子宫内膜癌中的细胞凋亡现象

目的　探讨子宫内膜癌中的细胞凋亡现象及意义。方法　采用TUNEL技术对 19例子宫内膜癌石蜡包埋标本进行标记凋亡细胞 ,19例子宫腺肌症作对照 ,检测其凋亡指数。结果　子宫内膜癌组的细胞凋亡指数为 2 .2 %～ 9.4% ,平均 5 .2 4%± 1.73 % ;对照组为 0 .5 %～ 4.5 % ,平均为 1.2 4%± 0 .85 % ,两组之间的细胞凋亡指数有着非常显著的差异 ,P <0 .0 1。结论　内膜癌细胞凋亡能力较正常增生期内膜腺上皮细胞凋亡能力有所增强 ,这可能是机体为阻止内膜癌进一步发展而促进癌细胞死亡的代偿机制的反应。我们认为 ,在不同组织及其肿瘤中细胞凋亡的程度可能不尽相同 ,探索不同组织肿瘤中细胞凋亡情况 ,对治疗学以及判断预后有着重要意义     

三种不同饲养层上人胚胎干细胞生长状态的比较

背景：人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞作为饲养层尽管能够维持胚胎干细胞的未分化状态，但存在细胞克隆不饱满、平铺情况明显等问题。 目的：制备小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合饲养层，观察人胚胎干细胞在其上面的生长状态。 设计：多样本观察比较。 单位：海南医学院附属医院生殖医学中心。 材料：实验于2006—04／2007—07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。包皮来自于行包皮环切的儿童，由海南医学院附属医院泌尿外科提供，儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN—1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12．6-14．5d的胎鼠11只，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。 方法：胎鼠麻醉后去除头、四肢和内脏，按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养，待生长汇合后冻存部分原代细胞，用丝裂霉素c处理2．0—3．0h后，按1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内，UPd,鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后，按1：0，3：1，1：1，1：3，0：1比例混合，然后以1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即混合饲养层。观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态，并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层，观察人胚胎干细胞体外分化情况。 主要观察指标：①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长?     

双酚A对人早孕绒毛组织IGF1、TGFβ31、ADAM12表达的影响

目的:研究双酚 A(BPA)水平与人早孕胰岛素样生长因子1(IGF1),转化生长因子β1(TGFβ1),以及解整合素样金属蛋白酶 12 (ADAMl2)表达的关系,探讨BPA 对绒毛组织可能带来的影响.方法:以 40 例早期妊娠 (6～8)周的新鲜绒毛组织进行体外培养,培养基中加入不同浓度的 BPA:A组为1000×1...     

人类胚胎干细胞建系与诱导分化的初步研究

成功地分离培养人类胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cell,hES细胞)并对其进行诱导分化是当今生命科学的重要进展.目前,海南医学院附属医院生殖医学中心黄元华、彭秋平及其科研小组已成功分离出一株胚胎干细胞细胞株,迄今为止已传到20代.     

复方新诺明致胃出血1例

患者男性,19岁,学生,既往体健,否认有药物过敏史。因发热、咳嗽、流涕1天而就诊,查体见咽部充血,心肺未见明显异常,拟诊断上呼吸道感染,予以复方新诺明口服治疗。患者上午服药2片,约2小时后全身搔痒、恶心,呕吐咖啡色液体3次共200ｍｌ,下午至晚上排柏油样便3次共600ｍｌ,即来院急诊。查体:神清,轻度贫血貌。血压1078.0ｋＰａ,两肺呼吸音粗糙,未闻及干湿性罗音,心率120次分,律齐,未闻病理性杂音。全腹平软,剑突下压痛( ),肝脾肋下未及,移动性浊音(-),肠鸣音活跃。胸、背、腹股沟等处可见圆形紫斑,直径约3ｃｍ,诉有痒感。诊断:胃出血、药物性…     

