胃癌术后化疗对外周血免疫细胞比例及凋亡的影响

目的探讨胃癌患者术后及化疗中外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞动态变化和淋巴细胞凋亡情况及其意义.方法以流式细胞术检测64例胃腺癌术前后及化疗期间外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞变化,并以Annexin-V/PI双标记流式细胞术检测淋巴细胞凋亡及坏死情况.结果胃癌患者根治术后3d外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞数量较术前轻微下降,统计分析未见显著性差异.至化疗前1d,患者外周血CD3、CD4及NK增高显著(P<0.05),而CD8下降非常显著(P<0.01).化疗开始后CD3、CD4和CD8降低明显,但CD4/CD8改变不明显,而且NK细胞降低迟于CD3等,恢复也较快.淋巴细胞凋亡及坏死在化疗期间增加明显,化疗结束3d后方下降.结论胃癌根治手术本身对细胞免疫功能影响轻微,术后细胞免疫功能异常情况得到明显改善.化疗对淋巴细胞数量有较明显一过性抑制,可能与化疗药物致淋巴细胞凋亡和坏死有关,但对淋巴亚群比例影响不大.     

缝隙连接蛋白基因43在胃癌腹膜转移中的作用

目的 探讨缝隙连接蛋白基因43(Cx43)与胃癌临床病理特征的关系及在胃癌腹膜转移中的作用.方法 采用免疫组织化学染色法检测2000年1月至2008年12月第三军医大学西南医院收治的32例诊断为胃癌合并腹膜转移患者的胃癌、癌旁及腹膜转移组织中Cx43的表达,并分析其与临床病理因素的关系.采用Spearman等级相关分析,Fisher确切概率法、X~2检验对结果进行分析.结果 Cx43主要定位于细胞膜和细胞质,Cx43在胃癌组织中的阳性表达率为34%(11/32),在癌旁组织中为100%(32/32),在腹膜转移组织中为94%(30/32),胃癌组织与癌旁组织Cx43的阳性表达率比较,差异有统计学意义(X2=28.350,P<0.01),胃癌组织与腹膜转移组织Cx43的阳性表达率比较,差异有统计学意义(X~2=21.989,P<0.01);胃癌组织Cx43表达与患者性别、年龄无关(r=-0.030,-0.169,P>0.05),与肿瘤分化程度、组织学分型和淋巴结转移有关(r=0.750,0.642,-0.357,P<0.05).结论 胃癌组织中Cx43表达下调,腹膜转移组织中Cx43表达明显上调,可能是Cx43在胃癌腹膜转移中发挥正性促进作用.     

内皮型一氧化氮合酶与胚胎植入

一氧化氮(NO)是一高活性自由基,参与体内多种生理和病理过程,由一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸生成。目前已确知的NOS亚型有3种,其中内皮型NOS在胚胎植入过程中发挥着不容忽视的作用,其在子宫内膜的表达水平随月经周期变化,受激素、细胞因子、炎症等影响。NO在局部通过对血管通透性、血管发生和子宫蜕膜化的调控,植入期胚胎发育和凋亡的调节而参与植入过程。     

晚期胃肠道肿瘤癌性腹水对树突状细胞的抑制效应研究

目的对癌性腹水体外抑制树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫功能的效应进行观察,着重探讨癌性腹水免疫抑制效应与腹水中IL-10含量的关系.方法分离10例晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水上清,检测IL-10含量;癌性腹水采用抗IL-10中和或直接加入DC体外培养的系统,观察癌性腹水对DC表面分子表达、细胞凋亡及T淋巴细胞刺激功能的影响.结果癌性腹水较对照IL-10含量显著增高,体外对DC有显著抑制作用,能降低DC表面分子表达、抑制DC对T淋巴细胞刺激增殖效应,并显著促进DC凋亡.中和IL-10处理显著减低癌性腹水对DC的抑制效应,但对DC凋亡率无明显影响.结论晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水对树突状细胞免疫功能有显著抑制作用,IL-10含量增高可能是其抑制效应的重要机制.     

