小鼠肝炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

[目的]制备并鉴定小鼠肝炎病毒(MHV)N蛋白的单克隆抗体(mAb).[方法]以Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达的重组N蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤进行融合,用间接ELISA方法筛选分泌N蛋白mAb的杂交瘤细胞系.并用Western blot和IFA方法对所获得的mAb进行鉴定.[结果]共获得4株稳定分泌抗N蛋白mAb的杂交瘤细胞系,其亚类鉴定2株为IgG2a,1株为IgG2b,1株为IgG1,轻链均为k型.经鉴定4株mAb均能与重组N蛋白发生特异性反应.[结论]成功获得了特异性抗MHV N蛋白的mAb,为进一步研究N蛋白的结构功能及建立诊断学方法奠定了基础.     

实验用鱼类福利的发展现状

伴随着鱼类作为科研重要材料的迅猛发展,实验用鱼类福利引起了人们的关注。本文旨在阐述国内外鱼类福利发展的历史和现状,剖析鱼类福利实施困难的因素,提供提高福利的参考对策,以期帮助科研工作者进一步地了解实验用鱼类福利,促进在实验过程中鱼类福利的发展。     

培养法和PCR法用于实验大、小鼠细菌检测的比较分析

目的 比较培养法和PCR法对实验大、小鼠的细菌检测效果。方法 分别采用传统细菌分离培养结合生化鉴定方法和PCR方法, 对78只SPF级大鼠和422只SPF级小鼠进行检测, 对两种方法的检测结果进行比较分析。结果 78只SPF级大鼠均未检测出阳性。422只SPF级小鼠, 培养法检测阳性率7.11%(30/422), 其中金黄色葡萄球菌10只, 绿脓杆菌22只, 肺炎克雷伯杆菌2只。PCR法检测阳性率7.58%(32/422), 其中金黄色葡萄球菌10只, 绿脓杆菌25只, 肺炎克雷伯杆菌2只。结论 PCR法的敏感性高于培养法, 操作简便、快捷, 适用于实验动物细菌的快速诊断和大规模的质量筛查。     

上海地区小鼠诺瓦克病毒的检测分析及病毒分离

[摘要] 目的 了解上海地区实验小鼠自然感染小鼠诺瓦克病毒（Murine Norovirus,MNV）的状况,并分离毒株。方法 抽取委托检测单位送检的SPF小鼠319只,分别采集盲肠内容物及血液样本,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法扩增小鼠盲肠内容物样本中MNV的特异性基因片段来检测MNV的感染情况,同时采用酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）与核酸检测方法进行对比。将RT-PCR扩增结果为阳性的盲肠内容物样本稀释并经0.22μm滤膜过滤,接种到RAW264.7细胞,盲传后采用RT-PCR方法鉴定。结果 RT-PCR检测的319份小鼠盲肠内容物样本中,阳性样本95份,阳性率为29.78%。对180份经RT-PCR检测的小鼠血清进行ELISA检测,阳性样本70份,阳性率为38.89%。RAW264.7细胞盲传5代后在72h内出现细胞病变,经RT-PCR鉴定,显示187bp的目的条带。结论 通过核酸检测方法和血清学方法证实上海地区实验小鼠存在MNV自然感染,且感染率较高,应加强实验小鼠的饲养管理。     

诱发性糖尿病小鼠体外受精早期胚胎的差异基因分析

目的运用体外受精技术改变糖尿病小鼠胚胎的早期发育环境,研究母体糖尿病环境对早期胚胎基因表达的影响。方法选取6-8周龄ICR雌鼠2次腹腔注射小剂量STZ构建小鼠糖尿病模型,模型雌鼠超数排卵后通过体外受精的方法将培养至2一细胞的胚胎转移至正常假孕ICR雌鼠的输卵管内,取14d胎龄的胚胎提取总RNA。用Agilent 2100 Bioanalyzer系统对总RNA进行质检合格后,经过逆转录、标记、杂交、洗脱,芯片结果用Affymetrix Scanner 3000进行扫描,用Command Console Software3．1读取原始数据,实验重复3次。结果筛选出差异表达基因121个（P〈0．05）,其中有119个基因实验组的表达量是对照组的0．5倍以下,2个基因实验组的表达量是对照组的2倍以上。结论母体糖尿病环境能影响其卵子的生长发育,通过上调代谢相关基因和下调发育相关基因影响早期胚胎的生长发育。     

浅谈实验动物机构“动物福利伦理关键评价指标”审查制度的建立

近年来,随着国内实验动物科学的快速发展,以及国内外合作交流的日益频繁,越来越多的实验动物机构认识到动物福利伦理的重要性。“实验动物福利伦理”作为一个健全的实验动物饲养管理和使用计划的必要组成部分,也是一个实验动物机构是否能够得到AAALAC（国际实验动物评估和认证协会）认证的重要评估项目。因此,实验动物机构有必要建立一套完善而有效的“动物福利伦理关键评价指标”审查制度,作为机构自身衡量是否达到国际标准的动物福利伦理水平的重要工具,最终促进国内实验动物管理水平的国际化、标准化、现代化。     

舌下含化硝酸甘油紧急治疗严重肺水肿的效果

近期临床和实验研究证明,硝酸甘油用于急性心肌梗塞后左心衰竭时具有良好的血液动力学作用。但在最严重的左心衰竭即严重肺水肿时,硝酸甘油是否也有良效则尚未系统的研究。肺水肿的治疗在于立即降低左室充盈压和动脉血压,而这些压力在多数病例中均升高。     

成人呼吸窘迫综合征:肺损伤及肺修复观念的改变

成人呼吸窘迫综合征(ARDS)系非心原性肺水肿引起的急性呼吸衰竭,乃是休克、败血症、战伤、车祸、病毒性呼吸道感染,以及许多其它损害的一种复杂结局。并且尽管给予先进的支持疗法,但仍有半数病例终归死亡。ARDS现代观念的进展早期学者认为,本病的发生机理与新生儿呼吸窘迫综合征及心源性肺水肿相似。Petty等推测,ARDS可能起因于表面活性物质合成     

紫外分光光度法测定硫酸新霉素滴眼液的含量

目的建立硫酸新霉素滴眼液的含量测定方法。方法采用比色法,波长为335nm,测定硫酸新霉素的含量。结果硫酸新霉素的线性范围10~60μg·ml-1,相关系数r=0.9994,回收率为100.1%(n=6),RSD为0.82%。结论此方法简便、快速,适用于医院制剂的快速分析。