梯度离心法分离、富集、纯化新生乳鼠心肌细胞

目的:探讨体外心肌细胞的分离与培养实验方法,建立研究心脏疾病的基础实验平台。方法:取新生小鼠心脏12只,利用胰酶和胶原酶双消化6次,利用percoll密度梯度离心法离心纯化分离细胞,贴壁培养1h,分离层纤维细胞,抗体标记分离后的心肌细胞,流式细胞仪鉴定细胞纯度。结果:分离新生小鼠的心肌细胞的纯度为91.3%。结论:本方法操作简单,获得心肌细胞的分离效率高,存活时间长。     

玻璃化冻融人卵裂期胚胎移植结局的影响因素分析

目的:探讨玻璃化冻融人第3天卵裂期胚胎移植结局的影响因素。方法:回顾分析977例1301个冻融胚胎移植周期,根据患者年龄、新鲜周期结局、移植胚胎质量等因素分组,比较各分组的胚胎植入率、临床妊娠率。结果:复苏3598个胚胎,存活3462个。周期临床妊娠率24.1%,出生婴儿291个。新鲜周期结局、移植胚胎质量组间胚胎着床率、临床妊娠率的差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜准备方案、胚胎的复苏程度组间差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄组相同不孕年限亚组间的胚胎着床率、临床妊娠率的差异有统计学意义(P<0.05)。移植日子宫内膜厚度>12.0mm组与其他两组相比,胚胎着床率、临床妊娠率较高(P<0.05);不同FET次数组间,1次组的胚胎着床率、临床妊娠率明显高于其他两组(P<0.01)。非条件逐步logistic回归分析表明年龄(P<0.01,OR=0.43)、FET次数(2次组P<0.01,OR=0.30;3次组P<0.01,OR=0.19)、新鲜周期结局(P<0.01,OR=9.01)、移植胚胎质量(P<0.01,OR=3.52)与移植结局相关。结论:年龄、新鲜周期结局、移植胚胎质量等是影响冻融胚胎移植结局的重要因素。     

海南地区地中海贫血产前基因诊断的临床研究

目的:研究检测α-地中海贫血及β-地中海贫血在产前基因诊断中的临床应用价值。方法:对孕妇夫妇携带地中海贫血的48例风险胎儿的羊水(或脐血)应用单管多重PCR体系和反向点杂交法,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因诊断。结果:共检测出地中海贫血胎儿38例。其中α-地中海贫血14例,包括东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)2例,东南亚缺失型纯合子(--SEA/--SEA)8例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)1例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)2例,非缺失型点突变(ααT/αα)1例;β-地中海贫血24例,包括CD41-42杂合子16例,CD41-42纯合子2例,-28(A-G)杂合子3例,双重杂合子(IVS2nt654/CD41-42,-28(A-G)/CD71-72(+A),CD41-42/-α3.7)3例。其中10例重型地贫儿引产,1例重型地贫儿产后新生儿死亡,其余均足月分娩存活。所有病例经引产或正常分娩后留取脐带血,作地贫基因诊断,与产前诊断结果一致。结论:应用单管多重PCR体系及反向点杂交法能快速、准确进行α-和β-地中海贫血产前基因检测,这对于有效预防重型地中海贫血胎儿出生具有重大临床意义。     

产前诊断指证与胎儿的染色体核型分析

目的:探讨胎儿染色体异常频率及与产前诊断指证的关系。方法:对有产前诊断指证的125例妊娠16-36周的孕妇进行羊膜腔穿刺或脐静脉穿刺术,取羊水细胞或脐血细胞培养进行胎儿染色体核型分析。结果:125例中,胎儿染色体异常7例,占5.60%(7/125)。其中高龄和唐氏高危孕妇44例中胎儿异常染色体检出率为2.27%(1/44);曾经生产过染色体病儿或孕妇本人或丈夫染色体结构异常携带者13例中,胎儿染色体异常检出率为38.46%(5/13);B超示胎儿畸形7例中,异常染色体检出率为14.29%(1/7)。结论:在各类产前诊断指证中,依次以父/或母为染色体结构异常携带者、B超检查胎儿畸形的胎儿染色体异常频率为高。