不同压力的二氧化碳气腹对胃癌细胞迁移运动和细胞骨架的影响

目的通过体外模拟气腹环境，观察不同压力CO2或He（helium）对胃癌细胞MKN-45迁移运动和细胞骨架的影响。方法将MKN-45细胞置于充满CO2或He的密闭培养箱中，按模拟气腹种类不同分为对照组、CO2气腹组和He气腹组，模拟气腹压力分别为12mmHg和15mmHg，作用时间均为4h。于处理结束后即刻用血气分析仪检测培养液pH值；Transwell法观察细胞迁移运动变化；激光共聚焦显微镜观察细胞骨架变化。结果CO2组细胞培养液呈酸性，He组细胞培养液呈碱性。CO2组和He组在12mmHg压力下MKN-45细胞穿过滤膜的数量较对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。CO2 15mmHg组细胞穿过滤膜的数量较对照组明显减少（P〈0．01）；He15mmHg组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）；CO2 15mmHg组细胞微丝、微管结构模糊，伪足消失。结论在临床常用气腹压力（12mmHg）下CO2对胃癌细胞迁移运动及细胞骨架无明显影响；在15mmHg压力下，CO2对胃癌细胞迁移运动起抑制作用，其作用机制可能与其细胞骨架受破坏有关。     

缺氧诱导因子1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞凋亡的影响

目的 通过体外模拟CO2气腹环境,构建沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNAi表达载体,探讨HIF-1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制.方法 利用密闭培养箱模拟CO2气腹,气腹机维持培养箱内压力分别为0、5、10、15mm Hg.采用荧光定量RT-PCR方法和Western blot方法观察沉默HIF-1α前后MKN-45细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达的变化;免疫细胞化学技术观察沉默HIF-1α前后细胞bcl-2/bax表达的变化;Annexin V-FITC/PI双标染色、流式细胞仪检测沉默HIF-1α前后细胞凋亡比例的变化.结果 沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞HIF-1αmRNA和蛋白表达(分别为1.51±0.04、4.44±0.30)均显著高于对照组(0.584±0.06、2.01±0.06)(P<0.01).沉默HIF-1α前15mmHg组细胞bcl-2/bax比值(0.77±0.05)较对照组(1.43±0.02)明显降低(P<0.05),细胞凋亡比例(11.60±2.11)较对照组(0.30±0.02)增加.而在沉默HI-1α后15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA(0.464±0.04)和蛋白表达(0.92±0.02)、bcl-2/bax比值(1.61±0.04)、细胞凋亡比例(0.4±0.03)与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在CO2气腹环境压力为0、5、10mm Hg CO2时MKN-45细胞凋亡比例与对照组比较无差异,压力为15mm Hg时CO2气腹可促进胃癌细胞凋亡.HIF-1α可能为促进细胞凋亡的原因之一.     

胃癌根治切除术前后外周血 T淋巴细胞亚群及 NK细胞变化

细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的重要组成,外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞等指标在研究机体细胞免疫中有重要提示意义。为了解胃癌患者根治性切除术前后细胞免疫状况的变化,我们检测并观察了64例胃癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞变化情况。1.材料与方法:胃癌组64例为2002年1月到2002年12月住院手术患者,男38例、女26例,平均年龄(52±8)岁;选择同期因胃良性病患(胃溃疡15例、胃平滑肌瘤2例)而行胃大部切除术的17例患者作对照组,男13例、女4例,平均年龄(44±10)岁。于术前1d、术后3、9d分别抽取患者静脉血,肝素抗凝,取100μl血样加入…     

护理干预对肠造口患者自我完整的影响

直肠癌患者尽量实施保存肛门括约肌功能的手术,但部分患者仍需要行腹会阴联合直肠癌根治永久性结肠造瘘术.虽然保全了病人的生命,却忽略了患者的自我完整,严重影响了患者的生活质量.我科从2000年1月至2005年4月对198例结直肠癌肠造口术患者实施护理干预,指导患者掌握改道后的日常生活及自我护理,恢复肠造口患者社会人的完整性.     

树突状细胞疫苗对胃癌患者术后免疫功能影响的初步观察

目的探讨树突状细胞(DCs)疫苗治疗胃癌术后患者的临床疗效。方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗,将50例胃癌术后患者随机分为两组,对照组予以常规化疗;疫苗治疗组常规化疗2周后进行DCs疫苗皮下注射,每周1次、共4次。治疗前后检测患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比的变化,观察DCs疫苗治疗的初步临床效果及不良反应。结果疫苗治疗组外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比在DCs注射2周后开始上升,4周后上升至最高值犤CD3 (71.2±9.8)%,CD4 /CD8 (1.76±0.24)%,NK细胞(13.5±2.6)%犦,第8周下降;与同期对照组犤CD3 (58.8±9.2)%,CD4 /CD8 (1.26±0.29)%,NK细胞(10.8±2.3)%犦相比,差异有显著性意义(P<0.05)。疫苗治疗组患者血常规及肝肾功能检测均正常,未出现明显毒副反应。结论DCs疫苗可明显改善胃癌术后患者T细胞亚群及NK细胞百分比,临床应用无明显不良反应。