Ⅰ型胶原及骨膜蛋白在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片中的表达研究

目的：探究Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、骨膜蛋白(POSTN)在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片中的表达情况。方法：在体外分离培养骨质疏松大鼠BMSCs,鉴定其克隆形成能力、多向分化能力,采用富含L-抗坏血酸培养基连续诱导构建细胞膜片,诱导5、10 d形成的细胞膜片经HE染色及Masson染色后,观察细胞膜片结构,分别采用qRT-PCR及免疫组织化学染色检测细胞外基质(ECM)中Col-Ⅰ、POSTN在基因及蛋白水平的表达情况。结果：体外分离培养的骨质疏松大鼠BMSCs具有克隆形成能力及成骨、成脂分化能力,L-抗坏血酸连续诱导获取的细胞膜片富含ECM;qRT-PCR结果显示,诱导第10天细胞膜片的ECM相关基因Col-Ⅰ及POSTN的mRNA相对表达量高于第5天(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示诱导时间延长,细胞膜片中的ECM相应增多,且高表达Col-Ⅰ及POSTN。结论：PMO大鼠BMSC膜片可保留自身分泌的ECM,细胞膜片富含Col-Ⅰ及POSTN,为后续自体移植细胞膜片实现骨质疏松状态下骨组织再生提供帮助。     

纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性与牙周病活动性的关系

目的研究牙周炎维护期龈沟液(GCF)中组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)活性与牙周炎活动期发生的关系。方法慢性牙周炎患者牙周基础治疗后1个月，对全口牙进行检查并记录牙周情况。3个月后再次进行复查，筛选出活动期牙位，测定活动期GCF中t-PA及PAI的活性，并和邻近非活动期牙位进行比较。结果牙周炎活动性的估计年发生率约在8．61％；最常发生牙周炎活动性破坏的是上颌磨牙；牙周炎活动性多见于邻面。非活动性位点与活动性位点之间t—PA及PAI的活性、PAJ／t—PA比值差异均无显著性。结论现有的牙周炎活动性诊断标准具有局限性，本研究尚不能确定t-PA及PAI活性与牙周炎活动性之间的关系。     

hBMP-7基因瞬时转染绝经后骨质疏松大鼠骨髓基质细胞的表达及对其生物学活性的影响

目的观察hBMP-7基因瞬时转染对去卵巢（OVX）大鼠的骨髓基质细胞（BMSCs）生物学特性的影响。方法通过去除双侧卵巢构建SD大鼠绝经后骨质疏松模型后,全骨髓法培养大鼠BMSCs,通过重组腺病毒将hBMP-7基因转染入OVX大鼠BMSCs。观察转染后细胞形态及生长情况以及碱性磷酸酶（ALP）变化。结果荧光显微镜下,转染24h后即可见大量绿色荧光蛋白表达阳性的细胞,基因转染效率高于70%。转染后细胞形态无明显改变,细胞增殖能力没有明显改变,ALP活性明显增高。免疫细胞化学染色结果表明,hBMP-7基因在OVX大鼠BMSCs中得到了有效的表达。结论重组腺病毒能够有效地将hBMP-7基因转染到OVX大鼠BM-SCs中,且hBMP-7能有效表达。基因转染对OVX大鼠BMSCs的增殖无明显影响,转染可促进OVX大鼠BMSCs向成骨细胞分化。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对牙周韧带细胞损伤模型愈合的影响

目的 研究不同浓度牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对牙周韧带细胞(PDLCs)损伤模型愈合的影响.方法 采用组织块法体外培养人PDLCs,取生长良好的第4代PDLCs接种于12孔板,待细胞融合后制备直径约8 mm的圆形损伤模型,加入含不同浓度Pg-LPS的培养液培养,结晶紫染色观察损伤区细胞愈合情况、并检测损伤后各...     

牛肌腱复合胶原与人牙周膜成纤维细胞培养的实验研究

目的　观察牛肌腱复合胶原三维支架材料 (tendon mixed extraction of bovine collagen,t MEBC)与人牙周膜成纤维细胞的生物相容性 ,探讨其应用于牙周组织工程的可行性。　方法　胎牛肌腱经脱细胞、冷冻 -干燥方法构建复合胶原三维支架载体 ,取 4～ 6代人牙周膜成纤维细胞 (human periodontal ligament fibroblasts,HPDL Fs) ,接种浓度 5× 10 6 / ml与 t MEBC复合材料共培养 ,于培养第 1、3、5及 10天 ,细胞计数法了解细胞附着及增殖情况 ;培养第 5、10天 HE染色、扫描电镜行形态学观察。　结果　 t MEBC具有良好的多孔网状结构 ,HPDL Fs黏附良好 ,复合培养 1d细胞密度达 0 .5 5 6× 10 4 / ml,随培养时间延长细胞增殖明显 ,培养第 10天细胞密度达 3.94 4× 10 4 / ml;组织学检测显示细胞均匀分布于材料内部 ,形成良好的细胞材料复合体。　结论　 t MEBC具有良好的生物相容性 ,可作为支架材料复合HPDL Fs应用于牙周组织工程研究。     

骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的体外构建研究

目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的构建及基本生物学特性。方法建立大鼠绝经后骨质疏松症(PMOP)模型,分离培养骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(O-r BMSCs),并以O-rBMSCs为种子细胞构建细胞膜片。通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜及透射电镜对细胞膜片进行形态学检测;以免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白的表达情况。结果成功建立了大鼠PMOP模型,体外分离培养的O-rBMSCs具有多向分化潜能。显微镜下可见细胞复层生长,采用富含维生素C的培养基连续培养10 d左右即可获得白色膜样结构,该细胞膜片具有较好的弹性,HE染色及扫描电镜观察发现O-rBMSCs膜片由多层细胞及丰富的细胞外基质组成。透射电镜下可观察到细胞间连接。免疫组织化学染色示O-rBMSCs膜片高表达Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白。结论 O-rBMSCs体外采用富含维生素C的培养基连续培养可构建细胞膜片,该细胞膜片富含细胞外基质,有望应用于骨质疏松机体的组织再生。     

组织工程方法构建复合培养细胞的引导组织再生膜

目的：探讨可吸收引导组织再生胶原膜（BME10－X）的生物相容性，构建引导组织再生膜。方法：用组织工程方法将人牙周膜成纤维细胞与BME10－X复合培养，培养第7、14d进行组织学及扫描电镜、透射电镜观察。结果：人牙周膜成纤维细胞可在BME10－X上贴附、增殖，分泌大量的细胞外基质，复层生长形成纤维组织结构，基本形成具有活性细胞及其基质的膜样组织，BME10－X在培养一周即出现可见的吸收。结论：BME10－X具有良好的生物相容性，可作为牙周膜细胞的载体应用于牙周组织工程研究。     

氧化苦参碱抑制大鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收的实验研究

目的探讨中药氧化苦参碱对大鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收的抑制作用。方法将25只SD大鼠随机分为3组,即正常对照组、空白对照组和实验组。采用钢丝结扎法建立大鼠实验性牙周炎动物模型。实验组在造模期间给予氧化苦参碱灌胃,空白对照组给予等量生理盐水灌胃。灌胃给药6周后处死大鼠,光学显微镜下观察牙周组织病理学变化,测量釉牙本质界到牙槽嵴顶的距离。结果空白对照组及实验组大鼠的牙槽骨均有不同程度的吸收,实验组大鼠牙周组织炎症反应明显轻于空白对照组,牙槽骨吸收量也较小。结论氧化苦参碱可在一定程度上抑制大鼠实验性牙周炎牙槽骨吸收。     

3种不同类型牙周超声治疗仪对牙根表面影响的对比研究

目的 比较3种牙周超声治疗仪的工作效率及对牙根面的影响,为临床选择合适的牙周超声治疗仪提供依据。 方法 选取30颗因重度牙周炎拔除的单根牙,随机分成:EMS Piezon Master 700压电陶瓷刮治组(EMS刮治组)、深圳邦沃磁致伸缩刮治组(邦沃刮治组)和德国Vector刮治组(Vector刮治组)。分别记录去除相同面积的根面牙石所需的操作时间,并对刮治后的根面进行粗糙度检查和扫描电镜观察。 结果 Vector刮治组刮治所需时间明显长于EMS刮治组和邦沃刮治组(P<0.001); Vector刮治组刮治后的根面粗糙度最小,明显小于EMS刮治组和邦沃刮治组(P<0.001),EMS刮治组刮治后的根面粗糙度小于邦沃组(P=0.018); 电镜下Vector刮治组根面清洁完整,而其他两组均可见不同程度的划痕和牙骨质剥脱。 结论 Vector牙周超声治疗仪对牙根面的损伤程度最小,但工作效率最低; 邦沃牙周超声治疗仪的工作效率最高,但对根面的损伤较大; EMS牙周超声治疗仪的工作效率和对根面的影响介于两者之间。临床上应依据患者的不同情况和需求选择合适的牙周超声治疗仪。     

心律宁治疗过早搏动100例

以中药心律宁汤加减治疗快速型心律失常过早搏动100例。心律宁汤具有益气养血,活血化瘀,豁痰泄浊,解毒泻火,滋阴复脉之效。结果:总有效率为97%。