酪氨酸酶基因在HEK293细胞表达的MRI评价

目的:以酪氨酸酶基因作为报告基因转染HEK293细胞, 利用其合成大量黑色素而能被MRI检测的特性来反映基因表达的情况, 以探索磁共振成像(MRI)评价体外细胞基因表达的方法。方法:以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HEK293细胞, 以MRIT₁WI、T₁WI/SPIR、T₂WI序列扫描转染细胞, 观察表达的黑色素的MRI信号。应用Fontana染色检测黑色素的合成, RT-PCR检测酪氨酸酶基因的cDNA片段, 以进一步验证酪氨酸酶基因的转染与表达。结果:(1)pcDNA3tyr质粒转染进入HEK293细胞并在其中表达生成黑色素, 转染5μg、10μg、20μg质粒的10⁶个细胞内生成的黑色素能够被MRI检测到并在MRIT₁WI、T₁WI/SPIR、T₂WI检查呈高信号, MRI信号强度与转染质粒量成正相关。(2)Fontana染色法检测到HEK293细胞内的黑色素颗粒;(3)采用RT-PCR方法检测到转染的HEK293细胞含酪氨酸酶基因的cDNA片段。结论:MRI能够检测到HEK293细胞内由外源基因表达合成的黑色素, 说明影像学与分子生物学技术结合可以评价体外细胞基因表达的情况。     

腹腔镜初学者病例选择的初步体会

腹腔镜胆囊切除术(LC)具有创伤轻、痛苦小、恢复快的特点,我院开展腹腔镜胆囊切除(LC)时间较晚,对病例选择的初步体会如下.1 资料及结果施行LC病人共32例.男性14例,女性18例;年龄22～75岁,平均38岁;手术时间最短45分钟,最长240分钟;其中急性胆囊炎并结石3例,胆囊三角区充血水肿粘连增厚解剖不清1例,中转开腹手术1例.住院天数4～7天,平均5.6天,全部病人顺利康复无术后并发症出现.     

人类胚胎生殖细胞体外分化为心肌细胞的研究

胚胎生殖（EG）细胞是来源于胚胎原始生殖细胞（PGCs）的多潜能干细胞。采用无饲养层细胞、无细胞因子等的基础培养液（DMEM＋20％NBS＋0．1mM 2Me）培养EG细胞，部分在基础培养液添加10μmol／LRA＋0．75％DMSO或10μmol／L 5-氮胞苷（5-AZA）诱导人类EG细胞向心肌细胞分化，以检测其是否具有向心肌细胞自发分化的能力。9例（8．49％，9／106）胎儿EG细胞在体外分化得到20个节律性心脏跳动样细胞团，其搏动节律为20～120次／min，体外维持节律性搏动最短2d，最长至15d，呈PAS，Myoglobin，α-actin阳性；对K^＋、Ca^＋、肾上腺素等具有与在体心脏相似的反应性；透射电镜观察具有心肌细胞样结构。添加DMSO和RA或5-AZA诱导未得到跳动样心肌细胞，但可提高心肌α-actin免疫组织化学染色阳性率；表明人类胚胎生殖细胞具有向心肌细胞分化的潜能。     

小儿烧伤并发真菌感染8例

我科自 1989年 4月— 1998年 12月共收治小儿烧伤 762例,其中并发真菌感染 8例,占 1. 05％,现就其治疗情况报告如下。 1临床资料 1. 1一般资料本组共 8例,其中男 6例,女 2例,年龄 6个月～ 6岁,平均年龄 2岁,其中 7例均在 2岁以内, 1例 6岁。烧伤面积 30％～ 60％,按小儿烧伤严重程度分类, 8例均为特重度烧伤 [1]。其中烧伤面积 30％～ 40％ 4例, 41％～ 50％ 2例, 51％～ 60％ 2例。 8例平均烧伤面积 41％,平均Ⅲ度烧伤面积 11％。 8例均在治疗中并发细菌感染的同时或者之后并发真感染,其中并发金黄色葡萄球菌和腐生葡萄球菌…     

生物化学与分子生物学实验室微机化管理初探

当今 ,随着计算机在各个领域的广泛应用 ,它已成为医学院校实验室进行现代化科学管理不可缺少的工具。笔者通过学习计算机数据库管理知识 ,结合多年积累的工作经验 ,对实验室仪器设备、药品试剂等项目开发应用微机管理软件 ,大大提高了工作效率 ,实现了实验室各项管理的系统性、准确性、完整性、实用性、可靠性及快速性。1　生物化学实验室管理现状在高等医学教育中 ,生化与分子生物学是一门重要的基础学科。我院的生化与分子生物学是自治区一类课程 ,承担着生物化学、分子生物学、细胞生物学与医学遗传学等多门课程的教学任务。这些课程实…     

前列腺摘除术并发症的防治体会

198 5～ 1998年 ,我科行经膀胱前列腺摘除术 2 2 6例 ,大部分病例取得满意效果 ,34例手术出现大出血、膀胱无抑制收缩、急迫性尿失禁、排尿困难、造瘘口延迟愈合、死亡等并发症。现就患者的治疗资料作回顾性分析 ,进一步探讨并发症的防治措施 ,提高手术效果。1　资料与结果1.1　一般资料　本组 2 2 6例 ,年龄 47～ 78岁 ,平均 6 5岁。所有患者均有渐进性排尿困难史 ,病程 1～ 8年 ,其中 46例曾有一次或多次尿潴留病史 ,术前诊断为 ～ 度前列腺增生症 ,合并肾功能损害者 2 3例、膀胱结石 37例、心血管疾病 42例、慢支或肺气肿 9例、脑血管…     

中草药引产致子宫破裂1例教训分析

1病例摘要 患者,女,26岁.因停经4+月,下腹疼痛2d,阴道流血30min,于1999年8月14日下午3时,以"G1P0孕4+月,先兆流产"收入院,查:T 36.8℃,P 62次/分,R 18次/分,BP 10/8kPa.心肺阴性,腹部稍膨隆,宫底脐下二指,腹部压痛及反跳痛,肌紧张不明显,移动性浊音阴性.妇检:外阴发育好,已婚型,血染,因其家属要求保胎,未作进一步检查.     

应用磁分离酶联免疫法评估甲状腺功能状态

本文报告用磁性微粒酶联免疫分析与放射免疫分析法对照甲状腺功能三项(促甲状腺激素TSH、游离三碘甲状腺原氨酸FT_3,游离甲状腺素原氨酸FT_4)的实验结果。前者具有操作简便、准确、稳定、省时、经济、无放射性危害等优点,易于在广大城市及基层推广应用。     

颞下颌关节紊乱病患者个性及应激反应的研究

目的 :了解TMDs患者的个性特征及应激反应状况。方法 :采用艾森克个性问卷、生活事件调查表、状态焦虑 特质焦虑调查表 ,分别对 80名TMDs患者和 6 5名正常人进行问卷测试 ,结果行统计学分析。结果 :①患病组E量表分偏低而N量表分偏高 ,与对照组比较差异有显著性。②两组负性生活事件发生率差异无显著性。③患病组的S AI和T AI分值均高于对照组。结论 :TMDs患者个性倾向内倾、不稳定型 ,且遇到压力时更易紧张焦虑