血浆凝血因子Ⅷ含量检测实验室间比对分析探讨

目的以血浆凝血因子Ⅷ含量检测的实验室间比对为例,探讨通过实验室间比对验证实验室检测能力的可行性。方法同一份标本分为两份,将其中一份标本和标准品送至比对实验室检测,另一份留本实验室检测。比对实验室Ⅷ因子标准品各浓度点与其相应的检测百分比活性值建立曲线回归方程,从而实现浓度与百分活性的换算。对检测结果采用CLIA′88推荐的允许误差进行比对。结果比对实验室血浆凝血因子Ⅷ标准品曲线回归方程的相关系数为0.999 7,线性较好;本实验室与比对实验室血浆凝血因子Ⅷ的检测结果其重复性均小于10%,且本实验室的检测结果落在靶值±15%以内。结论本实验室对血浆凝血因子Ⅷ含量检测结果准确、可靠;实验室间比对是验证实验室检测能力的一种有效的途径。     

急性髓系白血病核仁磷酸蛋白基因及其突变检测方法的建立

本研究建立PCR技术检测白血病细胞核仁磷酸蛋白（nucleophosmin，NPM）基因及突变的方法。以白血病细胞系和白血病临床标本为研究对象，首先采用RT—PCR检测NPM mRNA表达水平，其次应用PCR方法检测NPM第12外显子，并对扩增产物进行测序分析，最后以插入NPMA型突变cDNA的质粒作为阳性模板，建立PCR检测NPM突变的方法并进行方法学评价，并采用此方法直接检测白血病细胞中是否存在NPM基因突变。结果表明：白血病细胞系NPM mRNA表达水平较正常单个核细胞对照组高，23例急性髓系白血病标本均不同程度地高表达NPM mRNA；采用PCR扩增联合测序分析发现，髓系白血病细胞系（THP1和K562）NPM基因组第12外显子无突变，但K562细胞NPM基因3’非编码区存在1个T碱基缺失；建立直接针对NPMA型突变cDNA的PCR方法，能特异扩增NPMA型突变基因；该方法重复性好，批内、批间变异系数分别为1．6％和3．1％，灵敏度为100PgcDNA；采用此方法从23例白血病临床标本中检出2例NPM突变阳性。结论：建立了检测NPM mRNA水平和A型突变的实验方法，发现白血病细胞高表达NPM mRNA水平，部分白血病患者NPM基因发生A型突变。     

重庆地区不同血液制剂质量检测回顾性分析

目的 通过回顾性分析重庆地区各级血站近2年不同血液制剂抽检结果,为制定相对统一的质量控制策略,从而达到辖区内各血站同质化建设的要求提供参考。方法 回顾性分析重庆地区6家采供血机构血液制剂关键质量检测数据。按各单位近2年临床发放量,选择确定去白细胞悬浮红细胞、冷沉淀凝血因子、病毒灭活新鲜冰冻血浆、单采血小板作为研究对象。收集并分析2019年1月～2021年6月上述各类血液制剂质量抽检结果数据。结果 5家血站制备的去白细胞悬浮红细胞(1 U),其Hb、白细胞残留量、期末溶血率有差异(P<0.05);Hct无差异(P>0.05)。3家血站制备的冷沉淀凝血因子(1 U),Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量均有差异(P<0.05);5家血站制备的冷沉淀凝血因子(2 U),Ⅷ因子含量和纤维蛋白原含量均有差异(P<0.05)。3家血站制备的病毒灭活新鲜冰冻血浆,Ⅷ因子含量、血浆蛋白浓度、亚甲蓝残留量结果均有差异(P<0.05)。2家血站制备的单采血小板,Plt、WBC混入量、RBC混入量,期末pH值均有差异(P<0.05)。结论 不同血站提供的血液制剂其质量指标虽然满足国...     

