不同微波烘烤程度的山绿茶炮制品降血压作用比较研究

摘要：目的：对广西特产药材山绿茶Ilex hainanensis Merr.进行中药炮制实验研究,并对其进行降血压实验研究。方法：使用不同炮制方法对山绿茶进行炮制;采用尾动脉法测原发性高血压大鼠（SHR）血压,对不同炮制品山绿茶进行降血压实验研究。结果：通过不同微波程度药材炮制,共得到6种山绿茶炮制药材;与模型组比较,不同炮制工艺山绿茶均有明显的降血压效果。不同微波炮制品种,以60g药材微波11min组降压作用最佳。结论：初步确定山绿茶最佳微波炮制程度以60g药材微波11min组降压作用最佳,此方法炮制出的山绿茶药材对SHR血压的作用效果最好。     

不同产地磨盘草石油醚部位的特征图谱研究

目的:研究不同产地磨盘草石油醚部位的高效液相特征图谱,为壮药磨盘草的质量控制和该部位的谱效关系提供实验依据。方法:采用HPLC法,以Agilent SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈和0.1%磷酸溶液系统为流动相,进行梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0 mL/min,检测波长:205 nm。结果:初步建立了磨盘草石油醚部位的高效液相特征图谱,共确定出12个特征峰,各产地进行验证,重复性好,出峰时间较为稳定。结论:高效液相特征图谱为磨盘草石油醚部位的质量控制提供了稳定的新方法,为进一步探讨其药用部位的研究提供实验基础。     

三七总皂苷对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞转化生长因子-β、血管内皮生长因子表达的影响

目的观察三七总皂苷对拟缺血损伤脑微血管内皮细胞的凋亡和转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响,以期揭示三七总皂苷发挥脑保护作用的分子机制。方法原代培养大鼠脑微血管内皮细胞,采用氧糖剥夺法制备拟缺血损伤模型,分为正常组、模型组、三七总皂苷组,流式细胞术检测细胞凋亡情况、酶联免疫吸附法检测细胞TGF-β1,VEGF-B水平、Western blotting法检测细胞TGF-β蛋白的表达水平。结果模型组细胞凋亡率与正常组相比显著性升高（P<0.01）;与模型组相比,三七总皂苷组细胞凋亡率明显下降（P<0.01）;与正常组相比,模型组细胞上清液中TGF-β1含量明显增多（P<0.05）;与正常组相比,模型组细胞上清液中VEGF-B含量显著性增多（P<0.01）;与模型组相比,三七总皂苷组中细胞上清液中VEGF-B含量明显增多（P>0.05）;正常组内皮细胞TGF-β表达量较少,造模后,TGF-β表达显著增加（P<0.05）,三七总皂苷能够下调TGF-β蛋白的表达。结论三七总皂苷可能通过抑制内皮细胞的凋亡,保持内皮细胞的完整性,上调VEGF表达,促进缺氧条件下血管的新生,这可能是三七总皂苷脑保护的机制之一。     

缺血再灌注损伤脑微血管内皮细胞Necroptosis模型的建立

目的:采用拟缺血再灌注损伤结合z-VAD-FMK(Benzyloxyearbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone,z-VAD-FMK)干预,探索一种脑微血管内皮细胞(Brain Microvascular Endothelial Cells,BMECs)Necroptosis模型。方法:首先利用原代大鼠脑微血管内皮细胞,采用氧糖剥夺及复氧复糖方法,筛选出拟缺血再灌注损伤时间点。在拟缺血再灌注模型基础上,予Casepase抑制剂z-VAD-FMK 20μmol/L干预,采用CCK-8检测细胞活性;透射电镜观察细胞超微结构;Annexin V-FITC/PI(Propidium Iodide)双染色法检测细胞死亡方式。结果:确定氧糖剥夺2 h复氧复糖8 h,作为拟缺血再灌注时间点;z-VADFMK作用于拟缺血再灌注损伤BMECs后,细胞活性无统计学意义;z-VAD-FMK干预组在电镜下呈现明显的Necroptosis特征;流式检测显示,各象限细胞比率无明显变化,但Necroptosis特异性抑制剂Nec-1可显著降低Q2象限细胞比率,提示z-VAD-FMK干预抑制了细胞晚期凋亡,诱导了Necroptosis的发生。结论:z-VAD-FMK可诱导拟缺血再灌注脑微血管内皮细胞发生Necroptosis,为以后研究缺血性脑中风necroptosis机制提供了细胞实验模型。     

