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目的:优化铁皮石斛中甘露糖与葡萄糖的柱前衍生HPLC含量测定方法以及柚皮素HPLC含量测定方法,比较铁皮石斛与霍山石斛中这3种成分的含量差异。方法:在2015年版《中国药典》铁皮石斛甘露糖柱前衍生HPLC含量测定项下色谱条件基础上,选择乙腈-0. 02 mol·L~(-1)乙酸铵溶液为流动相系统梯度洗脱,同时测定甘露糖与葡萄糖的含量,并分析甘露糖与葡萄糖的峰面积比值;采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);检测波长250 nm;流速1. 0 mL·min~(-1);柱温30℃。柚皮素HPLC含量测定采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-甲醇-0. 4%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长290 nm;流速0. 8 mL·min~(-1);柱温40℃。结果:甘露糖与葡萄糖在0. 15~3. 0,0. 075~2. 25μg线性关系良好(r=0. 999 9),平均加样回收率分别为99. 01%(RSD 2. 1%),101. 69%(RSD 2. 0%),重复性、耐用性等其他方法学研究符合要求。43批不同产区铁皮石斛中甘露糖、葡萄糖以及两者的含量之和分别在12. 75%~36. 40%,2. 93%~18. 39%,19. 23%~54. 58%,除极少数样品外,基本符合2015年版《中国药典》甘露糖含量限度要求,甘露糖与葡萄糖含量之和也接近总多糖含量限度要求;含量与产区相关性不显著。12批霍山石斛的总糖则分别在14. 33%~29. 47%,6. 64%~15. 20%,25. 73%~44. 37%,其含量以及峰面积比值基本落在铁皮石斛范围期间,多批次的平均含量也基本与铁皮石斛一致(约33%左右)。柚皮素在0. 020 8~0. 832 0μg线性关系良好(r=0. 999 9),平均加样回收率为101. 96%(RSD 1. 8%)。11批铁皮石斛与7批霍山石斛的柚皮素含量分别为0. 053 2~0. 122 4 mg·g~(-1)(均值为0. 081 0 mg·g~(-1)),0. 040 3~0. 090 0 mg·g~(-1)(均值为0. 068 3 mg·g~(-1)),铁皮石斛含量稍高于霍山石斛,但含量均亦未达到0. 02%的质量标准下限的常规要求。结论:铁皮石斛中甘露糖与葡萄糖HPLC含量测定方法重复性较好,用两者含量之和替代具有较大误差的总多糖含量作为测定指标具有可行性;单糖含量测定可应用于霍山石斛的定量质控指标;但依据2种石斛的总多糖含量、水解后的单糖含量与峰面积比值以及柚皮素含量,无法区分铁皮石斛与霍山石斛,需结合其他专属性方法方能对两种石斛进行区别。 相似文献
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目的:对不同道地种源铁皮石斛的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ(芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷,viceninⅡ)进行体外抗氧化及诱导肝癌Hep G2细胞凋亡的活性研究。方法:采用2,2-联苯基~(-1)-苦基肼法(DPPH),2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸法(ABTS)和铜离子还原法对viceninⅡ(0. 005~1 g·L~(-1))进行体外的抗氧化活性研究;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测viceninⅡ(12. 5~100μmol·L~(-1))对人6种不同的肿瘤细胞体外的增殖抑制作用;后续凋亡实验viceninⅡ浓度为75μmol·L~(-1),采用Hoechst33258染色,荧光显微镜进行Hep G2细胞形态学观察;应用流式细胞术,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)检测Hep G2细胞凋亡率;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路及相关凋亡基因的mRNA表达。结果:ViceninⅡ质量浓度为1 g·L~(-1)时,对DPPH的清除率和Cu2+还原率为48. 82%和22. 01%(P 0. 01);当viceninⅡ质量浓度为0. 5 g·L~(-1)时,对ABTS清除率为86. 88%(P 0. 01); viceninⅡ显著抑制Hep G2细胞增殖并诱导凋亡,75μmol·L~(-1)的viceninⅡ作用48 h后,细胞存活率为45. 69%(P 0. 01),细胞凋亡率为14. 57%(P 0. 01),升高B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2,半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8,p38,细胞外信号调节激(ERK),c-Jun氨基末端酶(JNK),核转录因子-κB(NF-κB) mRNA表达(P 0. 01)。结论:铁皮石斛不同道地种源的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ在体外具有一定的抗氧化作用,能有效抑制Hep G2细胞增殖,并可能通过调控MAPK通路及Bax/Bcl-2途径诱导Hep G2细胞凋亡。 相似文献
