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目的简化RDPCR建立程序,并在核酸序列水平精确定位DNA损伤。方法培养TK6细胞,抽提基因组DNA,制备k-ras基因外显子2的单链探针。扩增k-ras基因外显子2(以下称短片段)。酶切短片段和基因组DNA构建损伤模型,前者经依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)扩增,每一步产物作凝胶电泳,终产物与单链探针杂交显色,并进行测序;后者以短片段建立的实验条件进行RDPCR扩增,产物与单链探针杂交显色,并进行测序。结果凝胶电泳可见酶切短片段在RDPCR中每一步骤的目的产物条带;酶切短片段和酶切基因组DNA的RDPCR产物均在相应位置出现杂交条带,测序证实损伤均位于HinfI在k-ras外显子2上的酶切位点。结论短片段建立RDPCR的实验条件简单易行;并首次利用RDPCR检测DNA损伤精确定位于核酸序列水平的碱基位置。 相似文献
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目的:探讨干燥前后藤椒急性毒性的变化及其对小鼠胃肠道作用的影响.方法:采用灌胃给药的方式,单次灌胃鲜藤椒水提物(生药量2.00 g/kg、2.60 g/kg、3.40 g/kg、4.50 g/kg、6.00 g/kg),干藤椒水提物(生药量3.53 g/kg、4.20 g/kg、5.00 g/kg、5.96 g/kg、... 相似文献
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目的:探究藤椒总生物碱的最佳提取工艺条件,并研究藤椒总生物碱对小鼠肝纤维化的保护作用,以期为藤椒作用于肝脏保护提供理论依据。方法:采用醇提法提取藤椒总生物碱,通过单因素和正交试验优化提取参数,并通过动物实验对藤椒总生物碱的抗肝纤维化效果进行评价。结果:总生物碱得率最高的提取参数为:乙醇浓度75%、提取时间1h、提取温度70℃,在此条件下藤椒总生物碱提取率为5.15%。动物实验结果显示,与模型组相比,藤椒总生物碱干预后,小鼠的肝脏系数明显降低,肝组织病理程度减轻,且小鼠血浆的谷草转氨酶Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、总胆红素(Total bilirubin,T.Bi Li)四项指标均有明显下降。结论:采用醇提法提取藤椒总生物碱对小鼠表现出良好的抗纤维化作用。 相似文献
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近年来,源于食品添加剂滥用或非法添加化学物的食品安全事件不断出现,引起了广大人群对食品安全的担忧。应当在正确认识食品添加剂的基础上,采取积极对策,包括开展食品安全风险监测和风险评估、建立统一的食品安全标准体系、加强事前防范、强化源头管理、规范新闻媒体报道等。 相似文献
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目的在核酸序列水平定位检测联苯胺对Ivras基因的DNA损伤。方法联苯胺染毒TK6细胞,提取基因组DNA,制备Ivras基因外显子2的单链探针,应用依赖随机化末端连接物PCR进行Southern blot杂交,对产物进行测序分析。结果联苯胺染毒剂量100μmol/L检测到较k-ras外显子2短的一条清晰的杂交条带,测序结果表明linker与k-ras外显子2的第66位碱基T发生连接。结论首次证实联苯胺可引起Ivras外显子2发生DNA损伤,该损伤位点位于k-ras外显子2的第65位碱基G,可能是联苯胺重要的致癌作用靶点。 相似文献
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临床药理学是以人体为研究对象,主要研究药物在人体内的作用规律及人体与药物间相互作用过程的一门交叉学科,在目前的教学当中存在一定的不足.因此,我们提出从编撰特色教材、实践新的教学方法、开设临床实践课程以及提高教师素质4各方面进行教学改革,以期能激发学生的学习兴趣,让学生学以致用,做到合理指导临床用药. 相似文献
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天麻保健食品开发现状分析 总被引:4,自引:1,他引:3
天麻为兰科真菌营养型多年生草本植物天麻Gastrodia elata的干燥块茎,是中国传统名贵中药材之一,具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络的功效,含有多种活性成分,有很高的营养保健价值,现已被批准为食药试点物质,开发应用空间巨大。通过统计整理国家监管部门公布的天麻相关保健食品和国家知识产权局专利检索平台中的天麻相关专利,对已批准注册的天麻保健食品的保健功能、不适宜人群、主要原料及配伍、功效成分及标志性成分和食用量,以及国内外近10年天麻有关的专利情况进行综合分析,并探讨了天麻开发中特殊气味、安全性、功效成分提取工艺等限制因素,提出了相应处理措施和建议。以期为攻克天麻保健食品开发中的难题提供参考,充分利用天麻资源,提高附加值,促进乡村振兴和天麻产业发展。 相似文献
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当前患者在使用中药的问题上存在不少误区,形成了用药的安全隐患。影响中药安全有效的因素可概括为药物因素、医学因素和社会因素。主要表现在:盲信中药无毒副作用或过分顾虑中药的毒性作用等。政府及相关部门应加强有效的管理,以保证中药临床应用的安全性。加强中药应用安全的管理具有十分重要和紧迫的意义。 相似文献