靶向血管内皮生长因子C短发夹式RNA对人乳腺癌MCF-7细胞生物学特性的影响

目的 研究重组质粒表达载体介导的短发夹式RNA(shRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 脂质体介导重组质粒pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞株,嘌呤酶素筛选阳性克隆;荧光定量PCR及Western blot检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达;MTT法及Transwell体外侵袭实验检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞的增殖及侵袭能力.结果 转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P<0.05);MTT法和 Transwell体外侵袭实验显示,与阴性质粒组和空白对照组比较,转染重组质粒后各时间段乳腺癌MCF-7细胞增殖均明显受抑制(P<0.05),同时穿膜的肿瘤细胞数也明显减少[(29.0±1.9)个与(59.0±2.1)个和(61.0±2.2)个相比,P<0.05].结论 表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在乳腺癌MCF-7细胞中能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力有显著抑制作用.     

VEGF-C在淋巴管生成及乳腺癌淋巴道转移中的作用

目的： 探讨阻断VEGF-C/Flt-4调控系统对淋巴管生成和乳腺癌淋巴道转移的影响。方法： 体外培养胎牛胸导管内皮细胞，观察VEGF-C和抗Flt-4抗体对淋巴管内皮细胞增殖的影响；设计合成VEGF-C反义脱氧寡核苷酸（ASODN），体外实验观察其对VEGF-C基因表达的影响；建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型并观察ASODN对肿瘤淋巴管生成及肿瘤生长转移的影响。结果： 加入前列腺癌细胞PC3(高表达VEGF-C)上清后，淋巴管内皮细胞增殖活跃；加入抗Flt-4抗体后各时段细胞计数均明显少于其它各组。体外实验RT-PCR及 Western blotting显示ASODN作用的MCF-7细胞组VEGF-C mRNA及蛋白表达均低于对照组。体内RT-PCR检测表明ASODN组移植瘤VEGF-C mRNA表达明显受抑制；5-Nase-ALPase双重酶组织化学法结果显示ASODN组移植瘤的淋巴管生成明显减少；ASODN组肿瘤生长速度较对照组缓慢，且肿瘤体积、淋巴结转移明显低于对照组。结论： VEGF-C/Flt-4调控系统与乳腺癌组织的淋巴管生成及肿瘤的淋巴道转移密切相关。阻断淋巴管内皮细胞Flt-4表达，可在一定程度上抑制肿瘤细胞诱导的淋巴管内皮细胞增殖；ASODN通过下调乳腺癌VEGF-C的表达，减少肿瘤淋巴管的生成及淋巴结转移。     

靶向血管内皮生长因子C短发夹式RNA对人乳腺癌MCF-7细胞生物学特性的影响

目的 研究重组质粒表达载体介导的短发夹式RNA(shRNA)对乳腺癌MCF-7细胞株中血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 脂质体介导重组质粒pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞株,嘌呤酶素筛选阳性克隆;荧光定量PCR及Western blot检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达;MTT法及Transwell体外侵袭实验检测转染前后乳腺癌MCF-7细胞的增殖及侵袭能力.结果 转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P<0.05);MTT法和 Transwell体外侵袭实验显示,与阴性质粒组和空白对照组比较,转染重组质粒后各时间段乳腺癌MCF-7细胞增殖均明显受抑制(P<0.05),同时穿膜的肿瘤细胞数也明显减少[(29.0±1.9)个与(59.0±2.1)个和(61.0±2.2)个相比,P<0.05].结论 表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在乳腺癌MCF-7细胞中能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力有显著抑制作用.     

基于共情能力培养的体验式教学在老年护理学教学中的应用研究

目的探究基于共情能力培养的体验式教学在老年护理学教学中的应用效果。方法将136名高职护生随机分为实验组和对照组,实验组在传统教学基础上采用基于共情能力培养的体验式教学法,对照组采用传统教学法。通过调查问卷、理论考核等方法比较两组干预前后的效果。结果干预前两组共情量表得分差异无显著性(P>0.05);干预后两组得分差异有显著性,实验组明显高于对照组(P<0.01);干预前后对照组得分差异无显著性(P>0.05)。实验组理论考核成绩明显高于对照组(P<0.01),患者对实验组的护理工作满意度较高。结论体验式教学有助于改善教学质量,培养护生共情能力,提高患者满意度。     

Cycl慢病毒干扰载体的构建及在鼻咽癌细胞中干扰效率检测

目的 检测Cycl在鼻咽癌中的表达.构建稳定干扰Cycl慢病毒载体及检测其在鼻咽癌细胞中的干扰效率.方法 应用基因芯片技术检测Cycl基因在鼻咽癌组织中的表达.Real-time PCR确证Cycl基因在鼻咽癌组织和细胞中高表达.构建重组靶向Cycl的shRNA慢病毒质粒pLentiU6/Cycl-shRNA.建立稳定干扰Cycl基因的鼻咽癌细胞系,荧光定量PCR检测干扰效率.结果 基因芯片检测显示,Cycl基因在鼻咽癌组织中高表达.qRT-PCR确证了墓因芯片结果的可靠性.在8个鼻咽癌细胞株中,Cyc1基因基本上都显示了高表达,其中最高的为鼻咽癌5-8F细胞.测序验证pLentiU6/Cycl-shRNA重组质粒构建成功.重组质粒能明显稳定地抑制Cycl基因在鼻咽癌细胞中的表达.结论 Cycl 基因在鼻咽癌中高表达.构建的靶向Cycl基因的慢病毒载体能明显抑制其表达.这为研究Cycl基因在鼻咽癌中的功能及分子机制奠定了基础.     