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摘 要 目的:建立葛根骨康宁颗粒中葛根素的含量测定方法。方法: 采用HPLC法,色谱柱为Zorbax SB-C18;流动相为甲醇-水(25∶75);检测波长为250 nm;流速为1 ml·min-1;柱温为30℃。结果:线性范围为0.15~1.50 μg(r=0.999 9),加样回收率为99.69%(RSD=2.21%,n=6)。三批葛根骨康宁颗粒中葛根素的平均含量为271.8 mg/100 g。结论:本法操作简便、快速、准确,可作为葛根骨康宁颗粒的质量控制指标之一。 相似文献
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目的:建立泽兰及其S-8型大孔树脂精制提取物的HPLC特征图谱,研究饮片与提取物特征图谱的相关性。方法:采用Zorbax SB C18色谱柱;流动相为乙腈-体积分数为0.1%的磷酸溶液(梯度洗脱);流速为1.0mL·min-1;检测波长为330nm;柱温为40℃。结果:泽兰饮片及其提取物均标示出20个共有峰,峰2,6,7,13,17为五强峰,峰2为咖啡酸。10批泽兰饮片的相似度为0.961~0.998;10批泽兰提取物的相似度为0.963~0.998;同批次饮片与提取物之间的相似度为0.988~0.998。结论:方法准确可靠,重复性好,为泽兰及其提取物的质量控制提供了方法依据,同时为含泽兰复方制剂的质量控制提供了参考。 相似文献
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黄月纯 《中国中医药现代远程教育》2012,(18):65-66
毕业实习是中药学或药学专业教学计划中的重要组成部分,是学生从学校走入工作实践的重要桥梁,医院药学部(药剂科)的药检室是临床实习带教的主要部门之一,对药检室中药检验的薄层色谱鉴别的实习带教进行了探讨. 相似文献
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葛根骨康宁颗粒增加骨密度功能的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨葛根骨康宁颗粒对去势大鼠骨密度的作用。方法清洁级雌性SD大鼠60只,随机分成6组:葛根骨康宁颗粒低、中、高剂量组(0.43,0.87,2.60 g.kg-1),碳酸钙对照组、模型对照组及假手术组。12周后,测定动物体重、股骨干重、骨密度和骨钙含量。结果高剂量组股骨中心骨密度、股骨远心端骨密度、股骨干重及骨钙含量显著高于模型对照组(P0.05)。结论葛根骨康宁颗粒具有增加大鼠骨密度的功能。 相似文献
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玉屏风煎剂中氨基酸类成分HPLC指纹图谱分析 总被引:2,自引:2,他引:0
目的: 建立玉屏风煎剂中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析方法,探讨不同配伍对氨基酸类指纹图谱的影响。方法: 采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生法,以精氨酸为参照物。Kromasil C18色谱柱(4.6 nm×250 nm, 5 μm),流动相A为乙腈,B为N,N-二甲基甲酰胺-0.025 mol ·L-1醋酸钠(1∶100,用36%乙酸调pH 6.0),梯度系统,柱温40 ℃,检测波长为360 nm,流速1.0 mL ·min-1,进样量10 μL,分析时间70 min。结果: 共标出18个共有峰,鉴定出15种对人体有益的氨基酸成分。除1批样品相似度为0.916外,9批样品相似度均大于0.98。对整方氨基酸指纹图谱的影响从大到小依次是黄芪、炒白术、防风。结论: 所建立的玉屏风煎剂中氨基酸类成分指纹图谱特征性强,可作为玉屏风煎剂质量控制的手段之一,并可为中药复方配伍化学成分变化研究提供一定参考。 相似文献
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目的:建立金钗石斛HPLC的特征图谱,为其质量评价提供参考。方法采用ZORBAX SB-Aq色谱柱;流动相乙腈-0.2%(体积分数)甲酸,梯度洗脱,流速1.0 mL · min-1;柱温30℃;检测波长270 nm。结果分别建立了不同产地金钗石斛的HPLC特征图谱,一类是以贵州赤水产金钗石斛为代表的HPLC特征图谱,标记出22个共有峰,相似度为0.979~0.998;一类是以云南产金钗石斛为代表的HPLC特征图谱,标记出27个共有峰,相似度为0.902~0.980。结论金钗石斛的HPLC特征图谱主要分为2类,贵州赤水产为一类,云南产为一类,广西产的两类都有。本法稳定可靠、重复性好,可用于不同产地金钗石斛的鉴别和质量控制。 相似文献
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反相高效液相色谱法测定袁氏生脉成骨片中牡荆苷的含量 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】建立袁氏生脉成骨片中牡荆苷含量的测定方法。【方法】采用Hypersiol ODS2 C18色谱柱,流动相:甲醇—10 mL/L冰醋酸(梯度洗脱),柱温:室温,检测波长:339nm,流速:1.0mL/min。【结果】牡荆苷在0.108~0.541μg范围内具有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为98.13%,RSD为1.27%。【结论】该方法简便、重复性好,为袁氏生脉成骨片的质量控制提供了依据。 相似文献