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101.
人胚胎嗅鞘细胞的分离培养与纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:大量的实验证实,嗅鞘细胞是能促进已损伤的中枢神经重新恢复功能最有效的种子细胞之一。实验拟建立一种简便易行、省时、经济,临床应用更安全,临床效果更好的培养和纯化嗅鞘细胞的方法。
方法:实验于2004—12/2006—12在山东省泰安荣军医院细胞实验室完成。流产胚胎(4~6个月,由家属自愿捐献)。实验方法:在无菌条件下,用显微外科器械将胚胎的嗅球取出,在解剖显微镜下仔细剥离嗅球表面的软膜和血管,尽量保持嗅球完整性,然后用眼科剪反复剪碎,剪成0.5~1.0mm^3大小的组织块,将组织块移人离心管内,加入含有13%胎牛血清的D/F12培养液,用弯头吸管来回轻轻吹打组织块制成细胞悬液,用含有阿糖胞苷的无血清纯化液纯化嗅鞘细胞,胰蛋白酶消化收集细胞,制成单细胞悬液并进行计数。
结果:胚胎嗅鞘细胞在24h后开始部分贴壁,胞体呈球形、星形,有一个甚至多个突起,但突起短小。贴壁3d后,大部分细胞迅速生长,突起延伸变长。贴壁5~7d后,随着培养时间的延长,嗅鞘细胞成簇密集排列生长,细胞突起相互交织越来越多,形成网状。可见3种比较典型的嗅鞘细胞:双极或梭形、多突起形和扁圆或油煎蛋形。主要以梭形和多突起形细胞为主。细胞培养至7~14d时细胞数量不再有明显增加,但是细胞仍生长旺盛,活性好,细胞纯度高达95%~98%。
结论:实验建立的人胚胎嗅鞘细胞培养的方法简便易行,经济,细胞纯度较高。 相似文献
102.
背景:动物实验研究已证实,采用细胞移植、神经营养因子注入或移植等方法可改变损伤脊髓局部环境,促使损伤脊髓恢复部分功能。目的:开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓炎后遗症的临床实验,观察其对脊髓损伤的恢复作用。设计:非随机自身对照。单位:山东省泰安荣军医院外二科病房。对象:选择2004-06/2007-07来源于全国各地的陈旧性脊髓炎患者32例,伤后时间为0.5~7年。患者经各种传统治疗及肢体功能锻炼后神经功能无明显改善,并遗留各种感觉运动及植物神经功能障碍。男21例,女11例,年龄5~48岁,急性病毒性脊髓炎18例,急性化脓性脊髓炎8例,结核性脊髓炎6例,发病后均曾给予大剂量甲基强地松龙、地塞米松、抗炎、抗免疫及各种神经营养药物治疗。26例临床表现均为完全性损伤。6例为不完全性损伤,患者对治疗知情同意,治疗方案经过医院伦理委员会批准。胚胎嗅球来自流产胚胎,由患者或家属自愿捐献。方法:取胚胎嗅球,经细胞分离、培养、纯化7~14 d,最后消化成单细胞混悬液,然后在手术显微镜下移植到患者损伤脊髓区域的上下方。术后2周~2个月,采用2000年美国脊髓损伤学会制定的ASIA评分标准进行术后评定,并进行手术前后对比。主要观察指标:①感觉功能变化。②运动功能变化。结果:嗅鞘细胞移植术后0.5-2年,32例患者感觉和运动功能均有明显改善(运动功能:51.53±13.41,55.72±10.50;轻触觉:63.06±15.98,69.53±11.68;疼痛觉:64.03±15.01,69.50±12.20,P均<0.01)。结论:嗅鞘细胞移植能够有助于脊髓炎后遗症患者的神经功能恢复,但长期疗效有待于进一步观察。 相似文献
103.
