成功构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒可用于Her2病毒样颗粒疫苗的制备。     

siRNA沉默HepG-2细胞B7-H3对细胞行为学影响的研究

目的:探讨siRNA方法沉默HepG-2细胞中B7-H3基因表达对细胞周期、增殖及迁移能力的影响.方法:设计合成针对B7-H3基因的siRNA及无关干涉siRNA序列,并分别构建干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3及无关干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/NC;采用脂质体LipofectamineTM 2000转染对数生长期肝癌细胞HepG-2,经G418筛选后获得相应细胞模型;利用RT-PCR和Western blot方法分别检测空白对照组(WT)、无关干涉组(si-NC)和B7-H3干涉组(si-B7-H3)细胞中B7-H3 mRNA及蛋白表达水平;利用CCK-8细胞增殖实验及克隆形成实验评价各组细胞增殖情况;利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测各组细胞周期分布情况;利用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力.结果:成功构建了pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3干涉载体.RT-PCR及Western blot结果显示,B7-H3干涉组较空白对照组、无关干涉组mRNA及蛋白水平明显下降;CCK-8增殖、克隆形成实验、细胞划痕实验及流式结果表明B7-H3干涉组增殖受到明显抑制,克隆较小且克隆数减少,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞迁移能力受抑制.结论:利用siRNA靶向干涉B7-H3表达可抑制HepG-2细胞增殖并诱导细胞周期阻滞,降低细胞迁移能力,实验结果为开发针对B7-H3靶点的肝癌免疫治疗提供了初步实验及理论基础.     

MACC1基因siRNA对肺癌SBC-5细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨MACC1(metastasis-associated in colon cancer l)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对肺癌细胞系SBC-5体外增殖和迁移的影响。方法:化学合成MACC1基因特异性siRNA,阳离子脂质体LipofectamineTM 2000转染肺癌细胞系SBC-5细胞,RT-PCR和Western blot方法检测转染后SBC-5细胞中MACC1基因和蛋白的表达情况;MTT法检测细胞的生长增殖状况;划痕试验观察细胞迁移能力的改变。结果:MACC1基因特异性siRNA转染细胞后,SBC-5细胞MACC1的mRNA和蛋白表达水平明显降低,MTT试验和划痕试验观察到转染MACC1-siRNA的SBC-5细胞增殖、迁移能力明显减弱。结论:MACC1基因特异性siRNA可以明显抑制肺癌SBC-5细胞增殖和迁移,MACC1可能成为肺癌治疗的新靶点。     

职业外照射对放射人员淋巴细胞微核率的影响

目的对受到职业外照射的放射人员进行细胞遗传学分析,为职业外照射防护提供依据。方法抽取厦门市602名放射工作人员的外周血,常规淋巴细胞培养,测定微核率,并对不同性别、不同工龄及不同工种放射工作人员的微核率进行比较。结果放射工作人员（观察组）平均淋巴细胞微核率显著高于健康对照组[（1.39±1.44）vs（0.38±0.64）,P〈0.01]。女性外周血淋巴细胞微核率高于男性[（1.31±1.25）vs（1.52±1.71）,P〈0.05]。工龄小于30年者,淋巴细胞微核率与工龄呈显著正相关（r=0.452,P〈0.01）。医学应用组平均淋巴细胞微核率高于工业应用组[（1.57±1.22）vs（1.29±1.09）,P〈0.05]。结论长期小剂量、低剂量率的照射可引起外周血淋巴细胞微核率增高,且女性较男性显著。外周血淋巴细胞微核率与工龄呈正相关。     

奈替米星的不良反应

目的:探讨奈替米星引发不良反应的相关因素。方法:对1998年～2003年间12种中文期刊报道的奈替米星不良反应案例进行统计、分析。结果:奈替米星所致不良反应可累及多个器官/系统,临床表现复杂多样,主要表现为肾毒性、神经系统毒性、过敏反应3种类型。结论:临床医师、药师应重视奈替米星的不良反应,坚持合理用药。     

影响农村孕产妇保健的卫生系统研究

[目的]探讨卫生系统中影响重庆市农村孕产妇保健服务的因素。[方法]采用定性研究方法,从卫生系统内部的因素如：资金、人力、设施设备、监督管理机制等方面探讨影响农村孕产妇保健的因素。[结果]县乡妇幼保健经费严重不足,主要采取以“临床养保健”;妇幼人员缺乏,大多数医院没有专职保健人员,妇幼人员队伍不稳定,人员更换频繁;部分乡镇卫生院设备陈旧,没有能力添置或更新必要的设备;缺乏有效的奖惩激励机制,人员的积极性难以调动;与计生部门的沟通合作不够。[结论]建议政府加强对农村孕产妇保健的重视程度,加大对基层妇幼保健事业的投入。     

离子色谱法测定尿碘浓度

目的:建立测定人尿样中碘离子浓度的离子色谱法。方法:采用离子色谱,在IonPacAS7柱上,用50mmol/L的硝酸为淋洗液测定尿液中碘离子的含量。检测方式为直流安培检测,工作电极为Ag电极,参比电极为Ag/Agcl电极。结果:碘离子浓度检测线性范围为50～1000μg/L(r=0.9998),平均回收率为95.8%～97.0%,相对标准偏差为2.6%～3.7%;测得的正常人尿碘浓度为100～300μg/L。结论:该方法稳定、准确、快速,可用于实际样品的测定。     

幽门螺杆菌标准株NCTC11639 CagA基因的克隆表达及其抗原性的鉴定

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）是慢性消化道疾病的主要致病菌。本研究利用基因工程技术构建CagA基因并进行了表达，为CagA疫苗和诊断抗原的研究奠定基础。 一、材料和方法 1．菌株来源和质粒：Hp标准株NCTC11639由本校微生物教研室保存；E．coli DH5α和TOP10及表达载体pGEX-4T-1由本室保存。     

结核杆菌诱导的凋亡中性粒细胞对人巨噬细胞活性的影响

目的探讨结核杆菌诱导的凋亡中性粒细胞对人巨噬细胞活性的影响。方法从人外周血中分离中性粒细胞和单核细胞。用结核杆菌感染中性粒细胞诱导其凋亡，再用单核细胞来源的巨噬细胞吞噬凋亡粒细胞。培养18h后测定其细胞因子产生情况。结果吞噬结核杆菌诱导的凋亡粒细胞可促进人巨噬细胞产生致炎症细胞因子TNF-α，但不影响抗炎症细胞因子TGF—β和IL-10的产量。结论结核杆菌诱导的凋亡中性粒细胞，能增强人单核细胞来源的巨噬细胞的活性．代表一种新的宿主防御机制。     

颅内动脉瘤诊断现状与进展

颅内动脉瘤是动脉壁的某一部分因病变而向外突出所形成的永久性扩张，主要由于管壁先天性缺陷、动脉粥样硬化、高血压引起。发病率居脑血管意外第3位，仅次于脑血栓形成和高血压脑出血，其致残率和致死率很高。首次发生破裂出血后即约有8％～32％的患者死亡，1年内残死率在60％以上，2年内残死率在85％以上。由于首次出血后继发第2、3次出血的风险极高，因此早期做出正确诊断并给予及时治疗对于降低病死率及改善病人预后具有重要的临床意义。目前，国内外学者就如何及时准确地诊断颅内动脉瘤做了大量研究，现就有关诊断方法的现状和发展综述如下。