白膜法手工制备血小板与机制血小板的质量分析

目的比较手工分离及机器分离两种方法制备血小板的相关质量指标。方法对来源于街头采集的400 ml全血60袋,分别采用机器及手工分离白膜层,比较两种制备方法的白膜层血小板回收率、终产品血小板回收率、血小板含量、红细胞混入量、产品容量。结果机器分离血小板白膜层的血小板回收率及产品血小板回收率均高于手工分离制备(P0.05)。两种制备方法的红细胞混入量的差异无统计学意义(P0.05)。手工分离血小板终产品容量变异系数高于机器制备血小板(P0.05)。结论机器制备浓缩血小板所收集的血小板回收率及容量均优于手工制备血小板。     

脂肪血制备悬浮红细胞的质量研究

目的研究脂肪血制备的悬浮红细胞的质量变化。方法按常规制备滤除白细胞悬浮红细胞的方法处理轻、中、重度脂肪血及正常血,检测其过滤前后红细胞渗透脆性,观察红细胞在储存期K+、Na+浓度、pH值、游离血红蛋白浓度的变化。结果中、重度组红细胞渗透脆性在过滤后明显增高,轻度组、正常组无明显变化。储存期中、重度组红细胞K+浓度、游离血红蛋白浓度明显高于轻度组和正常组(P0.05)。Na+浓度、pH值各组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论对于轻度脂肪血可采用弃其血浆,利用红细胞,而对于中、重度脂肪血应该选择报废。     

单采血小板乙型肝炎病毒表面抗原快速检测的漏检分析

目的：通过比较胶体金法和酶联免疫法检测前端漏检单采血小板献血员标本结果,分析快速检测筛查漏检原因。方法采用金标法和酶联免疫法再次检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）前端筛查阴性、采集后酶联免疫吸附试验（ELISA）检测呈反应性的31例单采血小板献血员标本,对结果进行对比分析。结果31例前端漏检标本ELISA检测结果均为阳性,再次用胶体金法检测有16例阴性,15例阳性,总的一致性为48．4％。ELISA阳性标本中S/CO值小于10前端筛查漏检再次用胶体金法检测为阳性结果的有3例,阴性14例,一致性为9．7％;S/CO值在10～30时用胶体金法检测为阳性的标本总共有14例,阴性为2例,一致性为45．2％;S/CO值大于30的9例标本再次用胶体金法检测全部检出,一致性为100．0％。结论试剂检测方法不同所致的分析灵敏度差异和检测过程中操作不当是 HBsAg漏检的主要原因,胶体金试剂与ELISA试剂包被片段不同以及观察时间不够也是单采血小板 HBsAg漏检的常见原因。     

血站不同型号血细胞分析仪检测结果比对分析

目的探讨血站不同型号血细胞分析仪检测结果的一致性。方法在各自仪器校准的基础上,以参加卫生部室间质评结果优秀的仪器为参考,用新鲜血标本分析其他仪器。结果经过比对后的仪器,检测结果准确性和一致性得到保证。结论不同型号血细胞分析仪在各自校准后,检测结果仍然存在差异,定期进行不同型号仪器间比对,有非常实用的意义。     

大型酶免实验检测系统厂家校验后确认方法的建立及应用

目的建立实验室全自动酶免检测系统经厂家校验后的确认方法,确保检验仪器工作状态正常。方法以同批号同浓度的中值质控品作为检测对象,首先手工检测所用试剂盒的精密度(RSD);其次手工加样后分别以DADE-BEhring全自动酶免疫分析仪和独立洗板机及酶标仪后处理,平行比对以确认DADE-BEhring全自动酶免疫分析仪的工作状态;最后通过调整的X iril全自动加样系统的加样模式,确认其最佳精密度。结果试剂盒RSD<15%,符合预期要求;DADE-BEhring全自动酶免疫分析仪对试剂的检测结果RSD<15%,运行良好;X iril全自动加样系统在未下调加样针且多针模式加样(A组),RSD值高达42.2%,下调加样针且多针模式加样(B组),RSD值为18.1%;下调加样针且单针模式加样(C组),RSD值降低至13.5%。同时手工加样组,RSD值为7.7%,与C组接近,X iril全自动加样系统工作状态良好。结论利用全自动酶免检测系统检测同一样品的方法不仅可用于仪器厂家校验后的确认,还可应用到该类设备修理或大型维护后的确认及在日常工作中对包括仪器、试剂等整个实验系统的监控,能够及时发现系统误差。