背景:嗅鞘细胞移植治疗陈旧性脊髓损伤的疗效可受多种影响因素如受伤的时间、节段、性别等的影响,而患者受伤后应在哪个时间段进行嗅鞘细胞移植目前尚无定论.目的:关注嗅鞘细胞移植时间窗的选择对脊髓损伤患者运动和感觉功能恢复的影响.设计:自身前后对照观察.单位:泰安荣军医院神经外科.对象:选择2004-06/2007-06山东省泰安荣军医院脊柱脊髓外科收治的脊髓损伤患者135例,其中男121例,女14例;年龄7~59岁,平均36岁.脊髓损伤时间:0~6个月21例,7个月~2年71例,2年以上43例.纳入患者或其(未成年)父母了解这一临床试验的特殊性和可能结果;患者或其监护人同意接受细胞移植治疗并签自愿接受协议书;实验和治疗方案符合中国卫生部(91-006)文件规定,经山东省泰安荣军医院伦理委员会批准.方法:①将流产胚胎的嗅球消化成单个嗅鞘细胞后培养7~15 d待用.产妇同意提供流产胚胎用于实验,此方案经过医院伦理委员会批准.②患者全身麻醉后,借助显微镜将已培养好的嗅鞘细胞悬液采用多靶点注射的方法分别移植到相应的区域内.靶点的选择据损伤情况而定,一般位于损伤区域的上下两端及左右侧正常脊髓处.据损伤区域的大小决定靶点的多少,每个靶点注射细胞量约100万单位,悬液约50 μL,含量大约2×1010 L-1,一般为2~5个靶点.③于移植前及移植后2~8周按照美国脊髓损伤学会制定的美国脊髓损伤学会标准评估患者运动和感觉功能.主要观察指标:美国脊髓损伤学会标准评分.结果:脊髓损伤患者135例均进入结果分析.不同移植时间窗脊髓损伤患者运动和感觉功能均较移植前有明显提高,差异有非常显著性意义(P < 0.01);不同移植时间窗患者移植后运动和感觉功能分数及分数提高程度比较,差异无显著性意义(P > 0.05).结论:嗅鞘细胞移植可促进脊髓损伤患者的神经功能恢复,且不存在移植时间窗差异. 相似文献
104.
高瑞 《中国危重病急救医学》1991,(2)
我院从1985年~1990年抢救来苏儿中毒15例,抢救体会报告如下:1 临床资料1.1 一般情况:性别、男性2例、女性13例:年龄18~35岁;口服5%来苏儿液量为30~400ml 不等,服 相似文献
105.
目的探究不同流产方式及次数对继发性不孕的影响,为继发性不孕的临床治疗和预防策略提供一定的依据。方法采用以医院为基础的病例对照研究方法,利用医院数据库收集信息,采用t检验、χ2检验、Logistic回归分析处理数据。结果人工流产(OR=2.95,95%CI[2.41,3.60])和药物流产(OR=9.25,95%CI[5.27,16.23])是继发性不孕的可能危险因素;人工流产不同组别(1~2次组:OR=2.85,95%CI[2.30,3.53];3~5次组:OR=3.07,95%CI[1.88,5.02];5以及5以上组:OR=10.72,95%CI[1.24,92.57])、1~2次药物流产病例组与照组有统计学差异(OR=9.15,95%CI[5.13,16.34]),且人工流产随着次数的增加继发性不孕的危险度加大(χ2=111.80,P0.05)。结论应加强卫生宣教,减少非自然流产的发生,降低流产术前和术后的感染风险。 相似文献
106.
环孢素A有2种剂型.早期的液态制剂生物利用度差,药代动力学稳定性差,现使用较少,更多应用的是微乳化的环孢素A.环孢素A最早于1981年用于LN治疗,当时口服剂量高达10 mg·kg-1·d-1,药物不良很大,现已摒弃.1.增殖型狼疮性肾炎环孢素A应用于增殖型LN的循证医学级别较高的研究不多.目前循证医学分级达1~2级的研究主要有3个.Fu等在1998年进行的随机对照研究人组了40例Ⅲ或Ⅳ型LN伴肾病综合征患儿,分别给予环孢素A(5 mg·kg-1·d-1)或泼尼松(2 mg·kg-1·d-1)联合环磷酰胺(2 mg·kg1·d-1)治疗,疗程1年.结果显示,环孢素A组患儿的蛋白尿下降程度与泼尼松组相当,而且环孢素A患者的生长速度明显高于泼尼松组. 相似文献
107.