壮药净癣洗剂质量标准研究

目的：建立壮药净癣洗剂的质量标准。方法：采用薄层色谱法（TLC）对壮药净癣洗剂中功劳木、苦参药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）法对方中苦参碱进行含量测定。色谱条件：色谱柱为Inertsil ODS-3柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）,检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min;柱温为30℃。结果：苦参碱进样量在1～10μg内与峰面积值呈良好的线性关系,回归方程为Y=74133X-5 914.7(r2=0.999 7),平均加样回收率为100.77%,相对标准偏差（RSD）为0.6%(n=6)。并随机抽取了3批制剂进行苦参碱的含量测定,结果平均含量分别为16.231 2 mg/ml、16.035 1 mg/ml、16.051 0 mg/ml,RSD分别为1.87%、1.85%、1.99%（均n=3）。结论：所建立的苦参碱含量测定方法可行性强、操作简单、准确可靠,可为壮药净癣洗剂的质量控制提供参考依据。     

大黄的炮制对生大黄、熟大黄5种游离蒽醌含量的影响测定

目的:采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定生、熟大黄中的5种游离蒽醌的含量及差异,探讨中药炮制前后物质基础的变化规律.方法:使用色谱柱为Thermo BDS HYPERSⅡC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1％磷酸(85:15)水溶液为流动相,检测波长为256 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL.结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在0.0207～0.414(R2=0.9999)、0.1721～3.442(R2=0.9996)、0.0203～0.406(R2=0.9999)、0.148～2.96(R2=0.9998)、0.164～3.28(R2=0.9993)的线性范围内呈良好线性关系;生大黄经炮制后,芦荟大黄素含量下降约8.26％,大黄酸下降约9.21％;而大黄素含量增加约16.44％,大黄酚增加约16.12％,大黄素甲醚增加约20.01％,说明炮制工艺对大黄各成分影响不同.结论:大黄炮制后,其5种游离蒽醌的含量受到不同程度的影响,该方法可作为大黄及其不同炮制品的质量控制方法.     

艾可清颗粒不同给药方式对大鼠高效抗逆转录病毒治疗中齐多夫定药代动力学的影响

目的研究艾可清颗粒不同给药方式对大鼠高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)中齐多夫定(zidovudine,AZT)药代动力学的影响。方法将36只大鼠分为3组进行灌胃给药:Ⅰ组采用HAART,即拉米夫定(3TC,31.5 mg/kg)加AZT(31.5 mg/kg)加依非韦伦(EFV,63.0 mg/kg);Ⅱ组在HAART给药同时给予艾可清颗粒(525 mg/kg);Ⅲ组在HAART治疗后间隔120 min后给予等量艾可清颗粒。采用液质联用法分别测定各组大鼠给予HAART前及给药后0.5、1、2、3、4、6、8、10、12h时AZT血药浓度;采用DAS 2.0软件计算药物半衰期(t_(1/2))、达峰浓度时间(T_(max))、药物达峰浓度(C_(max))、从0~t时间内的血药浓度-时间曲线下面积(AUC_(0-t))及药物清除率(plasma clearance rate,CL)等药代动力学参数。结果 AZT的回归方程线性关系良好,精密度、回收率、稳定性都得到确定。Ⅱ组、Ⅲ组血药浓度曲线高于Ⅰ组,3组t_(1/2)、T_(max)、C_(max)、AUC_(0-12h)、AUC_(0-∞)及CL比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论艾可清颗粒联合HAART可提高AZT最高血药浓度。