三阴性乳腺癌组织DJ-1和PTEN及AR表达与预后相关性分析

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中帕金森相关蛋白(DJ-1)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)和雄激素受体(AR)的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法:免疫组织化学SP法检测DJ-1、PTEN和AR蛋白在68例TNBC组织和30例正常乳腺组织中的表达,并分析其与TNBC临床病理因素的关系,及其对预后的影响。结果:TNBC组织中DJ-1阳性表达率为70.6%(48/68),AR阳性表达率为36.8%(25/68)。正常乳腺组织中DJ-1阳性表达率为6.7%(2/30),无AR表达。TNBC组织中DJ-1、AR阳性表达率明显高于正常乳腺组织,χ2值分别为7.09和6.72,P值分别为0.002和0.005。TNBC组织中PTEN阳性表达率为27.9%(19/68),正常乳腺组织中为100.0%。TNBC组织中PTEN阳性表达率显著低于正常乳腺组织,χ2=5.94,P=0.008。DJ-1、PTEN和AR表达在TNBC组织中的表达与腋窝淋巴结转移、组织学分化和TNM分期密切相关,P<0.01。TNBC组织中DJ-1和AR的表达均与PTEN蛋白的表达呈负相关,r=-0.529,P=0.009;而两者之间呈正相关,r=0.496,P=0.011。在5年无瘤生存率和5年总生存率方面,DJ-1和AR表达阴性者明显高于阳性者,P<0.01;PTEN表达阳性者高于阴性者,P<0.01。Cox回归多因素分析结果表明,腋窝淋巴结转移、DJ-1、PTEN及AR表达是影响TNBC患者5年无瘤生存率的独立预后因素,P<0.05。结论:TNBC组织中DJ-1和AR过表达,而PTEN表达下调,三者均为TNBC患者预后的独立危险因素,参与调控TNBC的发生与预后。     

DNA含量和S期分数在非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

目的 采用细胞图像分析术(ICM)对非霍奇金淋巴瘤(NHL)进行DNA含量、S期分数(SPF)的检测,探讨两个参教在NHL诊断分型、鉴别诊断及预后判断中的意义.方法 210例NHL和30例良性增生淋巴组织进行改良Feulgen染色和ICM-DNA检测.结果 NHL的DNA含量为(7.01±0.21)pg～(10.77 ±0.27)Pg,SPF为(10.97 ±1.11)%～(30.87±2.17)%,均高于对照组(P＜0.05);NHL侵袭性、高侵袭性组的DNA含量和SPF均高于惰性组(P＜0.05);滤泡性淋巴瘤FL-Ⅱ、Ⅲ级的DNA含量、SPF均高于FL-Ⅰ级(P＜0.05).结论 DNA含量、SPF对良恶性林巴组织增生的鉴别诊断、NHL惰性或侵袭性判断是有意义的参考指标,但对侵袭性高低无提示;FL是相对异质化群体,DNA参教检测只能做为参考.     

甲状腺疾病病理形态学回顾诊断及经验

目的：总结甲状腺滤泡性腺瘤与腺癌的诊断要点，甲状腺腺瘤和单结节性甲状腺肿的鉴别诊断及细针穿刺在甲状腺疾病中的应用价值。以提高 对甲状腺疾病的认识和诊断水平。方法：复验3435例甲状腺病例的显微形态学诊断，对所得结果进行分析总结。结果：甲状腺腺瘤是各种甲状腺疾病中的首位病种（49．5％）；冰冻诊断的良恶性鉴别（定性）准确率为100％，具体类型诊断（定类）准确率为88．2％，细针穿刺诊断准确率为77．8％，结论甲状腺疾病、尤其甲状腺恶性疾病的细针穿刺诊断准确率低，无法取代传统的冰冻切片诊断；分化好的甲状腺滤泡性癌在诊断上难度大，需仔细寻找包膜和血管的浸润协助诊断；应重视甲状腺腺瘤与单结节性甲状腺肿的鉴别诊断。     

病理学实验课教学的几点体会

病理学是研究疾病的发生、发展及其转归规律的一门基础医学课程,因其是一门形态学科,理解内容相对少,记忆内容多而令人感到枯燥乏味,部分学生缺乏学习兴趣,影响教学质量。病理实验教学从实验教学方法、教学内容、教学手段等方面进行了初步的探讨和实践。     

医学成人教育实践与发展的思考

医学成人教育实践过程中存在的一系列问题,可能对成人教育质量造成不良影响,分析考虑可以从弹性学制、课程建设、教学方法和手段、考核制度及师资队伍建设等方面进行教学改革和尝试,希望能找到一种适合成人学员的教学模式,使之愿意学、方便学、真正能提升其能力和技能,切实提高成人教育质量。