本文对动静脉畸形破裂出血误诊1例分析如下.
1病历摘要
男,48岁,高处摔伤致意识障碍4h入院.4h前在大货车上搬卸货物时不慎跌伤,枕部着地,致昏迷.既往无高血压病史,无头痛及癫痫史.查体:中度昏迷,GCSE1 V1 M3.枕部肿胀.双瞳孔圆形,散大,直径约4 mm,直、间接光反射均消失.四肢肌张力增高,双下肢巴彬斯基征阳性.头颅CT示:右枕后侧脑室后方出血并破入脑室,中线左移大于1 cm.环池显影不良.诊断特重型闭合性颅脑损伤:(1)脑疝形成;(2)右枕叶脑挫裂伤并血肿形成破入脑室.急给术前准备甘露醇250 ml快速静脉滴注,呼吸衰弱行气管插管,血液检查示:A型,RH(一).急诊在全麻下行右额颞顶枕大骨瓣开颅血肿清除术,术中见硬脑膜张力很高,快速放射状剪开,见自颅底处汹涌出血,急性脑膨出,给予颞极切除行内减压但右枕叶肿胀迸裂自深部再次汹涌出血,2根吸引管进入出血部位探查见相互纠结的蚯蚓状血管团大量出血,证实为脑动静脉畸形(AVM).止血十分困难,术野难以显露,血压显著下降,未备得配型的“熊猫血”,患者病情危急已不可耐受继续手术操作.去除骨瓣关颅结束手术,救治无效死亡. 相似文献
108.
目的: 了解新疆昌吉地区哈萨克族体检人员口腔健康知识、态度及行为(KAP)的现况,为针对性开展口腔保健知识教育提供科学依据。方法:针对到新疆昌吉州人民医院口腔科体检的哈萨克族人员 300名,进行口腔KAP的调查与分析研究。获得有效问卷275 份,采用Excel 2003将调查数据双份独立录入计算机,应用SPSS 17.0软件包对数据进行χ2检验。结果:本组哈萨克族体检者获得口腔卫生知识的主要途径为媒体(69.4%),只有8.7%的人选择定期进行口腔检查。仅有44%的体检人员主动获取口腔卫生保健知识,64.4%的人相信健康教育。56%的人每天刷牙2次及2次以上,仅有4%的人选择牙线。对口腔疾病的治疗,69.5%的体检者会选择大型医院的口腔科,仅有6.9%的人在选择医师上无所谓。口腔健康知识、态度、行为水平的发展不平衡,不同文化程度,经济收入高低之间的差异在口腔健康行为方面如刷牙次数及口腔疾病治疗时对医师、医院的选择均有统计学意义。结论:新疆昌吉地区哈萨克族体检者的口腔健康知识较薄弱,口腔保健态度非常积极但其口腔健康行为却不尽如人意,有待于进一步加强口腔健康教育及口腔健康知识的普及。 相似文献
109.
110.
目的研究高脂高热量饮食对中国健康受试者口服阿托伐他汀钙胶囊药代动力学的影响。方法采用随机、交叉、自身对照设计方法,将24名健康受试者随机分成2组,分别在两个不同试验周期空腹和进食高脂高热量食物30min后口服20 mg的阿托伐他汀钙胶囊。受试者在给药前和给药后不同时间点采集血样,用建立的HPLC-MS/MS方法测定血浆中阿托伐他汀的浓度,计算相应的药代动力学参数,比较分析空腹和进食高脂高热食物给药后药动学参数的差异。结果 24名受试者在进食和空腹状态下口服阿托伐他汀钙胶囊20mg的主要药代动力学参数:Cmax分别为(4.71±2.36)ng·mL-1、(12.35±6.85)ng·mL-1;tmax分别为(2.49±2.06)h、(0.49±0.24)h;t1/2分别为(13.85±4.23)h、(15.84±12.48)h;AUC0-t分别为(47.74±18.23)ng·mL-1、(51.50±17.58)ng·mL-1。结论进食高脂高热量食物对阿托伐他汀吸收速度影响较大,而对消除速度和吸收程度影响较小。 更多还原 相似文献